纈沙坦對壓力超負荷下心肌肥厚中ANF、AngⅡ水平的影響

董海英

【摘要】 目的 探討壓力超負荷下血管緊張素受體1（AT1）拮抗劑纈沙坦對心鈉素（ANF）、人血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）水平的影響。方法 24只3月齡健康 SD 雄性大鼠， 采用不完全結(jié)扎腹主動脈方法建立大鼠高血壓心肌肥厚模型， 將其隨機分為手術組（不完全縮窄腹主動脈）、手術加藥物組[纈沙坦1 mg/（kg·d）]及正常對照組， 每組8只。鼠尾測壓儀監(jiān)測術前及術后3、7、14、28 d各組大鼠尾動脈血壓；測定心肌肥厚指數(shù)；應用放射免疫分析法測定肥厚心肌ANF、AngⅡ水平。結(jié)果 術后3、7、14、28 d正常對照組和手術加藥物組收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）顯著低于手術組， 差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）；術后28 d手術加藥物組與正常對照組血壓比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。手術組心肌肥厚指數(shù)為（32.9±1.38）mg/g， 心肌ANF含量為（347.12±23.25）pg/ml， 心肌AngⅡ含量為（98.36±10.61）pg/ml， 顯著高于手術加藥物組[（27.66±2.14）mg/g、（161.92±10.69）pg/ml、（48.37±9.41）pg/ml]和正常對照組[（25.20±1.93）mg/g、（93.58±2.49）pg/ml、（35.33±6.56）pg/ml]， 差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。手術加藥物組的心肌ANF和AngⅡ含量高于正常對照組， 差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結(jié)論 心肌肥厚指數(shù)及ANF、AngⅡ含量可作為間接判斷高血壓心肌肥厚程度的指標， 纈沙坦能削弱心肌肥厚的形成， 并能降低心臟局部ANF、AngⅡ水平。

【關鍵詞】 心肌肥厚 ；心鈉素；人血管緊張素Ⅱ；纈沙坦

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.26.191

有研究表明， 心血管疾病已成我國第一大危害國人健康的疾病， 且其發(fā)病率和死亡率呈顯著上升的趨勢， 而心肌肥厚是心血管疾病獨立的危險因素[1]。最近流行病學研究顯示， 心肌肥厚是缺血性心肌病、心律失常、猝死的一個獨立的危險因素[2]。對原發(fā)性高血壓能夠引起的心室肥厚在以往的研究較多， 但在分子機制水平的研究較少， 其分子機制也尚不清楚。本次實驗研究通過對大鼠的腹主動脈進行不完全結(jié)扎， 引起循環(huán)系統(tǒng)壓力負荷增加， 建立高血壓心肌肥厚大鼠模型[2]， 用纈沙坦干預壓力超負荷實驗動物模型， 放射免疫分析法測定肥厚心肌ANF、AngⅡ水平， 從而加深對心肌肥厚的發(fā)生機制的認識。具體報告如下。

1 材料與方法

1. 1 實驗材料 實驗大鼠為24只3月齡健康 SD 雄性大鼠， 隨機分為手術組（不完全縮窄腹主動脈）、手術加藥物組[纈沙坦1 mg/（kg·d）]、正常對照組， 每組8只。

1. 2 實驗指標檢測

1. 2. 1 一般狀況觀察 在實驗期間每天觀察記錄大鼠的精神狀態(tài)、行為、活動度、進食量等情況。手術組6號術后第2天， 3號7 d后死亡。

1. 2. 2 實驗動物體重和血壓的監(jiān)測 大鼠于實驗第1天至采集標本麻醉前， 測體重分別作為實驗前體重和實驗后體重， 實驗后體重與實驗前體重之差值稱為體重變化值。使用無創(chuàng)血壓測量分析各組術前血壓， 手術組、手術加藥物組分別術后3、7、14、28 d的大鼠尾動脈血壓， 正常對照組采集標本前血壓。

1. 2. 3 取材與樣本處理 28 d后， 完成三組血壓測定后， 開胸取出心臟， 用全心重與體重（mg/g） 比定量心肌肥大指數(shù)（HMI）。取約1 mm3室間隔中部組織， 制作4 ?m 切片， HE 染色， 光學顯微鏡觀察。另外心肌組織放入-80℃冰箱保存， 用于放免測定。

