鴨病毒性肝炎二價（1型+3型）卵黃抗體（JS株+SD株）被動免疫持續(xù)期研究

2016-10-25 09:18:11宋揚李建華藏玉婷孫德君孫曉峰武嘯

中國動物保健 2016年9期

宋揚，李建華，藏玉婷，孫德君，孫曉峰，武嘯

（哈藥集團生物疫苗有限公司研發(fā)中心黑龍江哈爾濱150069）

鴨病毒性肝炎二價（1型+3型）卵黃抗體（JS株+SD株）
被動免疫持續(xù)期研究

宋揚，李建華，藏玉婷，孫德君，孫曉峰，武嘯

（哈藥集團生物疫苗有限公司研發(fā)中心黑龍江哈爾濱150069）

本實驗取3批實驗室試制的卵黃抗體，按0.5mL/只接種3日齡SPF雛鴨，1.0mL/只接種6日齡SPF雛鴨，分別在注射抗體后1、3、5和7d攻毒，觀察攻毒保護情況。結(jié)果顯示，3和6日齡雛鴨接種抗體后1～5d注射1型和3型鴨甲型肝炎強毒，攻毒保護率均在90%以上；雛鴨接種抗體后7d注射鴨甲型肝炎強毒的攻毒保護率僅在70%～76.7%之間，攻毒對照組90%～100%死亡，健康對照組100%健活。說明注射抗體后5d抗體仍能產(chǎn)生良好地保護作用，而7d后保護作用大幅減弱。因此，確定鴨病毒性肝炎二價（1型+3型）卵黃抗體（JS株+SD株）被動免疫保護期為5d。

被動免疫保護期；卵黃抗體；雛鴨

鴨病毒性肝炎（Duck viral hepatitis，DVH）是由鴨肝炎病毒（duck hepatitis virus，DHV）引起雛鴨的一種以肝臟為主要病理變化的急性、高度致死性傳染病。目前我國主要流行1型鴨甲型肝炎病毒及“韓國新型”（即3型鴨甲型肝炎病毒），且發(fā)病率和死亡率均呈上升趨勢［1］。1～3周齡的雛鴨易感，發(fā)病嚴重，傳播迅速，死亡率高。雛鴨一般感染病毒后30h發(fā)病，并在2h內(nèi)死亡。早期預防對控制本病十分重要，但各種抗菌藥物對本病均無治療作用，本病的特異性防治依賴于被動免疫和主動免疫，為了控制該病的發(fā)生，使用卵黃抗體做緊急預防接種有較大的實踐意義。但使用卵黃抗體時，卵黃抗體在機體內(nèi)的被動免疫期是決定卵黃抗體免疫程序的決定性因素［2，3］。為此，本實驗對制備的二價卵黃抗體進行了抗體接種雛鴨后不同時間對與雛鴨攻毒保護相關(guān)性研究，以確定鴨肝炎二價卵黃抗體在雛鴨體內(nèi)的被動免疫持續(xù)期。

1　材料與方法

1.1材料

1）鴨病毒性肝炎二價（1型+3型）卵黃抗體（JS株+SD株）：批號：201201、201202、201203，由哈藥集團生物疫苗有限公司制備。

2）檢驗用強毒：1型鴨甲型肝炎病毒JS株肝組織懸液，批號：DHAV-JS-Q-01-2，病毒含量：106.50LD50/0.1mL，規(guī)格：2.0 mL/瓶；3型鴨甲型肝炎病毒SD株肝組織懸液，批號：DHAV-SD-Q-01-2，病毒含量：106.38LD50/0.1mL，規(guī)格：2.0mL/瓶，由哈藥集團生物疫苗有限公司分離、鑒定、保管和供應。

3）SPF雛鴨：3、6日齡SPF雛鴨，購自哈爾濱獸醫(yī)研究所。

4）注射器：1.0mL注射器，購自上海達美醫(yī)用塑料廠。

1.2方法

1.2.13日齡雛鴨被動免疫期試驗

每批抗體頸部皮下注射3日齡SPF雛鴨80只，每只0.5mL，同時設(shè)同批3日齡SPF雛鴨80只，每只頸部皮下注射生理鹽水0.5mL作為攻毒對照；取同批次3日齡SPF雛鴨10只，不注射任何藥品作為健康對照。在抗體注射后1、3、5和7d，分別從抗體試驗組和攻毒對照組雛鴨中隨機抽取20只，各分成兩組，每組各10只，一組注射1型鴨甲型肝炎病毒JS株肝組織懸液，每只0.5mL（含100LD50）；另一組注射3型鴨甲型肝炎病毒SD株肝組織懸液，每只0.5mL（含100LD50），各組同條件下隔離飼養(yǎng)10d，記錄結(jié)果。共計進行3批抗體試驗。

