自發(fā)性高血壓大鼠一般指標及竇房結(jié)形態(tài)結(jié)構(gòu)變化

林樂迎　符信清　王慶志　張紅旗

自發(fā)性高血壓大鼠一般指標及竇房結(jié)形態(tài)結(jié)構(gòu)變化

林樂迎1符信清1王慶志2張紅旗3

目的：探討自發(fā)性高血壓大鼠竇房結(jié)（SAN）形態(tài)結(jié)構(gòu)變化及厄貝沙坦對其影響。方法：自發(fā)性高血壓大鼠30只健康雄性大鼠，體重（200±20）g，實驗動物隨機分為3組：①SHR對照組WKY組10只；②SHR組10只；③厄貝沙坦治療組10只。WKY組和SHR組同等劑量的生理鹽水灌胃每天1次，持續(xù)喂養(yǎng)8周。智能無創(chuàng)血壓計測定大鼠尾動脈血壓，光鏡下觀察SAN病理形態(tài)學變化。結(jié)果：SHR的模型組隨著周齡增加血壓逐漸增高。對照組大鼠竇房結(jié)區(qū)域內(nèi)細胞小而密，核正常，竇房結(jié)細胞無變性、壞死。結(jié)論：SHR大鼠SAN8周后出現(xiàn)間質(zhì)膠原塑；厄貝沙坦能降低SHR大鼠的血壓，改善心功能，可不同程度下調(diào)SAN間質(zhì)膠原的沉積。

SHR血壓竇房結(jié)

自發(fā)性高血壓病（Spontaneous Hypertension，SH）是一種嚴重危害人類健康的常見病、多發(fā)病［1］。長久持續(xù)的高血壓能觸發(fā)左室形狀與心肌結(jié)構(gòu)的一系列變化，這變化早期是代償性的，但最終導致心衰［2］。竇房結(jié)是心臟正常節(jié)律性沖動的發(fā)源地，是心臟傳導系統(tǒng)的重要組成部分，由于竇房結(jié)位置、結(jié)構(gòu)、血供、功能的特殊性和復雜性。本研究通過一般指標及光鏡方法觀察自發(fā)性高血壓大鼠SAN結(jié)內(nèi)膠原纖維的表達變化，為進行下一步的研究奠定基礎。

1　材料和方法

1.1動物及藥物12周SHR雄性大鼠20只，12周Wistar—Kyoto（WKY）雄性大鼠10只，體重（200±20）g，（由上海瑞金醫(yī)院高血壓研究所提供）。自然光照，普通飲食，自由飲水。室溫（21± 5）℃，相對濕度55%±15%。厄貝沙坦（江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司）。

1.2實驗方法

1.2.1動物分組實驗動物隨機分為3組：①SHR對照組WKY組10只；②SHR組10只；③厄貝沙坦治療組10只（厄貝沙坦0.6ml/100g·d-1灌胃）。用苦味酸標記法隨機編號。在給藥前進行血壓檢測。WKY組和SHR組同等劑量的生理鹽水灌胃每天1次，持續(xù)喂養(yǎng)8周。

1.3檢測指標

1.3.1一般情況觀察大鼠一般狀況，如精神狀態(tài)、毛發(fā)、活動度、攝食攝水，每2周記錄一次體重。病理組織形態(tài)學檢查。

1.3.2血壓給藥后采用無創(chuàng)血壓儀測定大鼠收縮壓（SPB）、舒張壓（DBP）。每2周測定一次。基本操作：將加壓感應器置于其尾根處，脈搏波形穩(wěn)定時，啟動試驗，連續(xù)測3次，讀取SBP、DBP、MBP 及HR，取3次平均值記錄。

1.4統(tǒng)計學處理應用SPSS14軟件包進行統(tǒng)計學分析，兩組間比較采用t檢驗，兩組以上比較采用單因素方差分析作統(tǒng)計學處理。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學意義。

2　結(jié)果

2.1一般情況觀察WKY大鼠反應靈敏，毛色有光澤，飲食飲水均正常，體重逐漸增加，生長快。SHR組大鼠活動遲緩，毛色發(fā)暗，食欲不振，精神萎靡，增長緩慢，與模型組大鼠比較，治療組出現(xiàn)上述癥狀的時間有不同程度的延遲，癥狀明顯改善。

2.2血壓指標檢測與對照組比較，模型組大鼠收縮壓明顯升高（P＜0.01）；治療組與模型組比較可明顯降低大鼠收縮壓，與模型組比較有統(tǒng)計學差異（P＜0.05，P＜0.01）；與對照組比較，模型組大鼠舒張壓明顯升高（P＜0.01）；治療組與模型組比較可明顯降低大鼠舒張壓，與模型組比較有統(tǒng)計學差異（P＜0.05，P＜0.01）。

2.3SAN光鏡觀察對照組大鼠竇房結(jié)結(jié)細胞排列整齊、致密，橫紋結(jié)構(gòu)清晰，竇房結(jié)區(qū)域內(nèi)細胞小而密，核正常，呈卵圓形或不規(guī)則形，胞漿染色均勻，竇房結(jié)細胞無變性、壞死。SHR組竇房結(jié)結(jié)細胞排列紊亂，斷裂，胞核濃縮深染，橫紋結(jié)構(gòu)不清，分布不均，可見少量的炎癥細胞侵入。治療組竇房結(jié)結(jié)細胞排列趨于整齊，與SHR組比較明顯減輕。

