陰道加德納菌臨床分布特點分析

曹雪萍 張?zhí)燧x 羅蓓 陳慧芬 張軍 張賢華*

陰道加德納菌臨床分布特點分析

曹雪萍 張?zhí)燧x 羅蓓 陳慧芬 張軍 張賢華*

目的 分析生殖道分泌物陰道加德納菌（GV）檢出陽性率及其分布。方法 2013年6月至2015年7月采用免疫熒光法檢測生殖道分泌物GV5050例，對GV檢出陽性率及其分布進(jìn)行分析。結(jié)果 5050例生殖道分泌物中，檢出981例GV陽性，陽性檢出率19.43%。按科室分組，各組患者樣本的GV陽性率分別為：婦科23.39%、宮頸病門診28.61%、產(chǎn)前初診23.27%、男性科3.36%；其他科室由于樣本數(shù)少數(shù)據(jù)不具代表性。GV陽性患者的科室構(gòu)成比分別為：婦科74.01%，宮頸病門診10.91%，產(chǎn)前初診7.54%，男性科6.32%，生殖醫(yī)學(xué)中心0.61%，早孕門診0.31%，簡易門診0.20%，習(xí)慣性流產(chǎn)門診0.10%；以婦科最高。GV陽性患者的性別構(gòu)成比分別為：女性93.68%，男性6.32%。結(jié)論 細(xì)菌性陰道?。˙V）是婦產(chǎn)科常見疾病，GV是BV的重要病原菌，應(yīng)重視GV的送檢。

陰道加德納菌 細(xì)菌性陰道病 免疫熒光技術(shù)

細(xì)菌性陰道?。˙V）是由一些兼性厭氧菌與厭氧菌混合感染，導(dǎo)致陰道內(nèi)微生態(tài)平衡失調(diào)引起的綜合征。臨床表現(xiàn)為陰道分泌物增多，白帶有魚腥臭味及外陰瘙癢灼熱等。BV是婦產(chǎn)科常見疾病，可引發(fā)子宮內(nèi)膜炎，盆腔炎，輸卵管炎癥及產(chǎn)科術(shù)后感染等，還可導(dǎo)致孕婦早產(chǎn)等不良妊娠結(jié)果。加德納菌屬﹑普雷沃菌屬﹑擬桿菌屬﹑動桿菌屬﹑革蘭陽性球菌等，均可引起B(yǎng)V，其中陰道加德納菌（GV）是BV的重要病原菌［1］。此外，GV還可引起男性泌尿系統(tǒng)感染和不育癥［2］。作者采用免疫熒光法對5050例患者樣本進(jìn)行GV檢測，對檢測結(jié)果進(jìn)行分析。

1　臨床資料

1.1一般資料 2013年6月至2015年7月本院生殖道分泌物樣本5050例，男1847例，女3203例。女性患者用無菌棉拭子于陰道距宮頸口1～2cm處，采集陰道后穹窿分泌物；男性患者用無菌纖維拭子插入前尿道2～3cm，旋轉(zhuǎn)1周后停留10s，采集分泌物。

1.2儀器與試劑 熒光顯微鏡（尼康儀器有限公司），溫浴箱（上海博訊實業(yè)有限公司），陰道加德納菌檢測試劑盒（免疫熒光法；深圳市邁科龍生物技術(shù)有限公司）。

1.3方法 將樣本輕緩?fù)坎荚跐崈糨d玻片上，晾干后用甲醇固定10min。自然晾干后吸取5μl陰道加德納菌檢測試劑盒中的免疫熒光試劑，均勻滴加在玻片涂樣處，置37℃溫浴箱內(nèi)孵育30min后用蒸餾水或去離子水緩慢沖洗玻片2～4次，5～10s/次。自然晾干后在熒光顯微鏡下鏡檢。發(fā)現(xiàn)≥10個綠色典型細(xì)桿狀陰道加德納菌為陽性；發(fā)現(xiàn)完整暗紅色復(fù)染上皮細(xì)胞，且未發(fā)現(xiàn)可定義為陽性的典型特征性染色時為陰性。記錄每一例樣本來源科室及檢測結(jié)果并分類統(tǒng)計。

