楊青
[摘要]尿生成實(shí)驗(yàn)是生理學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中結(jié)果較難控制的實(shí)驗(yàn),由于家兔和操作者的原因,往往造成實(shí)驗(yàn)失敗。在總結(jié)了以往失敗經(jīng)驗(yàn)基礎(chǔ)上,通過對實(shí)驗(yàn)觀察項(xiàng)目及操作細(xì)節(jié)做了調(diào)整后,實(shí)驗(yàn)的成功率顯著提高了,使尿生成實(shí)驗(yàn)?zāi)茼樌_展,同時也增強(qiáng)了學(xué)生的自信心。
[關(guān)鍵詞]生理學(xué);尿生成;實(shí)驗(yàn)
影響尿生成的因素是生理學(xué)中一個重要的實(shí)驗(yàn),其目的是通過實(shí)驗(yàn)了解影響尿生成的各種因素,加深學(xué)生對尿生成調(diào)節(jié)機(jī)制的理解。但是,尿生成實(shí)驗(yàn)對操作者的熟練程度及家兔本身的適應(yīng)能力有較高的要求,根據(jù)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的問題總結(jié)的失敗原因主要有這些:家兔個體差異大,家兔常出現(xiàn)少尿、無尿,用計(jì)數(shù)尿滴數(shù)的方法記錄尿量多少不切實(shí)際;實(shí)驗(yàn)中反復(fù)多次注射耳緣靜脈,學(xué)生操作不熟練,家兔耳緣靜脈容易被破壞實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目多、耗時長、2個學(xué)時的時間往往做不完;針對上述情況,實(shí)驗(yàn)室經(jīng)過長期教學(xué)的實(shí)踐,將實(shí)驗(yàn)做了相應(yīng)調(diào)整以提高實(shí)驗(yàn)的成功率。
1 幾種常用家兔尿液收集方法比較
目前收集尿液的方法主要有膀胱插管法、輸尿管插管法、尿道插管法等。輸尿管插管法,因?yàn)槌?dǎo)創(chuàng)傷性無尿,現(xiàn)在已經(jīng)很少使用。尿道插管法對于學(xué)生來說,首次操作很難成功,而多次插入會引起尿道血腫而影響尿液的排放。雖然對家兔手術(shù)損傷較小,但實(shí)際成功率并不是很高,而且該方法要求性別是雄兔,在實(shí)際使用時有一定的限制性。本實(shí)驗(yàn)室在多次實(shí)驗(yàn)教學(xué)中發(fā)現(xiàn),膀胱插管手術(shù)成功率更高一些,不管學(xué)生是否熟練都能操作成功,學(xué)生也可以直接看到膀胱和輸尿管的解剖結(jié)構(gòu),而且做膀胱插管的手術(shù)創(chuàng)傷一般情況下家兔都能承受,極少因?yàn)榘螂撞骞芏鴮?dǎo)致創(chuàng)傷性無尿。具體操作方法是:從恥骨聯(lián)合向上沿中線作長約4厘米的切口,沿腹白線打開腹腔,將膀胱輕拉到腹壁外,先辨認(rèn)清楚膀胱和輸尿管的解剖部位,用線結(jié)扎膀胱頸部以阻斷它同尿道的通路。用止血鉗提起膀胱前壁(靠近頂端部分),選擇血管較少處,切一縱行小口,插入插管后膀胱即隨著尿液的流出而縮小。如膀胱壁較松馳而膀胱容積仍較大時,可用粗線將膀胱扎掉一部分,使膀胱內(nèi)的貯尿量減至最少。使插管尿液流出口處低于膀胱水平,用小燒杯盛接由插管流出的尿液,手術(shù)完畢后,用溫?zé)岬纳睇}水紗布覆蓋腹部創(chuàng)口。
2 如何減少對家兔耳緣靜脈的損傷
