山東省不同地區(qū)韭蛆種群對(duì)殺蟲(chóng)劑的抗藥性

齊素敏,　吳有芳,　李如美,　張思聰,莊乾營(yíng),　周仙紅,　于　毅*,　劉永杰*

(1. 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院, 泰安　271000; 2. 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所,山東省植物病毒學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 濟(jì)南　250100)

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山東省不同地區(qū)韭蛆種群對(duì)殺蟲(chóng)劑的抗藥性

齊素敏1,2,吳有芳1,李如美2,張思聰2,莊乾營(yíng)2,周仙紅2,于毅2*,劉永杰1*

(1. 山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院, 泰安271000; 2. 山東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所,山東省植物病毒學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 濟(jì)南250100)

用胃毒觸殺聯(lián)合毒力法監(jiān)測(cè)了山東省7個(gè)韭菜種植區(qū)的韭蛆種群對(duì)毒死蜱、辛硫磷、高效氯氰菊酯、高效氯氟氰菊酯、吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪6種常用殺蟲(chóng)劑的抗性水平。結(jié)果表明:山東省各地區(qū)韭蛆種群對(duì)毒死蜱和辛硫磷的抗性已較為普遍,其中莘縣種群對(duì)毒死蜱的抗性超過(guò)30倍;對(duì)高效氯氰菊酯的抗性為中等水平;泰安種群對(duì)供試的兩種菊酯類(lèi)藥劑均產(chǎn)生了低水平抗性;而對(duì)吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪,7個(gè)供試種群處于敏感或敏感性下降狀態(tài)。

山東省;韭蛆;田間種群;抗藥性

韭菜遲眼蕈蚊(BradysiaodoriphagaYangetZhang)屬雙翅目,眼蕈蚊科,遲眼蕈蚊屬。幼蟲(chóng)稱韭蛆,是為害韭菜、蔥、蒜等經(jīng)濟(jì)作物的重要地下害蟲(chóng)之一[1-3]。該蟲(chóng)以幼蟲(chóng)群集寄主根部蛀食,常造成韭菜缺苗斷壟,使韭菜減產(chǎn)甚至絕產(chǎn)[4-5]。韭蛆體小、繁殖力強(qiáng)、世代重疊嚴(yán)重,防治困難,近年來(lái)發(fā)生有加重的趨勢(shì)[6-7]。化學(xué)防治因成本低、藥效快的優(yōu)點(diǎn),目前仍是防治韭蛆的主要方法。為有效防治該蟲(chóng),菜農(nóng)不斷增加農(nóng)藥使用量,不僅導(dǎo)致農(nóng)藥殘留,也易引起抗藥性等問(wèn)題,而且韭蛆為小作物害蟲(chóng),常用殺蟲(chóng)劑種類(lèi)較少,更增加了該蟲(chóng)產(chǎn)生抗性的風(fēng)險(xiǎn),因此評(píng)價(jià)韭蛆抗性水平,顯得尤為重要。

高占林等[8]于2000年在室內(nèi)測(cè)定了河北省不同地區(qū)韭蛆田間種群對(duì)不同殺蟲(chóng)劑的敏感性,發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)的韭蛆對(duì)藥劑的敏感程度不同。山東省是韭菜生產(chǎn)大省,有關(guān)山東省不同地區(qū)韭蛆種群抗藥性的研究目前未見(jiàn)報(bào)道。本研究通過(guò)對(duì)山東省不同地區(qū)種群韭蛆進(jìn)行抗藥性監(jiān)測(cè),了解和掌握全省韭蛆對(duì)常用殺蟲(chóng)劑的抗藥性水平,針對(duì)抗藥性水平,探討科學(xué)有效的防治策略,對(duì)保持韭蛆對(duì)殺蟲(chóng)劑的敏感性和延緩抗性的發(fā)展,實(shí)現(xiàn)韭蛆的可持續(xù)治理具有重要的理論和應(yīng)用價(jià)值。

