不同中醫(yī)證型食道癌對(duì)化療藥物敏感性的相關(guān)性分析

辛　偉　周勇鋒　張　帆

(陜西省寶雞市中醫(yī)醫(yī)院胸外科，寶雞，721000)

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不同中醫(yī)證型食道癌對(duì)化療藥物敏感性的相關(guān)性分析

辛偉周勇鋒張帆

(陜西省寶雞市中醫(yī)醫(yī)院胸外科，寶雞，721000)

目的：分析不同中醫(yī)證型食道癌和化療藥物敏感性的相關(guān)性。方法：隨機(jī)選取2013年4月至2016年3月，于我院就診經(jīng)胃鏡取病理組織活檢并確診為食管鱗癌的患者60例，通過中醫(yī)辨證論治，將其證型分為痰瘀互結(jié)型19例、氣陰兩虛型17例、津虧熱結(jié)型13例、痰氣交阻型11例，其中年齡在40～60歲之間，平均年齡(47.6±6.8)歲，其中男37例，女23例。體外腫瘤組織細(xì)胞液制備均由手術(shù)切除的食管癌患者提供新鮮組織塊，體外加入不同濃度的紫杉醇、伊立替康、澤菲、5-氟尿嘧啶、順鉑等化療藥物，細(xì)胞MTT測(cè)試計(jì)算各個(gè)中醫(yī)證型中化療藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制率。結(jié)果：在用5種不同化療藥物分別對(duì)60例食管癌患者的食管癌細(xì)胞進(jìn)行體外抑制試驗(yàn)，結(jié)果顯示各藥物對(duì)癌細(xì)胞敏感度的基本情況為：紫杉醇>順鉑>5-氟尿嘧啶>伊立替康>澤菲。各組間經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，痰瘀互結(jié)型、津虧熱結(jié)型和痰氣交阻型各組間經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。痰瘀互結(jié)型、津虧熱結(jié)型和痰氣交阻型的化療藥物敏感性均高于氣陰兩虛型(P<0.05)。結(jié)論：不同中醫(yī)證型食道癌與化療藥物敏感性存在相關(guān)性，其中氣陰兩虛型存在耐藥性。

中醫(yī)證型；食道癌；化療藥物敏感性；相關(guān)性

食道癌是常見的消化道惡性腫瘤之一，食道癌對(duì)人體的生命和健康造成嚴(yán)重的威脅，在消化道惡性腫瘤中其死亡率僅次于胃癌[1]。臨床上鱗狀細(xì)胞上皮瘤是食道癌中最常見的分型，而腺癌相對(duì)少見。食道癌的生存率較低，僅10%～15%[2]，其治療難點(diǎn)在于確診時(shí)幾乎都是屬于中晚期[3]，早期患者病情較隱匿，容易被當(dāng)做輕癥治療[4]。食道癌的臨床治療目的就是盡可能延長(zhǎng)患者的生存期和提高患者的生存質(zhì)量，而主要治療方式目前仍是化療[5]。化療藥物和化療方案不斷的更新以期提高患者化療效果的持續(xù)性和提高患者的生存時(shí)間，目前臨床上使用的化療藥物是療效較為認(rèn)可的新的細(xì)胞毒性藥物[6]，如順鉑(DDP)、氟優(yōu)(5-氟尿嘧啶，5-FU)等迄今為止臨床上食道癌的標(biāo)準(zhǔn)化化療方案是DDP聯(lián)合5-FU，由于食道癌中腫瘤對(duì)化療藥物的敏感性存在差異，該方案有效率為20%～50%[7]。有研究發(fā)現(xiàn)[8]中醫(yī)辨證論治進(jìn)行個(gè)體化治療，療效顯著，而食道癌不同的中醫(yī)辨證分型及其病理分型有關(guān)。因此本研究旨在從化療藥物敏感性的角度探討其與不同中醫(yī)證型的相關(guān)性。現(xiàn)報(bào)道如下。