表1　8周后各組大鼠血壓改變變化（±s，mmHg）

表1　8周后各組大鼠血壓改變變化（±s，mmHg）

注：P＜0.05 vs control，△P＜0.05 vs diabete

3　討論

臨床研究發(fā)現(xiàn)，高血壓病的患者多表現(xiàn)出頭暈、頭痛、頭脹，兼有耳鳴、面紅、心煩急躁和脈弦等癥狀，而與人類高血壓病發(fā)病機理相似的自發(fā)性高血壓大鼠同樣也具有上述等癥狀［3］，并且隨著近幾年對于自發(fā)性高血壓大鼠的研究越來越多，人們已經(jīng)認同自發(fā)性高血壓大鼠作為研究人類高血壓病的替代動物模型。

實驗動物狀態(tài)將影響其血壓及對藥物的反應性，所以動物實驗更趨向于選擇未麻醉、且清醒動物，以便更好地了解生物現(xiàn)象［4］。無創(chuàng)測壓法可測量清醒動物，能夠獲取其正常狀態(tài)血壓值，并且操作簡便，其中尾套法現(xiàn)已被廣泛應用于測量大鼠血壓［5］。高血壓的發(fā)展涉及血管重構(gòu)和心臟重構(gòu)，EH患者中約有1/3會出現(xiàn)心室重構(gòu)。其形態(tài)學改變包含以下兩個方面，一是心肌細胞肥厚、壞死及凋亡；二是成纖維細胞增生、細胞外間質(zhì)纖維化［6］。對于SAN而言，保持適度的彈性和硬度，合理的幾何構(gòu)型、排列、分布，對SAN的起搏和傳遞至關重要，本實驗結(jié)果表明SHR組竇房結(jié)結(jié)細胞排列紊亂，膠原纖維斷裂，胞核大小不規(guī)則，且濃縮深染，橫紋結(jié)構(gòu)不清，分布不均，可見少量的炎癥細胞侵入。

本實驗結(jié)果還表明降低血壓后，還能有效減輕間質(zhì)膠原重構(gòu)，因此，推測高血壓情況下的各種竇性竇房傳導等心律失常的部分原因可能與SAN結(jié)內(nèi)膠原可能與改善高血壓并發(fā)癥、改善結(jié)內(nèi)微循環(huán)有關。

1王文．高血壓我國高血壓流行趨勢與防治狀況（續(xù)前）［J］．中國循環(huán)雜志，2011，26（6）：407～409．

2Berk BC，F(xiàn)ujiwara K，Lehoux S.ECM remodeling in hypertensive heart disease.J Clin Invest 2007，117：568-575.

3周訓杰，李建華，符德玉，等．中醫(yī)“血瘀、陽亢、痰濁”高血壓動物模型構(gòu)建的研究［J］．遼寧中醫(yī)雜志，2013，40（1）：8～10．

4梁月琴，王蕾，張明升，等．清醒大鼠血壓不同測量方法的結(jié)果比較［J］．山西醫(yī)科大學學報，2005，36 （3）：282～284．

5董幸，潘燕，孟延，等．尾套法與頸動脈法測量大鼠血壓的相關性研究［J］．新實驗室研究與探索，2008，27（5）：53～55．

6晏陽天，馮耀光．心臟重構(gòu)的形態(tài)學研究［J］．中外婦兒健康，2010，18（12）：32～33．

/（編審：陳強）

The general index and the changes of rat sinoatrial node morphology in spontaneously hypertensive

1.Department of anatomy Gannan Medical University，Ganzhou 341000，Jiangxi
LIN Le-ying1，F(xiàn)U Xin-qing2，WANG Qing-zhi2，et al

Objective:To investigate the spontaneous hypertension rat sinoatrial node（SAN）effect of morphological changes and irbesartan on the.Methods:Spontaneously hypertensive rats 30 healthy male SD rats，weighing 200±20g，the experimental animals were divided for three groups:SHR and control WKY group（10 rats）；II SHR group（n=10）；3 irbesartan treatment group（n=10）.WKY group and SHR group of the same dose of normal saline was fed 1 times a day for 8 weeks.The blood pressure of the tail artery was measured by the intelligent non invasive blood pressure monitor，and the pathological changes of SAN were observed under light microscope.Results:The blood pressure of SHR model group increased gradually with the age of the week.in the control group the rat sinoatrial node area were small and dense，nuclear normal sinoatrial node cells without degeneration and necrosis. Conclusion:San in SHR rats after 8 weeks of interstitial collagen remodeling；irbesartan can reduce blood pressure in SHR rats，improve heart function，reduced to varying degrees of San interstitial collagen deposition.

SHR；Blood；Sinus

R544.1【文獻標識碼】A

1671－8054（2016）01-0104-02

1.贛南醫(yī)學院解剖學教研室江西341000 2.新鄉(xiāng)醫(yī)學院人體解剖學教研室河南453003 3.復旦大學上海醫(yī)學院上海200032

張紅旗，男，教授

2015-11-07收稿，2016-01-20修回