1　材料與方法

1.1供試韭蛆

相對(duì)敏感種群:2012年采自山東省壽光市溫室大棚韭菜,于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)連續(xù)飼養(yǎng)超過(guò)30代,期間未接觸任何藥劑。

濟(jì)南種群:采自山東省濟(jì)南市唐王鎮(zhèn)韓東村溫室大棚兩年生韭菜;泰安種群:采自山東省泰安市邱家店鎮(zhèn)舊縣村小拱棚四年生韭菜;莘縣種群:采自山東省聊城市莘縣張寨鄉(xiāng)郭坊村小拱棚四年生韭菜;茌平種群:采自山東省聊城市茌平縣肖莊鎮(zhèn)皮里村小拱棚三年生韭菜;沂源種群:采自山東省淄博市沂源縣魯村鎮(zhèn)魯村四村小拱棚三年生韭菜;壽光種群:采自山東省壽光市文家街道北關(guān)橋村三年生韭菜;臨沭種群:采自山東省臨沂市臨沭縣曹莊鎮(zhèn)新華村小拱棚三年生韭菜。每個(gè)地區(qū)種群均為2015年5月采集,于室內(nèi)飼養(yǎng)一代,選取F1代供試。敏感種群和田間種群均選取個(gè)體大小較一致的健康3齡幼蟲(chóng)作為供試蟲(chóng)源。

1.2供試藥劑

97%毒死蜱(chlorpyrifos)原藥(山東埃森化學(xué)有限公司),90%辛硫磷(phoxim)原藥(湖北仙隆化工有限公司),27%高效氯氰菊酯(beta-cypermethrin)母藥(廣東立威化工有限公司),97%高效氯氟氰菊酯(lambda-cyhalothrin)原藥(濟(jì)南市賽德?tīng)柣び邢薰?,95%吡蟲(chóng)啉(imidacloprid)原藥(南京紅太陽(yáng)股份有限公司),98%噻蟲(chóng)嗪(thiamethoxam)原藥(江蘇綠葉農(nóng)化有限公司)。

表1　供試韭蛆種群用藥史1)

1)*表示種群采自老韭菜種植區(qū),取樣地塊種植韭菜多年。

*indicates thatB.odoriphagacollected from the area that people have planted Chinese chives for years.

1.3試驗(yàn)方法

參考慕衛(wèi)等[9]的胃毒觸殺聯(lián)合毒力測(cè)定方法。將原藥或母藥用丙酮配制成母液,再用0.1% Tween-80水溶液按照0.5倍等比稀釋為5～7個(gè)濃度。將干凈濾紙平鋪在直徑9 cm培養(yǎng)皿內(nèi),在濾紙上定量滴加1.2 mL藥液。將韭菜莖基的白色部分剪成約1 cm小段,于不同濃度藥液中浸泡30 s后取出,在吸水紙上吸去多余藥液后置于鋪有相同藥液處理濾紙的培養(yǎng)皿內(nèi),每皿2段。然后用毛筆輕輕挑起大小一致3齡韭蛆幼蟲(chóng)置于培養(yǎng)皿內(nèi)。每皿接入試蟲(chóng)20頭,每處理重復(fù)3次,同時(shí)設(shè)空白對(duì)照。處理后將培養(yǎng)皿置于溫度(25±1)℃、光照L∥D=16 h∥8 h、相對(duì)濕度50%～70%的人工氣候箱內(nèi)飼養(yǎng)。每天用滴管在濾紙周?chē)渭舆m量水保濕。于藥后48 h檢查試蟲(chóng)存活情況。