1. 2. 4 采用放射免疫法測心肌組織ANF、AngⅡ因子。

1. 3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計學軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差（ x-±s）表示， 采用t檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2. 1 三組大鼠實驗前后體重變化比較 三組大鼠實驗前后體重及體重變化值的平均指標組間比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表1。

2. 2 三組大鼠不同時段鼠尾血壓變化比較 術后3、7、14、28 d正常對照組和手術加藥物組SBP、DBP顯著低于手術組， 差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）；術后28 d手術加藥物組與正常對照組血壓比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表2。

2. 3 三組大鼠心肌肥厚指數(shù)、心肌ANF和AngⅡ含量的變化比較 手術組心肌肥厚指數(shù)、心肌ANF和AngⅡ含量顯著高于手術加藥物組和正常對照組， 差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）；手術加藥物組心肌ANF和AngⅡ含量高于正常對照組， 差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）， 心肌肥厚指數(shù)與正常對照組比較， 差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表3。

2. 4 三組大鼠心臟病理學檢測結(jié)果 手術組大部分心肌纖維腫脹， 肌內(nèi)可見束灶性纖維組織增生， 心肌細胞排列紊亂， 骨質(zhì)疏松， 細胞橫截面積較大， 心肌細胞明顯肥大。手術加藥物組：大鼠心肌也有不同程度的病理改變， 與手術組相比， 心肌損傷明顯輕。正常對照組：心肌纖維形態(tài)平均， 排列成束， 見極少結(jié)締組織， 肌束無炎性細胞浸潤， 心肌細胞排列， 形態(tài)， 染色質(zhì)明顯， 細胞橫截面積較小。

3 討論

心臟肥大是心肌細胞外部和（或）內(nèi)部刺激的自適應響應， 引起心肌肥大的原因包括高血壓、心肌梗死、心律失常、瓣膜病等多種疾病。在病理學上， 只有心臟肌肉細胞的體積增加， 而非數(shù)量上增多。肥大心肌雖然有利保持在心肌肥大的早期階段正常的心臟功能， 但心肌肥大不是無限度的， 如果病因歷久而不能被消除， 心肌肥厚也可以增加耗氧量和減少心肌的合規(guī)性， 則肥大心肌的功能不能長期維持正常而終轉(zhuǎn)向心力衰竭。腎素-血管緊張素系統(tǒng)（RAS）管理充血性心臟衰竭的整個病理過程， 和局部RAS對靶器官的效應更為重要。血管緊張素Ⅱ作為RAS的中心， 已經(jīng)扭轉(zhuǎn)心肌肥厚的研究重點和重塑[3， 4]。實驗結(jié)果表明， 腹主動脈縮窄28 d高血壓大鼠出現(xiàn)了不同程度的心肌肥厚， AT1拮抗劑纈沙坦能減弱心肌肥厚的形成， 降低局部心肌血管緊張素Ⅱ水平， 可見血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑不僅阻斷AT1受體， 降低心腦血管局部血管緊張素Ⅱ水平及心肌保護的重建中起著非常重要的作用[5]。

心肌肥大的分子機制尚不清楚， 但從細胞水平可分為核基因轉(zhuǎn)錄激活、細胞外肥大刺激、細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導。心肌肥厚的本質(zhì)特征是由核基因表達的變化， 其次是胚胎心臟基因如β-MHC標記、α-skeletal-actin、ANF表達[6]。ANF通常由心房肌細胞分泌， 分泌增加合成可作為心肌肥厚和心室肌細胞在胚胎心臟鈉元素表示一個指標高， 可以合成更多的心臟鈉元素；出生后下降明顯， 與心肌肥大后增加。在本次實驗中， 發(fā)現(xiàn)大鼠腹主動脈縮窄28 d后， 心肌間質(zhì)增生， 心肌纖維增大， 纖維化， 心臟重量指數(shù)明顯增加， 心室肌鈉分泌的心臟也有明顯增加， 藥物干預后明顯減少， 這說明鈉心元素的超生理劑量也可能參與心肌肥厚的發(fā)生和發(fā)展[7]。本實驗通過藥物AT1拮抗劑纈沙坦的干預證實了其是治療高血壓、逆轉(zhuǎn)心肌肥厚的一個新策略。

綜上所述， 心肌肥厚指數(shù)及ANF、AngⅡ含量可作為間接判斷高血壓心肌肥厚程度的指標， AT1拮抗劑纈沙坦能削弱心肌肥厚的形成， 并能降低心臟局部ANF、AngⅡ水平。

參考文獻

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[收稿日期：2016-07-28]