ST段抬高性急性心肌梗死患者循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞及內(nèi)皮生長因子與心功能的關(guān)系

曹志偉

（河北省唐山市灤縣人民醫(yī)院心內(nèi)科，河北唐山067000）

ST段抬高性急性心肌梗死患者循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞及內(nèi)皮生長因子與心功能的關(guān)系

曹志偉

（河北省唐山市灤縣人民醫(yī)院心內(nèi)科，河北唐山067000）

目的探討ST段抬高性急性心肌梗死患者外周血循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞和血清血管內(nèi)皮生長因子水平與心功能不同分級(jí)的關(guān)系。方法選擇2012年4月至2014年10月醫(yī)院心內(nèi)科確診的ST段抬高性急性心肌梗死患者150例，采用流式細(xì)胞儀檢測患者循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞，以酶聯(lián)免疫吸附法檢測血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)水平，并采用Pearson相關(guān)性分析其與心功能的關(guān)系。結(jié)果Pearson相關(guān)性分析表明，外周血循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞和血清血管內(nèi)皮生長因子水平均與心功能呈正相關(guān)（r=0.006 8，P=0.001）。病程12～24 h患者循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與血管內(nèi)皮生長因子顯著高于病程＜12 h患者，差異顯著有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；病程24～48 h患者循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與血管內(nèi)皮生長因子顯著高于病程14～24 h患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。按心功能Killip分級(jí)，ST段抬高性急性心肌梗死患者循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與血管內(nèi)皮生長因子水平從低到高依次為Ⅳ級(jí)＜Ⅰ級(jí)＜Ⅲ級(jí)＜Ⅱ級(jí)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與血清血管內(nèi)皮生長均與ST段抬高性急性心肌梗死發(fā)病呈正相關(guān)，心功能不全會(huì)減少循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與血清血管內(nèi)皮生長的分泌與激活。

冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病；急性心肌梗死；ST段抬高性；循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞；血管內(nèi)皮生長因子

心肌梗死多發(fā)于中老年，可嚴(yán)重影響患者身體健康和生活質(zhì)量，其主要病因是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化、管腔狹窄、血栓形成等［1］。ST段抬高性急性心肌梗死是心肌發(fā)生嚴(yán)重且持久的缺氧或壞死，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊破裂導(dǎo)致血管管腔狹窄或心肌供血減少和中斷［2-3］。研究表明，內(nèi)皮祖細(xì)胞和血管內(nèi)皮生長因子在心肌急性缺血和再灌注損傷及修復(fù)中具有重要作用［4］。內(nèi)皮祖細(xì)胞是成熟血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體，最早在外周血中被發(fā)現(xiàn)，隨后證實(shí)其起源于骨髓。循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞是特異性的血管內(nèi)皮生長因子R-2受體，不僅可自我更新，還可在缺血和缺氧條件下分泌血管內(nèi)皮生長因子。研究發(fā)現(xiàn)，冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病（簡稱冠心病）患者血清血管內(nèi)皮生長因子可升高［5-6］。本研究中探討了ST段抬高性急性心肌梗死患者外周血循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞和血清血管內(nèi)皮生長因子水平與心功能不同分級(jí)的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料

納入標(biāo)準(zhǔn)［7］：心電圖顯示ST段抬高性急性心肌梗死樣改變；冠狀動(dòng)脈造影顯示1支以上冠狀動(dòng)脈存在嚴(yán)重狹窄（＞75%）甚至完全閉塞；臨床表現(xiàn)為心悸、胸悶、胸痛；既往未經(jīng)冠狀動(dòng)脈介入治療或旁路移植手術(shù)治療。本研究經(jīng)本院倫理委員會(huì)審批（批號(hào)為20120206），所有入組患者均簽署知情同意書。

排除標(biāo)準(zhǔn)［7］：合并瓣膜性心臟病；肝、腦、肺、腎及血液系統(tǒng)慢性疾病；心肌病、心肌炎等心臟疾病；全身免疫性疾病；外周血管疾病；全身或局部感染性疾病；手術(shù)創(chuàng)傷。

病例選擇：選擇2012年4月至2014年10月我院心內(nèi)科確診的ST段抬高性急性心肌梗死患者150例，其中男82例，女68例；年齡35～71歲，平均（56.4± 8.7）歲。兩組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。見表1。

表1　患者一般資料比較

1.2方法

收集納入研究對(duì)象的患者年齡、性別、就診時(shí)間等資料，心功能評(píng)價(jià)采取Killip心功能分級(jí)方法。分別于就診后檢測外周血循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞和血清血管內(nèi)皮生長因子，并進(jìn)行心功能評(píng)價(jià)。

