多發性骨髓瘤化療中網織紅細胞與網織血小板聯合檢測的臨床應用分析

沙琨　楊誼　王敬真

(1.鄭州人民醫院 檢驗科　河南 鄭州　450003； 2.鄭州人民醫院 輸血科　河南 鄭州　450003)

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多發性骨髓瘤化療中網織紅細胞與網織血小板聯合檢測的臨床應用分析

沙琨1楊誼1王敬真2

(1.鄭州人民醫院 檢驗科河南 鄭州450003； 2.鄭州人民醫院 輸血科河南 鄭州450003)

目的探討多發性骨髓瘤(MM)化療過程中聯合檢測網織紅細胞(RET)及網織血小板(RP)的臨床應用價值。方法選取鄭州人民醫院血液內科2012年5月至2014年12月收治的38例MM患者(MM組)，從體檢中心隨機選取20例健康體檢者作為健康組。檢測健康組和MM組(化療前和化療后第5、10、15、20天)WBC、PLT、RET相關參數。結果化療前，MM組WBC和PLT水平低于健康組，差異有統計學意義(P<0.05)；MM組IRF高于健康組(P<0.05)；兩組RET、IPF差異無統計學意義(P>0.05)。化療后，各檢測參數均開始下降，WBC、PLT、RET分別在化療后第20、15、15天回升。IRF和IPF分別在第10天開始回升。結論在MM化療過程中，IRF和IPF反應骨髓功能的變化情況比WBC和PLT更早，是監控骨髓造血功能的敏感指標。

多發性骨髓瘤；網織紅細胞；網織血小板

多發性骨髓瘤(multiple myeloma，MM)是B細胞起源的漿細胞克隆增生性惡性疾病，多發生于中老年人，化療是治療MM的基本和主要手段，化療過程產生的骨髓抑制是臨床最關注的問題之一[1]。反映骨髓造血功能的傳統指標有外周血白細胞(WBC)、血小板(PLT)等。隨著檢測技術的進步，網織紅細胞(reticulocyte，RET)、網織血小板(reticulated platelets，RP)在化療后預測骨髓造血功能恢復上也起著越來越重要的作用。本文動態觀察MM化療過程中WBC、PLT、RET及RP水平，探討其變化規律，為臨床診治提供參考依據。

1　資料與方法

1.1一般資料選取鄭州人民醫院血液內科2012年5月至2014年12月收治的38例MM患者(MM組)，男28例，女10例，初治病例25例，復發病例13例，年齡49～79歲，平均年齡(62.0±12.8)歲，均符合《血液病診斷及療效標準》[2]，采用傳統聯合化療方案，包括VAD方案(長春新堿、阿霉素、地塞米松)和MP方案(美法侖、潑尼松)。從體檢中心隨機選取20例健康體檢者作為健康組。

1.2標本采集采用EDTA-K2真空抗凝采血管分別采集MM患者化療前和化療后第5、10、15、20天早晨分別抽取靜脈血1.5～2 ml。健康組采集清晨空腹血。所有標本采集后迅速混勻，應用全自動血液分析儀(SYSMEX XE-2100)進行檢測，3 h內完成測定。所有檢測均采用原廠配套試劑和質控品。

1.3觀察指標記錄WBC、PLT、RET相關參數，RET參數包括網織紅細胞絕對數(RET#)、網織紅細胞比率(RET%)、高熒光強度網織紅細胞比率(HFR)、中熒光強度網織紅細胞比率(MFR)、低熒光強度網織紅細胞比率(LFR)、未成熟網織紅細胞指數(IRF =MFR+HFR)以及網織血小板比率(IPF)。

2　結果

2.1檢測結果化療前，MM組WBC和PLT水平低于健康組，差異有統計學意義(P<0.05)；MM組IRF高于健康組(P<0.05)；兩組RET、IPF差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2化療前后各監測指標的變化情況化療開始后，第5天檢測WBC下降(P<0.05)，第20天開始回升；PLT第5、10、15天檢測結果低于化療前(P<0.05)，第15天較第10天輕微回升，但兩者差異無統計學意義(P>0.05)，第20天顯著回升；RET在第5天開始下降(P<0.05)， 第15天回升， IRF在第5天下降(P<0.05)，在第10天開始回升，第15天顯著回升，第20天回升到化療前水平。RET%、IRF與WBC 和PLT比較，回升早，回升快。IPF在化療后第5天降低明顯，第10天明顯回升，第15天達到峰值。見表2。

