拳參薄層色譜的鑒別研究

葉錦雄 李睿鈞 黃偉佳 梁志鋒

廣州市東升醫(yī)院，廣東 廣州 510140

拳參薄層色譜的鑒別研究

葉錦雄 李睿鈞 黃偉佳 梁志鋒

廣州市東升醫(yī)院，廣東 廣州 510140

目的：改進(jìn)拳參的薄層色譜鑒別方法。方法：以拳參對(duì)照藥材為對(duì)照，通過(guò)改變提取方法和展開(kāi)劑系統(tǒng)，改進(jìn)其薄層鑒別方法。結(jié)果：在薄層色譜中檢出拳參的特征斑點(diǎn)，所建方法操作更加簡(jiǎn)單。結(jié)論：該方法專(zhuān)屬性強(qiáng)，可用于拳參的質(zhì)量控制。

拳參；薄層色譜法；鑒別

拳參為蓼科植物拳參 Polygonum bistorta L.的干燥根莖［1］，多生長(zhǎng)在山坡草從陰濕處，產(chǎn)于華北、西北、河南、湖北、山東、江蘇、浙江等地［2］，又名山蝦子、倒根草、紫參、蝦參、回頭參、山柳柳等，具有清熱解毒、消腫、止血的作用，用于赤痢、熱瀉、肺熱咳嗽、癰腫、瘰疬、口舌生瘡、吐血、衄血、痔瘡出血、毒蛇咬傷。拳參含有黃酮、蒽醌、鞣質(zhì)等化合物，具有一定的止血、抗菌和保護(hù)心腦血管的作用［3-5］。拳參中的沒(méi)食子酸、兒茶素、表兒茶素等具有強(qiáng)抗氧化、抑制腫瘤生長(zhǎng)和抗菌消毒等活性［6］；拳參水提取物能顯著增強(qiáng)小鼠單核巨噬細(xì)胞吞噬能力，增強(qiáng)NK細(xì)胞的細(xì)胞毒作用，促進(jìn)T淋巴細(xì)胞增殖，增加血清溶血素及血清 IL-2水平，具有增強(qiáng)正常小鼠的免疫功能作用［7］。藥典［1］十六味冬青丸、八味檀香散、感冒退熱顆粒等處方中均含拳參，但均未收錄其薄層鑒別方法。為更好方便地對(duì)該藥進(jìn)行薄層色譜鑒別，對(duì)拳參的薄層色譜鑒別方法進(jìn)行研究，現(xiàn)報(bào)告如下：

1 儀器與材料

KQ-1060型超聲清洗儀；自制硅膠 G薄層板；Merck硅膠G薄層板；Apple 4s（薄層色譜拍照）；拳參藥材 （產(chǎn)地：云南，批號(hào)：150101、150102、150201）；拳參對(duì)照藥材 （批號(hào)：121569 -201301，中國(guó)藥品生物制品檢定所）；甲酸、甲苯、乙酸乙酯、甲醇等均為分析純；水為滅菌注射用水。

2 方法

2.1 拳參的薄層鑒別

2.1.1 供試品溶液的制備 取本品0.5g，加水30mL，煎煮30min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?5mL，超聲處理15min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?mL溶解作為供試品溶液。

2.1.2 對(duì)照品溶液的制備 取拳參對(duì)照藥材0.5g，加水30mL，煎煮30min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?5mL，超聲處理15min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?mL溶解作為對(duì)照藥材溶液。

2.1.3 陰性對(duì)照液的制備 取甲醇10mL，超聲處理15min，濾過(guò)，濾液作為陰性對(duì)照溶液。

2.1.4 定性鑒別 照薄層色譜法 （《中國(guó)藥典》2015年版一部通則）方法試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各 5μL、分別點(diǎn)于同一硅膠 G薄層板上，以甲苯 -乙酸乙酯 -甲酸（5∶4∶1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，待干后，噴以5%三氯化鐵溶液，在日光下觀察。供試品與對(duì)照藥材色譜在相應(yīng)的位置上顯相同顏色斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無(wú)相同顏色斑點(diǎn)。見(jiàn)圖 1。

圖1 拳參的薄層色譜圖

2.2 拳參薄層色譜鑒別耐用性考察

2.2.1 不同薄層板的考察 取 Merck硅膠 G薄層板和自制硅膠 G薄層板，分別按上述薄層色譜鑒別方法進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果顯示，自制硅膠 G薄層板及Merck硅膠 G薄層板所得的色譜圖斑點(diǎn)清晰，陰性無(wú)干擾，均可達(dá)到鑒別要求。見(jiàn)圖 2。