采用抗凝管空腹取靜脈血3 mL，采用流式細(xì)胞儀檢查患者外周血循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞［8］。循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞的判斷標(biāo)準(zhǔn)為CD34+/KDR+雙陽性。將20 μL CD45抗體（武漢華美生物工程有限公司提供）加入到含100 μL外周血的離心管中；依次將20 μL FITC鼠抗人單克隆CD34+抗體（武漢華美生物工程有限公司提供），20 μL PE-KDR/VEGFR-2鼠抗人單克隆抗體（武漢華美生物工程有限公司提供）加入并混勻；避光室溫孵育20 min；加入1 000 μL專用紅細(xì)胞溶解液，避光室溫孵育20 min；以2 000 r/min離心5 min，棄去上清液后加入500μL生理鹽水。后以流式細(xì)胞儀（美國BD）進(jìn)行檢測分析。以CD34+/KDR+雙陽性標(biāo)記細(xì)胞的千分比代表循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞的數(shù)量。

采用抗凝管空腹取靜脈血3 mL，取血后迅速3 000 r/min離心20 min，取血清，-70℃冰箱保存。入組完成后統(tǒng)一采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)水平［9］。試劑盒購自武漢華美生物工程有限公司，試驗(yàn)嚴(yán)格按試劑說明書操作。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行分析。相關(guān)性分析采用Spearman等級(jí)相關(guān)檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以%表示，行χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以±s表示，行t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與血管內(nèi)皮生長因子的關(guān)系

血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與血管內(nèi)皮生長因子相關(guān)性Pearson分析結(jié)果表明，血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)水平呈正相關(guān)（r=0.006 8，P=0.001）。病程12～24 h患者循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與血管內(nèi)皮生長因子顯著高于病程＜12 h患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；病程24～48 h患者循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與血管內(nèi)皮生長因子顯著高于病程14～24 h組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

2.2血管內(nèi)皮祖細(xì)與內(nèi)皮生長因子和心功能的關(guān)系

按Killip心功能分級(jí)，不同ST段抬高性急性心肌梗死患者循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與血管內(nèi)皮生長因子從低到高依次為Ⅳ級(jí)＜Ⅰ級(jí)＜Ⅲ級(jí)＜Ⅱ級(jí)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2　患者外周血循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞和血清血管內(nèi)皮生長因子水平及與心功能的關(guān)系分析（±s）

表2　患者外周血循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞和血清血管內(nèi)皮生長因子水平及與心功能的關(guān)系分析（±s）

注：與病程＜12 h患者比較， P＜0.05。

項(xiàng)目病程＜1 2 h（n = 7 2）1 2～2 4 h（n = 4 6）2 4～4 8 h（n = 3 2）心功能Ⅰ級(jí)（n = 2 6）Ⅱ級(jí)（n = 6 3）Ⅲ級(jí)（n = 3 5）Ⅳ級(jí)（n = 2 6）血管內(nèi)皮祖細(xì)胞（‰）0 . 3 5 ± 0 . 0 8 0 . 5 6 ± 0 . 1 3 0 . 6 6 ± 0 . 1 6 0 . 3 1 ± 0 . 0 9 0 . 6 7 ± 0 . 1 5 0 . 5 1 ± 0 . 1 4 0 . 2 1 ± 0 . 0 6血管內(nèi)皮生長因子（ g / L）7 6 . 5 ± 1 0 . 3 1 0 4 . 8 ± 1 3 . 7 1 1 4 . 9 ± 1 4 . 1 7 8 . 1 ± 1 1 . 2 1 1 2 . 7 ± 1 4 . 3 9 0 . 4 ± 1 1 . 7 6 7 . 4 ± 8 . 1

3　討論

ST段抬高性心肌梗死患者除冠脈病變外，還存在因纖維蛋白血栓導(dǎo)致的冠脈急性完全閉塞現(xiàn)象，因此，ST段抬高性心肌梗死患者心肌損害程度標(biāo)志物變化明顯［2］。急性心肌梗死患者冠狀動(dòng)脈閉塞后，心肌細(xì)胞即有少量壞死，2 h后絕大部分心肌呈凝固性壞死，充血水腫并伴炎癥細(xì)胞浸潤，心室壁梗死面積超過20%時(shí)，即可發(fā)生心臟功能下降甚至心力衰竭［10］。