家兔耳緣靜脈的特點(diǎn)是:靜脈沿耳背后緣走行,覆蓋在靜脈皮膚上的毛必須先拔去或剪去,用手指輕彈血管,使兔耳血流增加,并在耳根將耳緣靜脈壓迫,以使其血管怒張。但往往由于學(xué)生操作不熟練,出現(xiàn)注射阻力較大或局部腫脹,導(dǎo)致藥物漏出或滲入組織內(nèi),使藥物不能充分吸收,達(dá)不到用藥的目的。而且,實(shí)驗(yàn)內(nèi)容要求多次注射,不可避免對血管造成破壞,常常耳緣靜脈堵塞嚴(yán)重,使實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行下去。為了解決這個問題,用下面這個方法就能解決,耳緣靜脈注射采用一次性靜脈輸液器,準(zhǔn)備好輸液架,250ml生理鹽水,由于耳朵上有毛不能用膠布固定,可用1-2個動脈夾固定效果較好。給藥時,輸液器本身可以控制開關(guān),而且前端針頭處可斷開給藥,時間長了可以少量注射肝素,防止針頭被血堵住。但要注意的是操作中防止大量空氣進(jìn)入。
3 尿量的觀察方法
由于手術(shù)操作刺激或家兔本身的原因,家兔經(jīng)常出現(xiàn)少尿或無尿,為了增加家兔的基礎(chǔ)尿量,使實(shí)驗(yàn)效果明顯,可以調(diào)整一下實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的順序。
(1)給家兔輸液,增加家兔的基礎(chǔ)尿量,在實(shí)驗(yàn)過程中要嚴(yán)格控制輸液滴數(shù),約2滴/10秒,這樣輸入的生理鹽水量不會影響到動脈血壓。注射約15分鐘左右就可見尿液排出,觀察尿液的滴速。
(2)靜脈給藥去甲腎上腺素,如果見尿液滴速慢下來了,說明去甲腎上腺素起作用了。
(3)注射20%葡萄糖溶液5ml,待尿滴速加快時,立即進(jìn)行尿糖定性實(shí)驗(yàn)或用尿糖試紙檢測,陽性說明有尿糖。
(4)靜脈注射速尿,由于速尿藥效較大,雖然注射葡萄糖時尿滴速有所增加,但速尿的效果更加明顯,尿滴速更快,可以很明顯的觀察到效果。
(5)在時間允許的情況下,讓學(xué)生分離頸總動脈,進(jìn)行動脈插管,根據(jù)家兔體重放血20-30ml來降低血壓,觀察尿滴速,分析血壓降低對尿量的影響。
按照上述順序,理論上尿量先增加再減少,實(shí)驗(yàn)中則表現(xiàn)為尿滴速先快后慢,方便學(xué)生肉眼觀察。但此方法受家兔個體差異的影響,實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目之間等待的時間無法確定,根據(jù)多年的經(jīng)驗(yàn)大概在15分鐘之內(nèi)看到變化。
“尿生成的影響因素”是機(jī)能學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)典實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目之一,讓學(xué)生掌握家兔的基本手術(shù)操作,同時觀察多種因素對家兔尿量的影響并分析機(jī)制。在進(jìn)行了一系列嘗試改革,比如利用靜脈輸液的方法可以減少家兔耳緣靜脈注射的次數(shù),選擇更適宜的手術(shù)方式、調(diào)整實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目順序及對家兔尿滴速比較觀察,極大的提高了手術(shù)成功率,增強(qiáng)了學(xué)生的自信心,達(dá)到一定的教學(xué)目的。實(shí)驗(yàn)方法改進(jìn)以前,六個實(shí)驗(yàn)組2學(xué)時最多成功完成一至兩個組,差一點(diǎn)的班級六個組都實(shí)驗(yàn)失敗,改進(jìn)以后,多數(shù)班級六個組均能成功完成,效果明顯。但是,此實(shí)驗(yàn)還存在一些無法解決的問題,如家兔個體差異及健康狀態(tài)也常常會影響實(shí)驗(yàn)的效果,特別對于一些中專或?qū)?茖W(xué)校來說,要獲得標(biāo)準(zhǔn)的試驗(yàn)用家兔,需要學(xué)校經(jīng)費(fèi)的支持。其實(shí),在現(xiàn)實(shí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)中,實(shí)驗(yàn)室用家兔都是從市場購買的,個體差異較大。