比較兩種RAD54啟動子調(diào)控的全酵母發(fā)光細胞對化學(xué)誘變原的評價效果

田永杰，徐秀舉，陸益新，王超，周天祺，李湘鳴

揚州大學(xué)醫(yī)學(xué)院預(yù)防醫(yī)學(xué)教研室，揚州225001

比較兩種RAD54啟動子調(diào)控的全酵母發(fā)光細胞對化學(xué)誘變原的評價效果

田永杰，徐秀舉，陸益新，王超，周天祺，李湘鳴*

揚州大學(xué)醫(yī)學(xué)院預(yù)防醫(yī)學(xué)教研室，揚州225001

通過分子生物學(xué)技術(shù)構(gòu)建2種不同RAD54啟動子調(diào)控的yEGFP重組報告載體pRAD54-yEGFP和pRAD54S-yEGFP，前者啟動子DNA為1.8 kb，后者為0.5 kb，分別轉(zhuǎn)入W303-1A酵母細胞，構(gòu)建2種啟動子調(diào)控的發(fā)光酵母細胞，用不同化學(xué)誘變原作用后，用流式細胞儀和多功能發(fā)光儀測定酵母的發(fā)光強度。結(jié)果發(fā)現(xiàn)2種啟動子調(diào)控的酵母細胞的發(fā)光強度均與化學(xué)誘變原(甲磺酸甲脂、4-硝基-N-氧化喹啉和5-氟尿嘧啶)有明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系，但是W303-1A/RAD54-yEGFP劑量效應(yīng)關(guān)系較為明顯，產(chǎn)生的最大誘導(dǎo)倍數(shù)(5.96、2.19和2.71)明顯高于W303-1A/RAD54S-yEGFP所產(chǎn)生的最大誘導(dǎo)倍數(shù)(2.53、1.50和1.91)，可能與啟動子序列中轉(zhuǎn)錄因子的數(shù)量以及轉(zhuǎn)錄因子間協(xié)同增效作用有關(guān)。同時發(fā)現(xiàn)，流式細胞儀測定效果明顯優(yōu)于發(fā)光儀測定效果。所以在構(gòu)建RAD54啟動子調(diào)控重組酵母細胞篩選誘變時，選用全啟動子序列效果較好。

化學(xué)誘變原；RAD54啟動子；酵母細胞；綠色熒光蛋白；劑量效應(yīng)關(guān)系

田永杰,徐秀舉,陸益新,等.比較兩種RAD54啟動子調(diào)控的全酵母發(fā)光細胞對化學(xué)誘變原的評價效果[J].生態(tài)毒理學(xué)報，2016,11(3):251-257

Tian Y J,Xu X J,Lu Y X,et al.The comparison of bioassay for chemical mutagens between the two RAD54 promoters regulating whole fluorescent yeast cells[J].Asian Journal of Ecotoxicology,2016,11(3):251-257(in Chinese)

DNA毒性化合物(化學(xué)誘變物，簡稱誘變物)是指一大類可對生物大分子遺傳物質(zhì)產(chǎn)生毒性的化合物。這類化合物所造成的環(huán)境污染潛在性危害較大，因為其多數(shù)具有致癌性。……