陰道加德納菌臨床分布特點(diǎn)分析

曹雪萍 張?zhí)燧x 羅蓓 陳慧芬 張軍 張賢華*

陰道加德納菌臨床分布特點(diǎn)分析

曹雪萍 張?zhí)燧x 羅蓓 陳慧芬 張軍 張賢華*

目的 分析生殖道分泌物陰道加德納菌（GV）檢出陽性率及其分布。方法 2013年6月至2015年7月采用免疫熒光法檢測生殖道分泌物GV5050例，對GV檢出陽性率及其分布進(jìn)行分析。結(jié)果 5050例生殖道分泌物中，檢出981例GV陽性，陽性檢出率19.43%。按科室分組，各組患者樣本的GV陽性率分別為：婦科23.39%、宮頸病門診28.61%、產(chǎn)前初診23.27%、男性科3.36%；其他科室由于樣本數(shù)少數(shù)據(jù)不具代表性。GV陽性患者的科室構(gòu)成比分別為：婦科74.01%，宮頸病門診10.91%，產(chǎn)前初診7.54%，男性科6.32%，生殖醫(yī)學(xué)中心0.61%，早孕門診0.31%，簡易門診0.20%，習(xí)慣性流產(chǎn)門診0.10%；以婦科最高。GV陽性患者的性別構(gòu)成比分別為：女性93.68%，男性6.32%。結(jié)論 細(xì)菌性陰道病（BV）是婦產(chǎn)科常見疾病，GV是BV的重要病原菌，應(yīng)重視GV的送檢。

陰道加德納菌 細(xì)菌性陰道病 免疫熒光技術(shù)

細(xì)菌性陰道病（BV）是由一些兼性厭氧菌與厭氧菌混合感染，導(dǎo)致陰道內(nèi)微生態(tài)平衡失調(diào)引起的綜合征。臨床表現(xiàn)為陰道分泌物增多，白帶有魚腥臭味及外陰瘙癢灼熱等。BV是婦產(chǎn)科常見疾病，可引發(fā)子宮內(nèi)膜炎，盆腔炎，輸卵管炎癥及產(chǎn)科術(shù)后感染等，還可導(dǎo)致孕婦早產(chǎn)等不良妊娠結(jié)果。加德納菌屬﹑普雷沃菌屬﹑擬桿菌屬﹑動桿菌屬﹑革蘭陽性球菌等，均可引起B(yǎng)V，其中陰道加德納菌（GV）是BV的重要病原菌［1］。此外，GV還可引起男性泌尿系統(tǒng)感染和不育癥［2］。作者采用免疫熒光法對5050例患者樣本進(jìn)行GV檢測，對檢測結(jié)果進(jìn)行分析。

1　臨床資料

1.1一般資料 2013年6月至2015年7月本院生殖道分泌物樣本5050例，男1847例，女3203例。女性患者用無菌棉拭子于陰道距宮頸口1～2cm處，采集陰道后穹窿分泌物；男性患者用無菌纖維拭子插入前尿道2～3cm，旋轉(zhuǎn)1周后停留10s，采集分泌物。

1.2儀器與試劑 熒光顯微鏡（尼康儀器有限公司），溫浴箱（上海博訊實(shí)業(yè)有限公司），陰道加德納菌檢測試劑盒（免疫熒光法；深圳市邁科龍生物技術(shù)有限公司）。

1.3方法 將樣本輕緩?fù)坎荚跐崈糨d玻片上，晾干后用甲醇固定10min。自然晾干后吸取5μl陰道加德納菌檢測試劑盒中的免疫熒光試劑，均勻滴加在玻片涂樣處，置37℃溫浴箱內(nèi)孵育30min后用蒸餾水或去離子水緩慢沖洗玻片2～4次，5～10s/次。自然晾干后在熒光顯微鏡下鏡檢。發(fā)現(xiàn)≥10個綠色典型細(xì)桿狀陰道加德納菌為陽性；發(fā)現(xiàn)完整暗紅色復(fù)染上皮細(xì)胞，且未發(fā)現(xiàn)可定義為陽性的典型特征性染色時為陰性。記錄每一例樣本來源科室及檢測結(jié)果并分類統(tǒng)計。