1　資料與方法

1.1一般資料隨機(jī)選取2013年4月至2016年3月，于我院就診經(jīng)胃鏡取病理組織活檢并確診為食管鱗癌的患者60例，通過中醫(yī)辨證論治，將其證型分為痰瘀互結(jié)型19例、氣陰兩虛型17例、津虧熱結(jié)型13例、痰氣交阻型11例，其中年齡在40～60歲之間，平均年齡(47.6±6.8)歲，其中男37例，女23例，體外腫瘤組織細(xì)胞液制備均由手術(shù)切除的食管癌患者提供新鮮組織塊，各組在例數(shù)、年齡、性別、病程等方面均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。見表1。納入標(biāo)準(zhǔn)：1)所有病例西醫(yī)參照《現(xiàn)代腫瘤學(xué)》中食道癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)[9]，中醫(yī)證型參照王永炎主編的《中醫(yī)內(nèi)科學(xué)》(1999年上海科學(xué)技術(shù)出版社)[10]；2)年齡40～65歲，既往未經(jīng)中醫(yī)藥或者放化療治療；3)原發(fā)性食道癌，病理為食管鱗癌；4)所有患者簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：1)高齡患者，年齡>80歲；2)其他原發(fā)性惡性腫瘤轉(zhuǎn)移食道；3)合并心臟系統(tǒng)、內(nèi)分泌、血液系統(tǒng)、精神系統(tǒng)和肝腎疾病的患者。

表1　各證型間一般資料比較±s)

1.2研究方法

1.2.1細(xì)胞MTT測(cè)試(MTT)各個(gè)中醫(yī)證型的食道癌患者手術(shù)切除后，將新鮮的腫瘤組織塊無菌提取制備單細(xì)胞懸液，單細(xì)胞懸液的細(xì)胞濃度為1×106mL，注入96孔培養(yǎng)板中，以100 μL單細(xì)胞懸液加100 μL細(xì)胞培養(yǎng)液配比成200 μL的總量，設(shè)空白對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，并增加3行平行復(fù)孔，在飽和濕度為5%CO2、常溫為37 ℃的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。4 h后，除空白對(duì)照組外，實(shí)驗(yàn)組分別加入20 μL經(jīng)生理鹽水稀釋過的不同的化療藥物：DDP(順鉑，規(guī)格10 mg，批號(hào)：H37021358，廠家：齊魯制藥有限公司)4.0 μg/mL、5-FU(5-氟尿嘧啶，規(guī)格10 mL∶0.25 g，批號(hào)：H12020950，廠家：天津金耀氨基酸有限公司)40.0 μg/mL、紫杉醇(規(guī)格5 mL∶30 mg，批號(hào)：H20061276，廠家：海口市制藥廠有限公司)0.36 μg/mL、澤菲(規(guī)格10 mL∶0.25 g，批號(hào)：H20029195，廠家：江蘇亞邦愛普森藥業(yè)有限公司)20.0 μg/mL、伊立替康(規(guī)格5 mg，批號(hào)：H20061276，廠家：江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司)5.0 μg/mL。孵育48 h后，快速翻板棄上清，所有組別每孔均加入20 μL，5 g/L的MTT，孵育4 h，離心，丟棄上清液，加入100 μL二甲基亞砜終止液終止反應(yīng)，振蕩10 min，酶標(biāo)儀(型號(hào)：E2500型，廠家：美國BioRad公司)測(cè)定光密度值(OD值)，計(jì)算各個(gè)中醫(yī)證型中化療藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制率=(空白對(duì)照孔OD值-化療藥孔OD值)/空白對(duì)照孔OD值×100%。抑制率<30%為耐藥，抑制率>30%為敏感，且數(shù)值越大，敏感性越強(qiáng)。

1.2.2統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 17.0分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，計(jì)數(shù)資料采用非參數(shù)卡方等檢驗(yàn)。以P<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1各種藥物抑制率比較在用5種不同化療藥物分別對(duì)60例食管癌患者的食管癌細(xì)胞進(jìn)行體外抑制試驗(yàn)，結(jié)果顯示各藥物對(duì)癌細(xì)胞敏感度的基本情況為：紫杉醇>順鉑>5-氟尿嘧啶>伊立替康>澤菲。5種常用化療藥物對(duì)食管癌細(xì)胞抑制率經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表2　5種化療藥物體對(duì)食道癌細(xì)胞體外抑制率比較