循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞中血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)不斷增加，被認(rèn)為是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞［11］。血管內(nèi)皮生長因子是特異性最強(qiáng)的促血管生長因子。冠心病不僅可誘導(dǎo)內(nèi)皮損傷及功能障礙，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣斑塊的形成，而且能干擾阻礙循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞的信號(hào)通路，誘發(fā)循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞過度凋亡［12］。研究證實(shí)，冠心病患者外周血血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)可促進(jìn)循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量的增加，通過循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞表面的血管內(nèi)皮生長因子受體與循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞進(jìn)行信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，且外周血血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與血管內(nèi)皮生長因子水平呈正相關(guān)［13］。因此，本研究中通過流式細(xì)胞儀檢測患者循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞，以酶聯(lián)免疫吸附法檢測血管內(nèi)皮生長因子的表達(dá)水平，探討ST段抬高性急性心肌梗死患者外周血循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞和血清血管內(nèi)皮生長因子水平與心功能不同分級(jí)的關(guān)系。

血管內(nèi)皮祖細(xì)胞作為血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體，參與血管形成，在病理狀態(tài)下也能被動(dòng)員，增加血管重建。在缺血、血管損傷等刺激下血管內(nèi)皮祖細(xì)胞向外周血遷移，分化內(nèi)皮細(xì)胞，形成新生血管，以達(dá)到緩解缺血和修復(fù)血管的作用［14-15］。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，ST段抬高性急性心肌梗死患者就診時(shí)外周血循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量與心功能有關(guān)系。病程12～24 h患者循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量高于病程＜12 h患者，病程24～48 h患者循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量高于病程14～24 h組。ST段抬高性急性心肌梗死患者循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量小到大依次為KillipⅣ級(jí)＜Ⅰ級(jí)＜Ⅲ級(jí)＜Ⅱ級(jí)。在生理?xiàng)l件下，周細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、膠質(zhì)細(xì)胞、視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞和神經(jīng)節(jié)細(xì)胞等均可表達(dá)低水血管內(nèi)皮生長因子。缺血和缺氧等刺激時(shí)，血清中血管內(nèi)皮生長因子水平升高，可促進(jìn)血管新生和側(cè)支循環(huán)形成［16］。

本研究結(jié)果顯示，隨著就診時(shí)間延長，外周血循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量與血清中血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)水平不再繼續(xù)升高，說明缺血缺氧刺激在較短時(shí)間內(nèi)就可促進(jìn)血管內(nèi)皮生長因子分泌和血管內(nèi)皮祖細(xì)胞活化。隨著就診時(shí)間的延長，血管內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量與血清中血管內(nèi)皮生長因子表達(dá)水平增加變緩，說明持續(xù)的缺血缺氧刺激，可導(dǎo)致血管內(nèi)皮生長因子分泌和血管內(nèi)皮祖細(xì)胞活化。其可能機(jī)制為發(fā)病后心肌循環(huán)缺血缺氧程度發(fā)生改變，內(nèi)皮細(xì)胞能夠大量分泌釋放血管內(nèi)皮生長因子，進(jìn)而促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖。

綜上所述，循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與血清血管內(nèi)皮生長均與ST段抬高性急性心肌梗死發(fā)病呈正相關(guān)，心功能不全會(huì)減少循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與血清血管內(nèi)皮生長的分泌與激活。

［1］陳春望，程勇，張榮林，等.替羅非班聯(lián)合血栓抽吸對(duì)接受經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療的急性ST段抬高性心肌梗死患者的梗死相關(guān)動(dòng)脈血流和心功能的影響［J］.中國循環(huán)雜志，2013，28（8）：595-598.

［2］張士法.ST段抬高型心肌梗死和非ST段抬高型心肌梗死的臨床特征探析［J］.中華高血壓雜志，2015，23（1）：136-137.

［3］許芬芬，彭漪，孫梅琴，等.急性S丁段抬高性心肌梗死患者外周血單核細(xì)胞亞群變化及其臨床意義［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2014，24（34）：29-33.

［4］謝安明，王雅君，崔麗裙，等.血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與VEGF對(duì)增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變新生血管形成的影響［J］.西安交通大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2014，34（2）：233-236.

［5］李詠雪，林松，陸曉，等.生理性缺血訓(xùn)練對(duì)冠心病患者循環(huán)血管內(nèi)皮祖細(xì)胞的影響［J］.中國康復(fù)醫(yī)學(xué)雜志，2012，27（4）：293-299.

［6］張晶，陳春紅，王艷飛.早期應(yīng)用鹽酸替羅非班對(duì)急性非ST段抬高型心肌梗死患者血小板聚集率及預(yù)后的影響［J］.醫(yī)學(xué)研究與教育，2014，31（3）：25-28.

［7］中華醫(yī)學(xué)會(huì)心血管專業(yè)委員會(huì)，中華心血管病雜志編輯部.急性ST段抬高型心肌梗死診斷和治療指南［J］.中華心血管病雜志，2010，38（8）：675-690.

