紀世琪,孫志偉,韓志興,張海建, 程文龍, 趙玉千
(1.首都醫科大學附屬北京地壇醫院泌尿外科,北京 100015;2.首都醫科大學公共衛生學院,北京 100069)
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·基礎研究·
shRNA靶向抑制CD74基因對人腎透明細胞癌細胞786-O生物學行為的影響
紀世琪1,孫志偉2,韓志興1,張海建1, 程文龍1, 趙玉千1
(1.首都醫科大學附屬北京地壇醫院泌尿外科,北京100015;2.首都醫科大學公共衛生學院,北京100069)
目的探討抑制人CD74基因后對腎透明細胞癌786-O細胞生長和侵襲能力的影響。 方法通過慢病毒lentivirus-CD74轉染腎透明細胞癌786-O細胞后,MTT法檢測786-O細胞活力的變化,利用流式細胞學檢測腫瘤細胞的凋亡變化情況,Transwell小室實驗檢測786-O細胞侵襲能力改變情況,采用Westernblot方法檢測轉染前后786-O細胞CD74及相關蛋白的變化情況。結果慢病毒轉染786-O細胞后細胞中CD74蛋白水平表達明顯低于對照組(P<0.05),抑制CD74蛋白表達水平后786-O細胞生長明顯受到抑制,細胞活力降低,凋亡增加,細胞侵襲能力降低,且Survivin、MMP-2、MM-9蛋白也隨之下降,其與對照組結果對比差異具有統計學差異(P<0.05)。結論利用慢病毒轉染技術抑制CD74的表達可以抑制腎透明細胞癌786-O細胞的增值和侵襲能力,CD74基因可能作為癌基因在腎透明細胞癌中起作用。
腎癌;腎透明細胞癌;CD74;增值;侵襲
CD74蛋白開始研究是作為一種Ⅱ類主要組織相容性復合物(major histoeompatibility complex classⅡ, MHCⅡ)相關的Ⅱ型跨膜糖蛋白被發現的。CD74蛋白生理條件下主要表達于單核細胞、樹突狀細胞、巨噬細胞、胃腸道黏膜上皮細胞及活化B細胞等抗原遞呈細胞 (antigenpresentingcell,APC)[1]。作為MHCⅡ類分子的蛋白伴侶,CD74蛋白于機體免疫過程的抗原遞呈反應中發揮著重要作用,同時CD74還可作為MIF蛋白的高親和受體,CD74蛋白參與調控由MIF觸發的各種細胞信號通路,并對細胞與細胞、細胞與基質間(特別是腫瘤細胞)的黏附、轉移過程均參與表達調控。最新有研究發現CD74蛋白除了能參與機體免疫反應外,在許多腫瘤中均有表達上調,如……