2.2不同證型間抑制率比較痰瘀互結(jié)型食管癌細(xì)胞的抑制率從高到低依次為：紫杉醇>順鉑>5-氟尿嘧啶>伊立替康>澤菲；津虧熱結(jié)型食管癌細(xì)胞的抑制率從高到低依次為：紫杉醇>順鉑>伊立替康>5-氟尿嘧啶>澤菲；痰氣交阻型食管癌細(xì)胞的抑制率從高到低依次為：紫杉醇>順鉑>5-氟尿嘧啶>伊立替康>澤菲；氣陰兩虛型食管癌細(xì)胞的抑制率從高到低依次為：伊立替康>紫杉醇>順鉑>5-氟尿嘧啶>澤菲，各組間經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，痰瘀互結(jié)型、津虧熱結(jié)型和痰氣交阻型各組間經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。痰瘀互結(jié)型、津虧熱結(jié)型和痰氣交阻型的化療藥物敏感性均高于氣陰兩虛型(P<0.05)。見表3。

表3　5種化療藥物對(duì)不同證型食道癌細(xì)胞體外抑制率比較±s,%)

3　討論

食管癌按其臨床表現(xiàn)可將其歸類到中醫(yī)學(xué)“噎膈”的范疇。根據(jù)歷代醫(yī)家的相關(guān)理論及研究，噎膈的病因病機(jī)大致可歸結(jié)為[11]：七情所傷、臟腑虛損、飲食不節(jié)、濕毒內(nèi)蘊(yùn)、年老體弱，津液虧虛，痰瘀互結(jié)等。而在食管癌疾病的發(fā)展過程中，其病機(jī)癥候也各不相同。在疾病發(fā)生的早期，因“脾胃受傷，……，痰則塞而不通，氣則上而不下，”其正氣初衰，外邪實(shí)盛，故以痰氣交阻表現(xiàn)為主；隨著疾病進(jìn)一步發(fā)展，外邪入里，中傷陰精，“陰傷則精血枯涸；氣不行則噎嗝病于上，精血枯涸則燥結(jié)病于下”，久則瘀毒內(nèi)結(jié)，耗傷正氣，其病虛實(shí)夾雜，多表現(xiàn)為痰瘀互結(jié)、津虧熱結(jié)之相；而疾病進(jìn)入末期，病程日久，脾腎陽氣俱虛，氣血化生無源，無以御邪外出，多表現(xiàn)為氣血陰陽俱虛，故患者預(yù)后生存極差。本研究多方參考?xì)v代醫(yī)家理論經(jīng)驗(yàn)及現(xiàn)代學(xué)者的相關(guān)研究[12]，故將食管癌分為痰氣交阻、痰瘀互結(jié)、津虧熱結(jié)、氣陰兩虛4型[13]。

食道癌的生存率較低，僅10%～15%，其治療難點(diǎn)在于確診時(shí)幾乎都是屬于中晚期，早期患者病情較隱匿，容易被當(dāng)做輕癥治療。目前臨床上使用的化療藥物是療效較為認(rèn)可的新的細(xì)胞毒性藥物，如順鉑(DDP)、氟優(yōu)(5-氟尿嘧啶，5-FU)等迄今為止臨床上食道癌的標(biāo)準(zhǔn)化化療方案是DDP聯(lián)合5-FU，由于食道癌中腫瘤對(duì)化療藥物的敏感性存在差異，該方案有效率為20%～50%。尋找類似中醫(yī)的辨證論治，可以提前預(yù)測(cè)患者對(duì)化療藥物的敏感性，因人制宜的用藥將提高化療的療效，節(jié)約醫(yī)療資源。目前國內(nèi)外預(yù)測(cè)腫瘤細(xì)胞對(duì)化療藥物敏感性的方法有[14-16]：流式細(xì)胞儀法、MTT比色法等體外實(shí)驗(yàn)方式[17]，其中流式細(xì)胞儀法對(duì)操作人員和設(shè)備的要求較高，不利于推廣[18]；而MTT比色法簡(jiǎn)捷、經(jīng)濟(jì)便利、設(shè)備無放射污染等，有利于推廣應(yīng)用[19]。MTT比色法[20]是常用的檢測(cè)細(xì)胞活力的實(shí)驗(yàn)方法，常備應(yīng)用于腫瘤藥物篩選和敏感性測(cè)定的研究中，本研究采用此法研究結(jié)果顯示，在用5種不同化療藥物分別對(duì)60例食管癌患者的食管癌細(xì)胞進(jìn)行體外抑制試驗(yàn)，結(jié)果顯示各藥物對(duì)癌細(xì)胞敏感度的基本情況為：紫杉醇>順鉑>5-氟尿嘧啶>伊立替康>澤菲。5種常用化療藥物對(duì)食管癌細(xì)胞抑制率經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。與李少榮等[8]研究結(jié)果相似。