作者單位：200040 同濟(jì)大學(xué)附屬第一婦嬰保健院檢驗(yàn)科

2　結(jié)果

2.15050例生殖道分泌物熒光免疫法檢測GV結(jié)果 見表1。

表1　5050例生殖道分泌物熒光免疫法檢測GV結(jié)果（n）

2.2981例GV陽性樣本的性別構(gòu)成 見表2。

表2　981例GV陽性樣本的性別構(gòu)成（n）

2.3BV組與非BV組陽性率比較 見表3。

表3　BV組與非BV組陽性率比較（n）

3　討論

目前，檢測GV的方法有分離培養(yǎng)法﹑唾液酸甘酶活性測定法﹑實(shí)時熒光定量PCR法和免疫熒光法等。其中免疫熒光法采用熒光素標(biāo)記GV單克隆抗體與樣本抗原特異性結(jié)合的原理檢測GV，具有檢測時間短﹑特異性強(qiáng)﹑敏感性高等優(yōu)點(diǎn)，正逐步應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)診斷。

細(xì)菌性陰道病（BV）是女性常見的疾病，GV是BV的重要病原菌，常引起非孕期婦女尿道炎﹑盆腔炎﹑輸卵管炎和子宮內(nèi)膜炎等；GV還可導(dǎo)致妊娠期婦女宮內(nèi)感染，胎膜早破等不良妊娠后果［3］。近幾年我國不同地區(qū)醫(yī)院婦科門診患者BV患者的GV培養(yǎng)陽性率為40.0%～59.55%，非BV組婦女的GV培養(yǎng)陽性率為1.9%～16.07%［4～6］。本資料顯示本院門診女性患者BV組的GV陽性率為29.3%，明顯低于報道，因BV不僅可由GV感染引起，也可有其他病原菌引起，需綜合分析病情。此外，目前無大量關(guān)于免疫熒光法檢測婦科患者GV陽性率的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)可供參考，報道中采用的細(xì)菌培養(yǎng)法與本資料采用的免疫熒光法的特異性與敏感性的不同也可影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。本院非BV組婦女的GV陽性率為24.1%，高于報道，產(chǎn)前初診GV陽性率23.27%，高于文獻(xiàn)報道15.51%［3］，可能因部分GV攜帶者無臨床表現(xiàn)。檢測方法的不同，也可能是影響陽性率的因素之一，但在普查時檢出GV的現(xiàn)象應(yīng)該引起重視，建議將GV檢測作為婦科普查項(xiàng)目之一。習(xí)慣性流產(chǎn)門診送檢3例有1例陽性，早孕門診送檢3例全部為陽性；由于例數(shù)過少，盡管以此計算陽性百分率不具有代表性，但提示對這一現(xiàn)象應(yīng)該引起關(guān)注。在后續(xù)的研究中可對此類病例進(jìn)行隨訪，分析GV陽性對孕期婦女妊娠結(jié)果的影響。Sleha R等［2］研究顯示GV與男性不育癥有密切聯(lián)系。本文男性科GV檢出率3.36%，明顯高于相關(guān)報道2.4%［7］，提示GV檢測對于男性的應(yīng)用價值不容忽視。早期檢測GV，對BV的早期診斷及治療﹑減少不良妊娠和優(yōu)生優(yōu)育有其重大意義。

1C A Muzny，J R Schwebke. Gardnerella vaginalis ： Still a Prime Suspect in the Pathogenesis of Bacterial Vaginosis. Current Infectious Disease Reports， 2013 ，15（2）：130～135.

2Sleha R， Bo?tíková V， Salavec M. Bacterial infection as a cause of infertility in humans.Epidemiol Mikrobiol Imunol， 2013，62（1）：26～32. 3 郭颯，涂少華，李懷芳，等.孕婦攜帶加德納菌對妊娠結(jié)局的影響.上海醫(yī)學(xué)，2003，26：85～86.

4戴繪芬，徐振東，花鴻燕.多項(xiàng)目聯(lián)合檢測在陰道加德納菌感染的應(yīng)用研究.當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2015，（06）：27～28.

5高劍云，陳建忠，周堅紅.采用套式PCR檢測細(xì)菌性陰道病病原體陰道加德納菌及細(xì)菌耐藥性測定.中國衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2010，20（5）：1124～1126.

6黃妙嬋，鐘開位，溫燕云.2008-2010年某地區(qū)細(xì)菌性陰道病的病原菌及其耐藥性研究.中國醫(yī)藥指南.2011，9（30）：232～233.

7Ruan YT， Pan LJ， Zhao D. Semen quality and its influencing factors in preconception males in Nanjing area.Zhonghua Nan Ke Xue， 2015，21（2）：144～148.