1.4數(shù)據(jù)分析

采用SPSS 19.0軟件處理數(shù)據(jù),求得毒力回歸方程、標(biāo)準(zhǔn)誤、LC50及相關(guān)系數(shù)。將供試藥劑對(duì)供試種群的LC50與敏感種群的LC50相比,得到抗性倍數(shù)(resistance ratio)。抗性水平劃分標(biāo)準(zhǔn)參考沈晉良等[10]的方法:敏感(抗性倍數(shù)≤3);敏感性降低或耐藥性提高(抗性倍數(shù)為3.1～5);低水平抗性(抗性倍數(shù)為5.1～10);中等水平抗性(抗性倍數(shù)為10.1～40);高水平抗性(抗性倍數(shù)為40.1～160);極高水平抗性(抗性倍數(shù)≥160.1)。

2　結(jié)果與分析

毒力測(cè)定結(jié)果表明,山東省7個(gè)韭蛆種群對(duì)毒死蜱均已產(chǎn)生抗藥性,其中濟(jì)南種群敏感性略有下降,抗性為3.47倍;泰安、莘縣、茌平、沂源和壽光種群敏感性較低,產(chǎn)生了中等水平抗性,抗性為15.97～30.47倍;臨沭種群抗性是敏感種群的7.32倍,抗性屬于低等水平。對(duì)辛硫磷,濟(jì)南種群處于敏感狀態(tài),泰安、莘縣、沂源和壽光種群為中等水平抗性,抗性倍數(shù)分別為25.69、24.05、15.90和17.80倍;茌平和臨沭種群對(duì)辛硫磷表現(xiàn)出低水平抗性,抗性分別為6.43倍和5.70倍。對(duì)高效氯氰菊酯,濟(jì)南和臨沭種群處于敏感水平;莘縣種群的敏感性最低,抗性為11.45倍,達(dá)到中等水平抗性;泰安種群抗性為6.40倍,屬低水平抗性;茌平、沂源、壽光種群的抗藥性增強(qiáng),抗性分別為3.95、4.88和5.76倍。對(duì)高效氯氟氰菊酯,泰安種群產(chǎn)生了低水平抗性,抗性為8.06倍;莘縣、茌平、沂源、壽光和臨沭種群對(duì)高效氯氟氰菊酯敏感性下降,抗性為3.29～4.70倍;而濟(jì)南種群處于敏感水平。泰安、莘縣、茌平、沂源和壽光種群對(duì)吡蟲(chóng)啉耐藥性提高,抗性為3.31～4.29倍,濟(jì)南和臨沭種群對(duì)吡蟲(chóng)啉保持敏感。對(duì)噻蟲(chóng)嗪,泰安、莘縣、茌平和沂源種群抗性分別為4.53、3.22、3.16和3.68倍,為敏感性下降狀態(tài),濟(jì)南、壽光和臨沭種群處于敏感狀態(tài)。

表2　山東不同地區(qū)韭蛆種群對(duì)6種殺蟲(chóng)劑的抗性水平1)

續(xù)表2Table 2 (Continued)

藥劑Insecticide種群Population斜率Slope(Mean±SE)LC50(95%CL)/mg·L-1相關(guān)系數(shù)(r)Correlationcoefficient抗性倍數(shù)Resistanceratio吡蟲(chóng)啉ImidaclopridYY1.131±0.4486.516(2.624～32.366)0.9853.86SG1.713±0.4956.236(3.554～12.716)0.9623.69LS1.131±0.4483.258(1.312～16.183)0.9851.93S1.418±0.4741.686(0.573～3.238) 0.9671.00噻蟲(chóng)嗪ThiamethoxamJN1.448±0.4704.547(2.009～9.347) 0.9961.10TA1.304±0.47018.617(9.510～97.565) 0.9844.53SX1.390±0.46713.231(7.542～28.439) 0.9933.22CP1.216±0.45512.991(5.721～49.121) 0.9703.16YY1.292±0.46215.111(7.428～58.421) 0.9913.68SG1.535±0.4778.290(3.746～15.806)0.9882.01LS1.288±0.4617.313(3.553～27.207)0.9901.78S1.833±0.5044.106(2.187～7.022) 0.9911.00