2.3RET與RP的相關性在化療過程中，IRF與IPF呈正相關(r=0.591，P<0.05)。

3　討論

MM是一種漿細胞惡性增殖性疾病，是骨髓微環境中惡性漿細胞克隆性異常增生，導致正常的多克隆漿細胞增生和免疫球蛋白分泌受到抑制。據統計，其發病率約占血液系統惡性腫瘤的13%，占腫瘤性疾病的1%，近年來有逐漸增長的趨勢[3]。MM的主要治療手段是化療，骨髓抑制是化療過程中主要的副反應之一，由于紅細胞在血液中所占比例較大，MM患者化療后骨髓抑制情況在紅細胞系統的表現不明顯，而在白細胞系統和巨核細胞系統表現突出。因此，臨床上常觀察WBC和PLT水平來了解骨髓抑制和恢復情況[4]。本文對MM患者化療前后RET和RP參數的變化情況進行觀察，并與WBC和PLT 做比較，探討其變化趨勢。

表1　兩組各項指標比較

注：與健康組比較，aP<0.05。

表2　化療前后各參數的變化情況

注：與化療前比較，bP<0.05。

RET是骨髓釋放的新生RBC，細胞質含有殘存的嗜堿性核糖核酸(RNA)，經過特殊染料染色呈網狀結構而得名。本檢測采用全自動血液分析儀的流式細胞分析原理，使用熒光染料(polymentine和oxazine)與RET內RNA結合后，測定RET的熒光強度，RNA含量越多，熒光強度越強，RET也就越不成熟，反之亦然。根據熒光強度的大小，將RET分為HFR、MFR、LFR三部分，IRF是HFR與MFR之和。

RP是巨核細胞生成PLT過程中的未成熟PLT，巨核細胞活性增強，則PLT中RNA含量升高，即RP升高，體積較大。檢測時，RP經熒光染色后，通過儀器的半導激光束形成前向散射光和熒光強度，前向散射光代表細胞大小，可區分RBC和PLT，熒光強度反映RNA水平，區分RP和成熟PLT。未成熟的RP占PLT總數的百分比即網織血小板比率(IPF)。IPF升高可反映PLT的更新加速。由于化療后PLT總數下降，RP絕對值勢必受到影響，因此，IPF應用于監測更能判斷巨核細胞活性，判斷PLT生成能力，是體現骨髓造血的敏感指標[5-6]。

本文結果顯示，MM患者WBC和PLT顯著下降(P<0.05)，IRF較健康組高(P<0.05)，RET和IPF與健康人差異無統計學意義(P>0.05)。開始化療后，由于藥物的作用，各項觀察檢測指標(WBC、PLT、RET、IRF、IPF)迅速下降(P<0.05)，隨著患者造血功能的逐漸恢復，各項指標在不同時間逐步恢復，IRF和IPF首先在第10天回升，RET在第15天回升至化療前水平，WBC在第20天開始升高；PLT在第15天較第10天輕微升高，第20天恢復接近化療前水平。總體上看，RET、IRF、IPF與WBC和PLT相比，回升早，回升快，且IRF與IPF變化呈正相關，不受感染及輸入血小板的影響，更能監測急性造血細胞停滯是否發生，對骨髓造血功能的監控起到重要作用。

本文檢測MM患者外周血RET和RP參數，用血量少，無須骨髓穿刺，可以早期反應MM骨髓功能的變化，提示臨床預防貧血和出血等并發癥，減少預防性血小板輸注，節約稀缺的血液資源，減輕患者的痛苦和經濟負擔[7-8]，同時為制定后續的治療方案提供依據。

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R 733.3

10.3969/j.issn.1004-437X.2016.08.013

2015-12-08)