AA3型連續流動分析儀測定山楂酒中總酚含量

張文葉，張磊，李小娟，吳慶偉，吳剛

（鄭州輕工業學院食品與生物工程學院，河南鄭州450001）

AA3型連續流動分析儀測定山楂酒中總酚含量

張文葉，張磊，李小娟，吳慶偉，吳剛

（鄭州輕工業學院食品與生物工程學院，河南鄭州450001）

采用AA3連續流動分析儀測定山楂酒中總酚含量。結果表明：標準曲線在0～500mg/L范圍內有很好的線性關系（R2=0.999 9），精密度和準確度高，回收率在100％～110％之間，操作簡便易行，能夠滿足對山楂酒中總酚含量進行定量分析。

連續流動分析儀；山楂酒；總酚

植物多酚是天然食物中存在的一大類植物化合物的總稱，具有較強的抗氧化作用，同時具有抗腫瘤、防治心血管疾病、降血壓、降血糖、抑菌抗病毒、預防泌尿系統感染、抗齲齒護齒及防紫外線照射等藥理作用［1-3］。山楂中含有豐富的多酚類物質，Thomas等［4］在中國山楂果實中發現了40多種酚類化合物；而山楂酒中總酚含量與酒的抗氧化性呈正相關［5］。常用的測定總酚的方法一般為分光光度計法［6-7］，但是此法試劑配制、樣品處理繁瑣，消耗時間，不適合大量樣品進樣。

AA3型連續流動分析儀是一種現代化化學分析儀，近年來發展迅速。經典的連續流動分析儀一般由自動進樣器、高精度蠕動泵、化學分析模塊、比色計和數據處理系統組成。可以實現從取樣到得出檢測結果的全自動化操作，大大簡化了分析作業，同時也減少了人為誤差，具有操作簡便、分析速度快、重現性好和應用廣泛等特點［8］。目前報道的有夏穎毅等［9］應用AA3連續流動分析儀測定地表水中揮發酚含量；黃小紅等［10］應用AA3連續流動分析儀測定地表水中總氮含量；張桃英等應用［11］AA3連續流動分析儀測定水中硫化物的方法研究。

本文初次應用AA3連續流動分析儀測定山楂酒中總酚含量，以期為山楂的開發利用及其研究提供理論參考。

1　材料與方法

1.1儀器與設備

AA3型連續流動分析儀：德國SEAL，配置有多酚反應模塊，自動進樣器，蠕動泵，比色計等，含AACE操作軟件。

1.2主要試劑

鐵氰化鉀（AR）：天津市永大化學試劑有限公司；4-氨基安替比林（AR）：國藥集團化學試劑有限公司；沒食子酸（AR）：天津市光復精細化工研究所；氨水（25％～28％）：煙臺市雙雙化工有限公司；Brij-35（22％）：德國SEAL。

1.2.1試劑配制

1.0％鐵氰化鉀溶液：精確稱取5 g鐵氰化鉀于500mL燒杯中，然后用400mL超純水溶解，轉移至500mL容量瓶中，用超純水定容至刻度（加入0.5mL Brij-35）；1.0％4-氨基安替比林溶液：精確稱取5 g4-氨基安替比林于500mL燒杯中，然后用400mL超純水溶解，轉移至500mL容量瓶中，用超純水定容至刻度；20％氨水溶液：準確量取330mL氨水于500mL容量瓶中，然后加入100mL超純水混勻，最后定容至刻度（加入0.5mLBrij-35）。

1.3試驗原理［8］

樣品中的多酚物質在堿性條件下與鐵氰化鉀和4-氨基安替比林反應生成一種橙紅色化合物，并且流入比色池，在510 nm波長下檢測，結果由儀器軟件分析處理。儀器工作原理由圖1所示。

圖1　總酚測定流程圖Fig.1 Flow chartof totalpolyphenolsdeterm ination

1.4測定參數

取樣速率50個/h；進樣與清洗時間比：3∶2；基線：5.0％；主峰：75％；平滑：40；增益：35。

1.5試驗步驟與方法

1.5.1標準曲線配制

準確配制5 g/L的沒食子酸標準儲備液，然后分別移取0、2、4、6、8、10mL于100mL容量瓶中，用超純水定容至100mL，標準系列濃度分別為：0、100、200、300、400、500mg/L，然后用AA3連續流動分析儀上樣分析。