進(jìn)一步檢測(cè)分析發(fā)現(xiàn)，痰瘀互結(jié)型食管癌細(xì)胞的抑制率從高到低依次為：紫杉醇>順鉑>5-氟尿嘧啶>伊立替康>澤菲；津虧熱結(jié)型食管癌細(xì)胞的抑制率從高到低依次為：紫杉醇>順鉑>伊立替康>5-氟尿嘧啶>澤菲；痰氣交阻型食管癌細(xì)胞的抑制率從高到低依次為：紫杉醇>順鉑>5-氟尿嘧啶>伊立替康>澤菲；氣陰兩虛型食管癌細(xì)胞的抑制率從高到低依次為：伊立替康>紫杉醇>順鉑>5-氟尿嘧啶>澤菲，痰瘀互結(jié)型、津虧熱結(jié)型和痰氣交阻型各組間經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。痰瘀互結(jié)型、津虧熱結(jié)型和痰氣交阻型的化療藥物敏感性均高于氣陰兩虛型(P<0.05)，說明不同中醫(yī)證型食道癌對(duì)化療藥物敏感性存在差異。本研究中結(jié)果顯示氣陰兩虛型食道癌患者對(duì)化療藥物的抑制率均低于30%，即存在耐藥性。研究提示了不同中醫(yī)證型食道癌對(duì)化療藥物敏感性存在一定的相關(guān)性，臨床臨癥時(shí)應(yīng)該中西醫(yī)結(jié)合，辨證論治，為患者提供個(gè)性化的治療方案。

[1]Ge L，Mao L，Tian J H，et al.[Network meta-analysis on selecting Chinese medical injections in radiotherapy for esophageal cancer][J].Zhongguo Zhong Yao Za Zhi,2015,40(18):3674-3681.

[2]Kitaura A，Iwamoto T，Hamasaki S，et al.[Anesthetic Magagement of Emergency Thoracic Endovascular Aortic Repair Due to Massive Bleeding during Esophageal Cancer Operation][J].Masui,2016,65(2):157-159.

[3]Yegin E G，Duman D G.Staging of esophageal and gastric cancer in 2014[J].Minerva Med,2014,105(5):391-411.

[4]Kandioler D，Schoppmann S F，Zwrtek R，et al.The biomarker TP53 divides patients with neoadjuvantly treated esophageal cancer into 2 subgroups with markedly different outcomes.A p53 Research Group study[J].J Thorac Cardiovasc Surg,2014,148(5):2280-2286.

[5]He S，Liu Y，Liu X，et al.[Clinical characteristics of multiple primary cancer associated with esophageal squamous carcinoma][J].Zhonghua Yi Xue Za Zhi,2015,95(35):2868-2870.

[6]白海鵬，孫維敏，康娜.食道癌及其治療的研究進(jìn)展[J].包頭醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2014，30(3):134-136.

[7]Kimura M，Kuwabara Y，Ishiguro H，et al.Bypass Operation as Palliation for Unresectable Esophageal Cancer：Selection of Suitable Patients[J].Hepatogastroenterology,2015,62(140):794-796.

[8]李少榮，王軍靜.中醫(yī)辨證論治聯(lián)合化療治療晚期食道癌[J].吉林中醫(yī)藥,2016，31(3):267-270.

[9]湯釗猷.現(xiàn)代腫瘤學(xué)[M].3版.上海:復(fù)旦大學(xué)出版社,2011：877-890.

[10]陶毅強(qiáng).胸段食管癌的MDCT影像分期與病理分期及辨證分型的對(duì)照研究[D].福州：福建中醫(yī)學(xué)院,2007.

[11]鄔曉東.從痰瘀虛辨治食道癌的體會(huì)[J].光明中醫(yī),2014，29(11):2403-2404.

