GLUT4和脂聯(lián)素在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用

郭威，李松，郭健麗，宋亞邛，孫陽(yáng)陽(yáng)，張宏佳黑龍江省齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院消化科，黑龍江齊齊哈爾　161021

GLUT4和脂聯(lián)素在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用

郭威，李松，郭健麗，宋亞邛，孫陽(yáng)陽(yáng)，張宏佳
黑龍江省齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院消化科，黑龍江齊齊哈爾161021

目的 探討GLUT4和脂聯(lián)素在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用。方法2015年6月—2015年11月選用48只SD大鼠一半雌鼠一半雄鼠，雌鼠雄鼠隨機(jī)分為對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組均為24只。對(duì)照組為正常，實(shí)驗(yàn)組為高脂飲食組。每組又分為3、6、9、12周4組按時(shí)間點(diǎn)處死各組大鼠，測(cè)定肝組織中GLUT4、血清中的脂聯(lián)素、空腹血糖。結(jié)果 肝組織中GLUT4、血清中的脂聯(lián)素在脂肪性肝病的形成過(guò)程中含量不斷減少，肝組織中GLUT4的濃度由對(duì)照組（3.65±0.08），3、6、9、12周逐漸降低分別為（3.32±0.07）、（3.13±0.11）、（2.96±0.08）、（2.31±0.19）血清中的脂聯(lián)素由對(duì)照組（4.22±0.43），3、6、9、12周逐漸降低分別為（4.18±0.26）、（3.90±0.27）、（3.96±0.21）、（4.07±0.24）。而且與肝脂肪變程度呈負(fù)相關(guān)，血糖呈正相關(guān)。結(jié)論 實(shí)驗(yàn)組肝組織中GLUT4、血清中的脂聯(lián)素相比對(duì)照組明顯減少，表明CLUT4與脂聯(lián)素在非酒精性脂肪性肝病中有一定作用。

GLUT4；脂聯(lián)素；大鼠；非酒精性脂肪性肝病

［Abstract］Objective To investigate the role of GLUT4 and adiponectin in nonalcoholic fatty liver disease.Methods 48 SD rats with half male half female，male female rats were randomly divided into control group and experimental group were 24.Normal control group，the experimental group was high-fat diet group.Each group was divided into 3 weeks，6 weeks，9 weeks，12 Thursday set point in time the rats were sacrificed to measure liver tissue GLUT4，serum adiponectin，fasting blood sugar.Results In liver tissue in GLUT4 and serum adiponectin in fatty liver formation content decreased constantly，concentration of GLUT4 in liver tissue from control group 3.65±0.08，3 weeks，6 weeks，9 weeks and 12 weeks decreased gradually were（3.32±0.07），（0.11±3.13），（2.96±0.08），（2.31±0.19）serum adiponectin comprised the control group（4.22±0.43），3 weeks，6 weeks，9 weeks and 12 weeks decreased gradually （4.18±0.26），（3.90±0.27），（3.96±0.21），（4.07±0.24），respectively.It was negatively correlated with the degree of hepatic steatosis，and the blood glucose was positively correlated.Conclusion The hepatic tissue GLUT4，serum adiponectin was significantly reduced compared to the control group，suggesting that adiponectin CLUT4 and have a role in nonalcoholic fatty liver disease.

［Key words］GLUT4；Adiponectin；Non-alcoholic fatty liver disease；Rats

隨著非酒精性脂肪性肝病的發(fā)病率也越來(lái)越高，這種疾病對(duì)肝臟的損害是慢性的最終導(dǎo)致不可逆性的損害，有研究表明非酒精性脂肪性肝病的發(fā)病與GLUT4和脂聯(lián)素有關(guān)［1-2］。因此在2015年6月—2015 年11月以48只SD大鼠為研究對(duì)象制造模型探究GLUT4和脂聯(lián)素與非酒精性脂肪性肝病的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象

選取6周齡，體重200 g左右健康的SD大鼠48只，來(lái)源于同一個(gè)廠家，大鼠平均體重在（160±18）g，雌雄各半并將其隨機(jī)分為對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組，兩組基本情況下P＞0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中對(duì)照組24只為正常，實(shí)驗(yàn)組24只為高脂飲食到實(shí)驗(yàn)結(jié)束后有嚴(yán)重的非酒精性脂肪肝。對(duì)照組喂養(yǎng)正常飼料即可。實(shí)驗(yàn)組除食物不同外其它都相同。動(dòng)物的飼養(yǎng)條件、護(hù)理狀況、飼料情況等都符合國(guó)際上擬定的動(dòng)物公約。

1.2研究方法

將對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組的24只大鼠隨機(jī)分為四組，分別為3、6、9、12周。在對(duì)應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)將對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的大鼠處死。處死前禁食10 h，處死后觀察大鼠肝臟病變情況，并檢測(cè)肝臟中GLUT4的含量、血清脂聯(lián)素、空腹血糖［3-4］。