1.2.26日齡雛鴨被動免疫期試驗

每批抗體頸部皮下注射6日齡SPF雛鴨80只，每只1.0mL，同時設(shè)同批6日齡SPF雛鴨80只，每只頸部皮下注射生理鹽水1.0mL作為攻毒對照；取同批次6日齡SPF雛鴨10只，不注射任何藥品作為健康對照。在抗體注射后

1、3、5和7d，分別從抗體試驗組和攻毒對照組鴨中隨機抽取20只，各分成兩組，每組10只，一組注射1型鴨甲型肝炎病毒JS株肝組織懸液，每只0.5mL（含100LD50）；另一組注射3型鴨甲型肝炎病毒SD株肝組織懸液，每只0.5mL（含100LD50），各組同條件下隔離飼養(yǎng)10d，記錄結(jié)果。共計進行3批抗體試驗。

2　結(jié)果

不同日齡SPF雛鴨注射抗體后不同時間攻擊鴨甲型肝炎強毒，攻毒后觀察10d，測定抗體被動免疫期，結(jié)果（見表1～6）。

從表3～6結(jié)果可以看出，3批卵黃抗體注射的3和6日齡SPF雛鴨，注射后1～5d鴨甲型肝炎病毒攻毒保護率分別為96.7%～100%和100%，攻毒對照組雛鴨100%死亡；注射后7d，3和6日齡SPF雛鴨的攻毒保護率分別為73.3%和70%～76.7%，攻毒對照組雛鴨90%～100%死亡，健康對照組100%健活。

表1　1型鴨病毒性肝炎抗體預防持續(xù)時間測定結(jié)果

3　討論與結(jié)論

雛鴨注射卵黃抗體后，抗體在體內(nèi)能持續(xù)存在一段時間，并產(chǎn)生被動免疫保護作用［2］。雛鴨注射抗體后，持續(xù)數(shù)天，間隔不同時間注射鴨甲型肝炎強毒，結(jié)果3和6日齡雛鴨接種抗體后1～5d注射鴨甲型肝炎強毒的攻毒保護率均在90%以上；接種抗體后7d注射鴨甲型肝炎強毒的攻毒保護率僅在70%～76.7%之間，攻毒對照組90%～100%死亡，健康對照組100%健活。說明注射抗體后5d抗體仍能產(chǎn)生良好地保護作用，而7d后保護作用大幅減弱。因此確定鴨病毒性肝炎二價（1型+3型）卵黃抗體（JS株+SD株）被動免疫保護期為5d?！觯ň庉嫞黑w曉松）

表2　3型鴨病毒性肝炎抗體預防持續(xù)時間測定結(jié)果

［1］范書才，李虹，袁率珍，等.新型鴨肝炎病毒的分離鑒定［J］.中國預防獸醫(yī)學報，2009，10: 770-775.

［2］殷震，劉景華主編.動物病毒學二版［M］.北京:科學出版社，1997:294，328，335.

［3］白文彬，于康震主編.動物傳染病診斷學［M］.北京:中國農(nóng)業(yè)出版社，2002: 144-145

The Passive Immunity Duration Research ofDuck ViralHepatitis Bivalent（Type1+Type3）Yolk Antibody（Strain JS+Strain SD）

Song Yang，Li Jian-hua，Zang Yu-ting，Sun De-jun，Sun Xiao-feng，W u Xiao
（Harbin pharmaceuticalgroup bio-vaccine Co.，Ltd.，Harbin HeiLongjiang 150069）

Three sample of yolk antibodymade in laboratory was inoculated 3-day-old and 6-day-old SPF duckswith 0.5mL and 1.0mL respectively.After the injection of1357 days，the duckswere injected virulent viruses.The resultsshowed that the1 typeand 3 type ofduck hepatitis virus protection ratewas above 90%after 1～5 days injected 3-day-old and 6-day-old SPF ducks.After 7 days，virulent viruses attack protection rate wasonly between 70%～76.7%.The virus controlgroup was90%～100%death and healthy controlgroup was 100%healthy living.Theantibody could produce Good protection after5 daysofnjection and weak dramatically after 7 daysof injection.Therefore，determine the duck viralhepatitisbivalent（1+3）yolk antibody（JSseedlings）+SD passive immunity protection is5 days.

Passive Immunization ofProtection；Yolk Antibodies；Ducklings