2.2.2 不同溫度的考察 取已點(diǎn)樣的Merck硅膠 G薄層板，分別置于溫度為 5℃和 25℃的條件下按上述薄層色譜鑒別方法進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果顯示，該方法在不同溫度下適應(yīng)性較好。見(jiàn)圖 3。

圖2 不同薄層板展開(kāi)比較

圖3 不同溫度展開(kāi)比較

2.2.3 不同濕度的考察 取已點(diǎn)樣的 Merck硅膠G薄層板，分別置于濕度為 88%和 32%條件下按上述薄層色譜鑒別方法進(jìn)行試驗(yàn)。結(jié)果顯示，該方法在不同濕度下適應(yīng)性較好。見(jiàn)圖4。

3 討論

研究分別用Merck硅膠G薄層板和自制硅膠 G對(duì)拳參進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，在 T=25℃和T=5℃、RH= 32%和RH=88%條件下展開(kāi)，斑點(diǎn)清晰，色譜效果基本一致，均能達(dá)到鑒別要求，表明以上方法適用性良好，可用于拳參的鑒別。

拳參的薄層色譜鑒別按藥典的方法展開(kāi)條件為［1］：以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以二氯甲烷 -乙酸乙酯 -甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)后，置氨蒸氣中熏至斑點(diǎn)顯色清晰。但氨氣是有強(qiáng)烈刺激性臭味的無(wú)色氣體，與酸反應(yīng)產(chǎn)生熱，有燃燒爆炸危險(xiǎn)，有腐蝕作用，屬于危險(xiǎn)化學(xué)品［8］。改進(jìn)其方法后，Rf值適中，展開(kāi)完成后就有可用于鑒別的斑點(diǎn)，但顏色較淺，不利于觀察；噴顯色劑后，放置1周依然顯色清晰，且陰性對(duì)照無(wú)干擾，故未對(duì)其他顯色劑進(jìn)行比較性研究。且實(shí)驗(yàn)所用試劑安全性均較高，斑點(diǎn)顏色清晰，專(zhuān)屬性較強(qiáng)，容易觀察，顯色穩(wěn)定可靠。

圖2 不同薄層板展開(kāi)比較

研究沒(méi)對(duì)其他產(chǎn)地的拳參進(jìn)行試驗(yàn)，但避免使用危害性較大的試劑，對(duì)斑點(diǎn)判斷有明顯改善，且處理方法較簡(jiǎn)單、快捷，專(zhuān)屬性強(qiáng)，可用于拳參的鑒別，具有一定的實(shí)用價(jià)值。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典 （一部）［S］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015.

［2］江蘇新醫(yī)學(xué)院.中藥大辭典 ［M］.上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1977：1959.

［3］張齊雄，曹蓓.中藥拳參生物活性研究進(jìn)展 ［J］.亞太傳統(tǒng)醫(yī)藥，2012，8（7）：195-196.

［4］黃志華，李良東，韓立民.拳參的心腦血管保護(hù)作用研究進(jìn)展 ［J］.贛南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2013，33（4）：625-627.

［5］曾靖，單熱愛(ài)，鐘聲，等.拳參水提取物鎮(zhèn)痛作用的實(shí)驗(yàn)觀察 ［J］.中國(guó)臨床康復(fù)，2005，9（6）：80-81.

［6］夏晶，夏斌峰，季申.反相高效液相色譜法測(cè)定拳參中兒茶素的含量［J］.中國(guó)中藥雜志，2007，32（11）：1103-1104.

［7］李珂珂，欒希英，劉現(xiàn)兵.拳參水提物對(duì)小鼠免疫功能的影響 ［J］.中藥材，2010，33（8）：1302-1306.

［8］劉鋼，王昌榮.淺談液氨泄漏的應(yīng)急處置 ［J］.石油化工安全環(huán)保技術(shù)，2015，31（2）：50-56.

Study on Identification of Bistort Rhizome by TLC

YE Jinxiong LI Ruijun HUANG Weijia LIANG Zhifeng Guangzhou Dongsheng Hospital，Guangzhou 510140，China

Abstract：Objective To improve the TLC identification method of bistort rhizome.Method Through the improvement of extraction method and expansion system，the feasibility of experimental was evaluated by TLC based on bistort rhizome control.Result Bistort rhizome in TLC had characteristic spots and the method was simpler.Conclusion The result showed the TLC method was highly specific.It was capable to control the quality of bistort rhizome.
Key words：bistort rhizome；TLC；identification

R282.5

A

1007-8517（2016）13-0018-03

2016.0.00

）

葉錦雄，男，主管中藥師，主要從事藥物分析和臨床藥學(xué)。E-mail：yaehi@126.com