大鼠處死后，一人立即取出大鼠肝臟，觀察脂肪變程度，并進(jìn)行稱量計(jì)算肝指數(shù)。在低溫下將大鼠肝臟搗碎離心后測(cè)CLUT4的含量。另一人取大鼠空腹靜脈血5 mL放入離心機(jī)2000 r/min離心10 min后去取清液。用免疫學(xué)方法ELISA測(cè)血清中的脂聯(lián)素含量。

1.3統(tǒng)計(jì)方法

2　結(jié)果

在實(shí)驗(yàn)結(jié)束前兩組大鼠均未出現(xiàn)死亡。對(duì)照組的肝臟質(zhì)地柔軟、包膜光滑無(wú)油膩感，為暗紅色。實(shí)驗(yàn)組大鼠肝臟與第六周出現(xiàn)明顯病變，肝臟表面有黃色改變而且有油膩感。到第12周時(shí)肝臟呈檳榔肝，有顆粒外觀見(jiàn)表1、2。

表1　各周監(jiān)測(cè)的肝臟脂肪變面積（±s）

表1　各周監(jiān)測(cè)的肝臟脂肪變面積（±s）

分組　對(duì)照組　高脂3周　高脂6周　高脂9周 高脂12周脂變面積015.21±2.9835.62±2.7745.69±3.35 65.12±8.13

對(duì)照組沒(méi)有脂變面積，而實(shí)驗(yàn)組高脂飲食后出現(xiàn)不同面積的脂變，且P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表2　測(cè)量值變化情況（±s）

表2　測(cè)量值變化情況（±s）

CLUT4　　空腹血糖　　脂聯(lián)素對(duì)照組高脂3周高脂6周高脂9周高脂12周3.65±0.08 3.32±0.07 3.13±0.11 2.96±0.08 2.31±0.19 4.96±0.21 5.59±0.25 5.61±0.23 5.63±0.15 5.65±0.21 4.22±0.43 4.18±0.26 4.07±0.24 3.96±0.21 3.90±0.27

隨著肝脂肪變面積的增加血糖值在增高，CLUT4和脂聯(lián)素含量在減少。各組P＜0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3　討論

CLUT4是肝臟的主要糖轉(zhuǎn)運(yùn)子，將血液中的糖轉(zhuǎn)運(yùn)到肝細(xì)胞里，加速肝糖原合成［3-5］。血液中葡萄糖含量增加刺激胰島素的分泌，最后造成胰島素抵抗。脂聯(lián)素是一種新型分子，它具有抗炎、抗粥樣硬化、增強(qiáng)胰島素敏感性的作用，主要是通過(guò)對(duì)胰島素受體的作用改進(jìn)全身胰島素抵抗，加強(qiáng)對(duì)糖的利用和極低密度脂蛋白的合成在脂肪變的形成過(guò)程中脂聯(lián)素逐漸減少這些作用逐漸降低，加速肝臟脂肪變的形成［7-9］。

此實(shí)驗(yàn)用非酒精性脂肪肝的形成過(guò)程中測(cè)量大鼠的CLUT4和脂聯(lián)素來(lái)確定這兩種物質(zhì)與肝脂肪變形成的關(guān)系。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知隨著脂肪變程度的增加CLUT4和脂聯(lián)素含量在逐步減少，表明這2種物質(zhì)在肝脂肪變形成過(guò)程中有一定作用。鮑秀琦，朱捷，張曉波的類(lèi)似實(shí)驗(yàn)也有相似的結(jié)果，肝組織中GLUT4的濃度由對(duì)照組的3.64±0.09逐漸降為12周的2.42± 0.23［10］。其它研究GLUT4和脂聯(lián)素在大鼠非酒精性脂肪性肝病中的作用的實(shí)驗(yàn)也都采取飼養(yǎng)SD大鼠的方法，利用高脂飲食來(lái)制造脂肪肝，同時(shí)觀察大鼠CLUT4的濃度，實(shí)驗(yàn)具有相似處。而且我們實(shí)驗(yàn)中采用對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組同時(shí)處死進(jìn)行對(duì)照，減少了一些因素造成實(shí)驗(yàn)誤差，加強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性與真實(shí)性。

此實(shí)驗(yàn)是在非酒精性脂肪肝形成過(guò)程中由病情的不斷發(fā)展來(lái)檢測(cè)肝臟中CLUT4和血清中脂聯(lián)素的濃度變化，可以具體的呈現(xiàn)這兩種物質(zhì)在非酒精性脂肪性肝病發(fā)展過(guò)程的逐步變化，讓數(shù)據(jù)跟加具有說(shuō)服性。綜上所述，非酒精性脂肪性肝病形成過(guò)程中與CLUT4、脂聯(lián)素有關(guān)。

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The Role of GLUT4 and Adiponectin in Nonalcoholic Fatty Liver Disease

GUO Wei LI Song，GUO Jian-li，SONG Ya-qiong，SUN Yang-yang，ZHANG Hong-jia
Department of digestive diseases，Affiliated Hospital of Qiqihar Medical，Qiqihar，Heilongjiang Province，161021 China

R575.5

A

2096-1782（2016）05-0009-02

郭威（1972.9-），女，黑龍江齊齊哈爾人，碩士，主任醫(yī)師，研究方向：肝臟代謝障礙及相關(guān)研究。

2016-02-24）