1) S:敏感種群;JN: 濟(jì)南種群; TA: 泰安種群; SX: 莘縣種群;CP: 茌平種群; YY: 沂源種群; SG: 壽光種群; LS: 臨沭種群;抗性倍數(shù)=田間種群LC50/敏感品系LC50。S: Susceptible population; JN: Ji’nan population; TA: Tai’an population; SX: Shenxian population;CP: Chiping population; YY: Yiyuan population; SG: Shouguang population; LS: Linshu population; Resistance ratio=LC50value of field population/LC50value of susceptible strain.

3　討論

監(jiān)測(cè)結(jié)果表明,山東省7個(gè)不同地區(qū)韭蛆種群對(duì)6種常用殺蟲(chóng)劑中的4種都產(chǎn)生了不同程度的抗藥性。其中對(duì)毒死蜱、辛硫磷為中抗和低抗水平；對(duì)高效氯氰菊酯(莘縣種群屬于中抗水平)和高效氯氟氰菊酯屬于低抗水平；對(duì)吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪處于敏感或敏感性下降狀態(tài)。韭蛆對(duì)常用殺蟲(chóng)劑抗性水平的差異性可能與不同韭菜產(chǎn)區(qū)韭蛆治理過(guò)程中用藥種類(lèi)、用藥量和用藥頻率[11]等因素有關(guān)。毒死蜱和辛硫磷屬于有機(jī)磷類(lèi)農(nóng)藥,用于防治地下害蟲(chóng)時(shí)，一般釆用灌根、拌土撒施[12]及噴霧等施藥方法。近年來(lái)這兩種殺蟲(chóng)劑在韭蛆防治中用量大、使用頻率較高,造成韭蛆對(duì)其抗性水平較高。農(nóng)業(yè)部已發(fā)布公告,決定自2016年12月31日起,禁止毒死蜱在蔬菜上使用[13]。高效氯氰菊酯和高效氯氟氰菊酯屬于擬除蟲(chóng)菊酯類(lèi)藥物,具有高效、廣譜、低毒等優(yōu)點(diǎn),也是一種被廣泛使用的殺蟲(chóng)劑,但由于其使用頻率少于前兩者,因此韭蛆對(duì)其抗藥性水平相對(duì)較低。吡蟲(chóng)啉和噻蟲(chóng)嗪屬于新煙堿類(lèi)藥物,具有殺蟲(chóng)活性高、內(nèi)吸性好、對(duì)人畜安全、與環(huán)境相容性高等特性,常用來(lái)防治蚜蟲(chóng)、粉虱等刺吸式口器害蟲(chóng)[14-17]。而在山東的韭菜種植區(qū),菜農(nóng)們常使用此類(lèi)農(nóng)藥噴霧防治韭菜上的蚜蟲(chóng)、薊馬等害蟲(chóng),對(duì)韭蛆的選擇壓力要遠(yuǎn)小于前4種采用灌根施藥法的殺蟲(chóng)劑。

從抗性總體水平來(lái)看,莘縣種群抗性較高,而濟(jì)南種群對(duì)6種常用藥劑處于相對(duì)敏感狀態(tài)。不同韭菜產(chǎn)區(qū)韭蛆對(duì)常用殺蟲(chóng)劑抗性水平的差異與釆集試蟲(chóng)的地理位置及當(dāng)?shù)夭宿r(nóng)的用藥情況密切相關(guān)。莘縣是老韭菜種植區(qū),韭蛆危害一直比較嚴(yán)重,當(dāng)?shù)夭宿r(nóng)常過(guò)量使用農(nóng)藥,甚至不惜使用甲拌磷等高毒農(nóng)藥,使得該地韭蛆種群對(duì)幾種常用農(nóng)藥產(chǎn)生了相對(duì)高的抗性；而濟(jì)南種群采自新韭菜種植區(qū),少有韭蛆危害,除了少量使用毒死蜱和辛硫磷控制害蟲(chóng)外,基本不用藥,因此較為敏感。