作者單位：200040 同濟(jì)大學(xué)附屬第一婦嬰保健院檢驗科

2　結(jié)果

2.15050例生殖道分泌物熒光免疫法檢測GV結(jié)果 見表1。

表1　5050例生殖道分泌物熒光免疫法檢測GV結(jié)果（n）

2.2981例GV陽性樣本的性別構(gòu)成 見表2。

表2　981例GV陽性樣本的性別構(gòu)成（n）

2.3BV組與非BV組陽性率比較 見表3。

表3　BV組與非BV組陽性率比較（n）

3　討論

目前，檢測GV的方法有分離培養(yǎng)法﹑唾液酸甘酶活性測定法﹑實時熒光定量PCR法和免疫熒光法等。其中免疫熒光法采用熒光素標(biāo)記GV單克隆抗體與樣本抗原特異性結(jié)合的原理檢測GV，具有檢測時間短﹑特異性強﹑敏感性高等優(yōu)點，正逐步應(yīng)用于臨床檢驗診斷。

細(xì)菌性陰道病（BV）是女性常見的疾病，GV是BV的重要病原菌，常引起非孕期婦女尿道炎﹑盆腔炎﹑輸卵管炎和子宮內(nèi)膜炎等；GV還可導(dǎo)致妊娠期婦女宮內(nèi)感染，胎膜早破等不良妊娠后果［3］。近幾年我國不同地區(qū)醫(yī)院婦科門診患者BV患者的GV培養(yǎng)陽性率為40.0%～59.55%，非BV組婦女的GV培養(yǎng)陽性率為1.9%～16.07%［4～6］。本資料顯示本院門診女性患者BV組的GV陽性率為29.3%，明顯低于報道，因BV不僅可由GV感染引起，也可有其他病原菌引起，需綜合分析病情。此外，目前無大量關(guān)于免疫熒光法檢測婦科患者GV陽性率的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)可供參考，報道中采用的細(xì)菌培養(yǎng)法與本資料采用的免疫熒光法的特異性與敏感性的不同也可影響實驗數(shù)據(jù)。本院非BV組婦女的GV陽性率為24.1%，高于報道，產(chǎn)前初診GV陽性率23.27%，高于文獻(xiàn)報道15.51%［3］，可能因部分GV攜帶者無臨床表現(xiàn)。檢測方法的不同，也可能是影響陽性率的因素之一，但在普查時檢出GV的現(xiàn)象應(yīng)該引起重視，建議將GV檢測作為婦科普查項目之一。習(xí)慣性流產(chǎn)門診送檢3例有1例陽性，早孕門診送檢3例全部為陽性；由于例數(shù)過少，盡管以此計算陽性百分率不具有代表性，但提示對這一現(xiàn)象應(yīng)該引起關(guān)注。在后續(xù)的研究中可對此類病例進(jìn)行隨訪，分析GV陽性對孕期婦女妊娠結(jié)果的影響。Sleha R等［2］研究顯示GV與男性不育癥有密切聯(lián)系。本文男性科GV檢出率3.36%，明顯高于相關(guān)報道2.4%［7］，提示GV檢測對于男性的應(yīng)用價值不容忽視。早期檢測GV，對BV的早期診斷及治療﹑減少不良妊娠和優(yōu)生優(yōu)育有其重大意義。

1C A Muzny，J R Schwebke. Gardnerella vaginalis ： Still a Prime Suspect in the Pathogenesis of Bacterial Vaginosis. Current Infectious Disease Reports， 2013 ，15（2）：130～135.

2Sleha R， Bo?tíková V， Salavec M. Bacterial infection as a cause of infertility in humans.Epidemiol Mikrobiol Imunol， 2013，62（1）：26～32. 3 郭颯，涂少華，李懷芳，等.孕婦攜帶加德納菌對妊娠結(jié)局的影響.上海醫(yī)學(xué)，2003，26：85～86.

4戴繪芬，徐振東，花鴻燕.多項目聯(lián)合檢測在陰道加德納菌感染的應(yīng)用研究.當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2015，（06）：27～28.

5高劍云，陳建忠，周堅紅.采用套式PCR檢測細(xì)菌性陰道病病原體陰道加德納菌及細(xì)菌耐藥性測定.中國衛(wèi)生檢驗雜志，2010，20（5）：1124～1126.

6黃妙嬋，鐘開位，溫燕云.2008-2010年某地區(qū)細(xì)菌性陰道病的病原菌及其耐藥性研究.中國醫(yī)藥指南.2011，9（30）：232～233.

7Ruan YT， Pan LJ， Zhao D. Semen quality and its influencing factors in preconception males in Nanjing area.Zhonghua Nan Ke Xue， 2015，21（2）：144～148.