對不同批次的山楂酒酒樣進行分析，上樣分析前樣品經0.45μm的濾膜過濾，然后用超純水稀釋2倍～3倍，使待測樣品中總酚含量在0～500mg/L范圍內。

1.5.3儀器操作步驟

壓好所用管路后，蓋上泵壓盤，依次打開檢測器、蠕動泵、進樣器、電腦等開關，先將各試劑管放入超純水中，打開AACE6.10聯機軟件運行系統，待基線穩定后，將各管路放入對應的試劑中等待基線再次穩定。基線穩定后設置增益，然后運行系統對標準曲線及樣品進行上樣分析。樣品依次進入進樣器、蠕動泵、多酚分析模塊、比色計、數據處理系統。全程使用AACE 6.10軟件系統控制。

2　結果與分析

2.1標準曲線

上述試驗條件下，配制的標準濃度系列（mg/L）與其信號值（峰高）具有良好的線性關系，回歸方程y= 0.136x+0.189，相關系數R2=0.999 9，標準曲線見圖2。

圖2　總酚測定標準曲線Fig.2 Standard curve for determ ination of totalpolyphenols

2.2精密度測定

對同一山楂酒樣進行測定，平行測定6次，結果見表1。

表1　精密度測定結果Table1 Resultsof precision determ ination

由表1可知，平行6次的結果標準偏差為3.82mg/L，相對標準偏差為1.39％，說明該方法有良好的精密度。

2.3準確度測定

準確配制一定濃度的標準樣品，然后連續進樣6次，結果見表2。

由表2可知，標樣總含量為250mg/L，儀器測定平均值為255.76mg/L，相對誤差為2.30％，說明該方法具有較高的準確度。

2.4加標回收率測定

取已知濃度的山楂酒樣，平均分成6份，分別加入一定量的沒食子酸標準溶液，然后按照上述方法測定其回收率。結果見表3。

由表3可知，該方法的回收率在100％～110％之間，平均回收率為106.43％，能夠滿足山楂酒中總酚含量的測定。

2.5山楂酒中總酚含量的測定

根據上述方法測定不同批次的山楂酒樣，結果如表4所示。

表4　山楂酒中總酚含量Table4 Contentsof totalpolyphenols in haw thorn wine

由表4可知，測定的不同批次的山楂酒樣中總酚含量在643.46mg/L～830.88mg/L之間。

3　結論

采用AA3連續流動分析儀測定山楂酒中總酚含量，標準曲線在0～500mg/L范圍內具有較好的線性關系（R2=0.999 9），精密度和準確度高，回收率在100％～110％之間，操作簡便易行，適合大批量上樣，能夠滿足對山楂酒中總酚含量進行定量分析。

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［8］唐春暉，王文浩.Seal-AA3型連續流動分析儀測定水中揮發酚的方法探討［J］.科技論文與案例交流，2015（5）：49-52

［9］夏穎毅，周軍，蔣蕾蕾.AA3連續流動分析儀測定地表水中揮發酚的方法探討［J］.現代科學儀器，2008（1）：82-84

［10］黃小紅，別娜娜，周圣東.連續流動分析儀測定地表水中的總氮［J］.分析儀器，2010（4）：36-38

［11］張桃英，崔悅，曹冬.AA3型連續流動分析儀測定水中硫化物的方法研究［J］.中國衛生檢驗雜志，2013，23（5）：1115-1117

Determ ination of Total Polyphenols in Haw thorn W ine by AA3 Continuous Flow Injection Analysis Instrument

ZHANG Wen-ye，ZHANG Lei，LI Xiao-juan，WU Qing-wei，WU Gang
（College of Food and Bioengineering，Zhengzhou University of Light Industry，Zhengzhou 450001，Henan，China）

Based on AA3 continuous flow injection analysis instrument，the content of total polyphenols in hawthornwine was determined.The results suggested that the standard curve showed good linearity in the range of0-500mg/L（R2=0.999 9）.The method had highly accuracy and precision，and recovery ranged from 100％ to 110％，sample operation，it could meet the quantitative analysis of total polyphenols content in hawthorn wine.

continuousflow injectionanalysisinstrument；hawthornwine；totalpolyphenols

10.3969/j.issn.1005-6521.2016.18.029

研究生科技創新基金項目（2014029）；河南省科技攻關項目（142102110061）

張文葉（1965—），女（漢），教授，碩士，研究方向：食品生物技術。

2015-10-23