[12]杜樹輝.50例原發(fā)性食道癌中醫(yī)證候特點(diǎn)及演變規(guī)律分析[D].沈陽：遼寧中醫(yī)藥大學(xué),2013.

[13]顧恪波，王遜，何立麗，等.孫桂芝教授診療食道癌經(jīng)驗(yàn)探析[J].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2012，14(11):44-46.

[14]Shi L，Zhong D，Gu C，et al.[Celecoxib antagonizes the cytotoxic effect of carboplatin in human esophageal cancer cells][J].Nan Fang Yi Ke Da Xue Xue Bao,2014,34(6):792-797.

[15]周芬，梅恒，吳秋玲，等.磷酸化組蛋白表達(dá)與K562/A02細(xì)胞株多藥耐藥的關(guān)系[Z].中國湖北武漢:20091.

[16]肖艷，李俊東，史泓瀏，等.MTT法體外藥敏實(shí)驗(yàn)預(yù)測(cè)宮頸癌細(xì)胞藥物敏感性的初步探討[J].癌癥,2007，22(4):386-389.

[17]Motoori M，Yano M，Tomita Y，et al.Tissue factor predicts response to chemotherapy in esophageal cancer[J].J Surg Res,2014,191(1):99-105.

[18]楊國棟，張曉英，馮志松，等.N一異哇琳-3-按酸一L一亮氨酸節(jié)醋抗人食道癌作用的研究[J].中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué),2014，19(8):877-881.

[19]顧勇，盛思源，馬俊，等.PAK1和LEF1對(duì)食道癌細(xì)胞增殖的影響[J].中國病理生理雜志,2015，31(8):1427-1431.

[20]張翠，孫曉波，宋愛榮，等.Eu-苦瓜多糖復(fù)合物的合成、抑制食道癌細(xì)胞增殖及與DNA相互作用[J].食品科學(xué),2013，34(17):327-332.

(2016-06-20收稿責(zé)任編輯：徐穎)

Correlation Analysis of the Sensitivity to Chemotherapy Drugs among Different TCM Syndrome Patients with Esophageal Cancer

Xin Wei,Zhou Yongfeng,Zhang Fan

(Thoracic Surgery of Baoji City Chinese Medicine Hospital, Baoji 721000, China)

Objective:To analyze the correlation between different TCM syndromes of patients with esophageal cancer and chemotherapy drug sensitivity.Methods:A total of 60 cases of patients with esophageal squamous cell carcinoma in March 2013 to April 2016 in our hospital were diagnosed by gastroscope pathological biopsy.Through the syndrome differentiation，the patients were divided into 19 cases of combined phlegm and stasis syndrome 17 cases of deficiency of both qi and yin，13 cases of fluid consumption and heat accumulation and 11 cases of combined phlegm and qi.Their ages were between 40 to 60，with average age(47.6±6.8 years)，including 37 male patients，and 23 female patients.In vitro tumor tissue cell fluid was obtained by fresh tissue of surgical resection of esophageal carcinoma patients and mixed with different concentrations of Paclitaxel>CDDP 5-FU irinotecan，gemcitabine chemotherapy drugs.Inhibitory rate of chemotherapy drugs on tumor cells in various TCM Syndrome Types were detected with MTT test.Results:In the inhibition test of the five different chemotherapy drugs，it was found that the cancer cell sensitivity of the drugs was Paclitaxel>CDDP>5-FU>irinotecan>gemcitabine.Among the groups，there were no significant differences among the combined phlegm and stasis group，fluid consumption and heat accumulation and combined phlegm and qi group.But the drug sensitivity of phlegm and blood stasis，deficiency of fluid thermal junction and gas exchange resistance group was significantly higher than that of deficiency of both qi and yin group(P<0.05).Conclusion:There is positive correlation between different TCM syndromes of esophageal cancer and chemotherapy drug sensitivity，the drug tolerance in deficiency of both qi and yin syndrome.

TCM syndrome； Esophageal cancer； Chemotherapy drug sensitivity； Correlation

陜西省衛(wèi)生廳科研基金中標(biāo)項(xiàng)目(編號(hào)：2010H27)

辛偉(1979.03—)，男，碩士研究生，主治醫(yī)師，研究方向：胸外科疾病，E-mail：xinweidoctor@126.com

R241

A doi：10.3969/j.issn.1673-7202.2016.09.070