不同地區(qū)韭蛆種群抗藥性的差異,除了與不同韭菜產(chǎn)區(qū)韭蛆治理過(guò)程中用藥種類(lèi)、用藥量、用藥頻率等因素有關(guān)外,齡期、飼養(yǎng)溫度、食料、測(cè)定方法對(duì)其敏感性也有一定影響[18]。韭蛆幼蟲(chóng)常聚集在鱗莖里或鉆蛀假莖中為害[19]。由于該蟲(chóng)鉆蛀為害,再加上其蟲(chóng)體小、體軟的特點(diǎn),若直接將韭蛆幼蟲(chóng)從為害部挑出,易使其受機(jī)械損傷而影響試驗(yàn)結(jié)果。建議將采回的含有韭蛆的韭菜根于人工氣候箱內(nèi)培養(yǎng),待成蟲(chóng)羽化后,用吸蟲(chóng)器將其吸出,于培養(yǎng)皿中配對(duì)產(chǎn)卵,選取室內(nèi) F1或F2代供試。

目前,山東省不同地區(qū)韭蛆種群已對(duì)4種常用殺蟲(chóng)劑產(chǎn)生了不同程度的抗性,其中部分地區(qū)種群對(duì)毒死蜱和辛硫磷及高效氯氰菊酯的抗性已達(dá)到中等水平。為了延長(zhǎng)殺蟲(chóng)劑的使用壽命,減緩韭蛆抗性發(fā)展速度,藥劑防治中應(yīng)限制使用有機(jī)磷和菊酯類(lèi)農(nóng)藥,在使用吡蟲(chóng)啉、噻蟲(chóng)嗪等新煙堿類(lèi)藥劑時(shí),考慮到其存在溫度效應(yīng)和濃度效應(yīng),為提高藥劑利用率,盡量選擇傍晚在地溫高的季節(jié)對(duì)韭菜地進(jìn)行施藥[20]。同時(shí),嚴(yán)格控制用藥劑量和安全間隔期,注意不同種類(lèi)殺蟲(chóng)劑的輪替使用,盡可能在較低的選擇壓下取得較好的防效。

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(責(zé)任編輯：楊明麗)

Detection of insecticide resistance of Bradysia odoriphaga in Shandong Province

Qi Sumin1,2,Wu Youfang1,Li Rumei2,Zhang Sicong2,Zhuang Qianying2,Zhou Xianhong2,Yu Yi2,Liu Yongjie1

(1.College of Plant Protection, Shandong Agricultural University, Tai’an271000, China;2. Institute of Plant Protection, Shandong Academy of Agricultural Sciences,Shandong Key Laboratory of Plant Virology, Ji’nan250100, China)

The levels of resistance to six commonly used insecticides, chlorpyrifos, phoxim,beta-cypermethrin,lambda-cyhalothrin, imidacloprid and thiamethoxam were determined in seven populations ofBradysiaodoriphagacollected from Shandong Province by stomach-contact combination toxicity method. The results showed that the resistance ofB.odoriphagapopulations to chlorpyrifos and phoxim was very common in Shandong Province. The resistance ratio of Shenxian population was more than 30-fold to chlorpyrifos, while moderate resistance tobeta-cypermethrin. Tai’an population had low level resistance tobeta-cypermethrin andlambda-cyhalothrin. However, all tested populations were relatively sensitive to imidacloprid and thiamethoxam.

Shandong Province;Bradysiaodoriphaga; field population; insecticide resistance

2015-07-27

2015-10-22

公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專(zhuān)項(xiàng)(201303027)

E-mail: robertyuyi@163.com;lyj@sdau.edu.cn

S 433, S 482.3

A

10.3969/j.issn.0529-1542.2016.04.030