［8］林文果，劉麗，何江，等.阿托伐他汀對(duì)急性心肌梗死循環(huán)內(nèi)皮祖細(xì)胞的作用以及對(duì)延遲開通冠脈時(shí)并發(fā)癥的影響［J］.西部醫(yī)學(xué)，2012，24（12）：2 313-2 316.

［9］張慧敏，艾輝，劉飛，等.瑞舒伐他汀對(duì)急性冠狀動(dòng)脈綜合征患者血清血管內(nèi)皮生長因子和高敏C反應(yīng)蛋白的影響［J］.中國醫(yī)藥，2014，9（7）：943-945.

［10］胡大一.心血管內(nèi)科學(xué)高級(jí)教程［M］.北京：人民軍醫(yī)出版社，2014：146-150.

［11］許琳，李曉燕，韓淑芳，等.瑞舒伐他汀對(duì)老年穩(wěn)定性冠心病患者外周血中血管內(nèi)皮祖細(xì)胞的影響［J］.中華老年心腦血管病雜志，2011，13（2）：137-139.

［12］李琴山，劉洋，李艷菊，等.人外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞培養(yǎng)方法的建立［J］.中國組織工程研究與臨床康復(fù)，2011，15（46）：8 657-8 660.

［13］祁學(xué)文，劉海峰，薛玉增，等.血管內(nèi)皮祖細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞生長因子在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病狀態(tài)時(shí)的變化［J］.中國組織工程研究與臨床康復(fù)，2007，11（42）：8 439-8 443.

［14］孫青，李曉燕.外周血中內(nèi)皮祖細(xì)胞與冠心病合并糖尿病關(guān)系的研究進(jìn)展［J］.中國循證心血管醫(yī)學(xué)雜志，2014（2）：234-235.

［15］姜朝新，潘開拓，曾令恒等.急性心肌梗死患者外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞相關(guān)研究［J］.重慶醫(yī)學(xué)，2013，42（9）：1 017-1 018.

［16］楊曉云，郭靖濤，趙志國，等.冠心病單支病變經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療術(shù)前后血清血管內(nèi)皮生長因子水平變化［J］.臨床薈萃，2013，28（5）：495-497.

Relationship between Circulating Vascular Endothelial Progenitor Cells with Vascular Endothelial Growth Factor and Cardiac Function in Patients with ST Segment Elevation of Acute M yocardialInfarction

Cao Zhiwei
（Department of Cardiology，Tangshan City Luanxian people′s Hospital，Tangshan，Hebei，China067000）

ObjectiveTo investigate the relationship between circulating vascular endothelial progenitor cells with vascular endothelial growth factor and cardiac function in patients with ST segment elevation of acute myocardial infarction.M ethods150 cases of patients with ST segment elevation of acute myocardial infarction in April 2012 to October 2014 in heart internal medicine department of the hospital were seleceted to collect the clinical data，and the vascular endothelial progenitor cells were detected using flow cytometry，vascular endothelial growth factor expression level was detected using enzyme-linked immunosorbent adsorption method，and its relationship with heart function was analyzed using Pearson correlation.ResultsPearson correlation analysis showed that peripheral blood circulation vascular endothelial progenitor cells and serum VEGF levels were positively correlated with cardiac function（r=0.006 8，P=0.001）. Circulating vascular endothelial progenitor cells and vascular endothelial growth factor in duration of 12 to 24 h were significantly higher than that of course of＜12 h patients and difference was significantly significant difference（P＜0.05）；Vascular endothelial progenitor cells and vascular endothelial growth factor in course 24-48 h was significantly higher than that of course 14-24 h，the difference was significant（P＜0.05）.According to Killip classification，ST segment elevation acute myocardial infarction patients vascular endothelial progenitor cells and vascular endothelial growth factor level from low to high were as follows：gradeⅣ＜gradeⅠ＜gradeⅢ＜gradeⅡ，the differences were statistically significant difference（P＜0.05）.ConclusionCirculating endothelial progenitor cells and serum vascular endothelial growth were positively correlated with ST segment elevation of acute myocardial infarction，cardiac insufficiency can reduce circulating endothelial progenitor cells and serum vascular endothelial growth of secretion and activation.

coronary heart disease；acute myocardial infarction；ST segment elevation；circulating vascular endothelial progenitor cells；vascular endothelial growth factor

R363；R542.2+2

A

1006-4931（2016）17-0093-03

曹志偉（1980-），男，河北唐山人，大學(xué)本科，主治醫(yī)師，主要從事臨床心內(nèi)科工作，（電子信箱）15373529618@163.com。

（2016-04-13；

2016-05-03）