九龍蟲散對慢性支氣管炎大鼠模型氧自由基及內皮素-1的影響

胡小杰 潘朝旺

鄂州職業大學醫學院，湖北 鄂州 436000

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九龍蟲散對慢性支氣管炎大鼠模型氧自由基及內皮素-1的影響

胡小杰 潘朝旺

鄂州職業大學醫學院，湖北 鄂州 436000

目的：觀察九龍蟲對脂多糖煙霧誘導慢性支氣管炎模型大鼠超氧自由基和內皮素-1(ET-1)的影響。方法：取雄性SD大鼠60只，用脂多糖煙霧誘導法復制慢性支氣管炎模型，經給藥治療后，測定血清和肺組織中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和內皮素-1(ET-1)含量。結果：與正常組比較，模型組血清和肺組織SOD水平降低(P<0.01)，MDA和ET-1含量升高(P<0.01)；各給藥組與模型組比較，以上指標均有改善(P<0.05或P<0.01)。結論：九龍蟲具有抗慢性支氣管炎作用，其機制可能與調節SOD、MDA和ET-1水平有關。

九龍蟲；慢性支氣管炎；超氧化物歧化酶；丙二醛；內皮素-1

慢性支氣管炎是臨床上一種常見病和多發病，以咳嗽、咳痰或伴有氣喘等反復發作為主要癥狀。本實驗擬通過在研究九龍蟲對慢性支氣管炎模型大鼠血清和肺組織SOD、MDA和ET-1的影響，探討其抗慢性支氣管炎作用機制。

1 儀器與材料

1.1 動物 清潔級雄性SD大鼠，體重(200±20)g，由成都達碩實驗動物研究中心提供，許可證號:SCXK(川2013-24)。

1.2 藥物與試劑 九龍蟲散(本院自制，用前配成混懸液)； SOD(批號：20160115)、ET-1(批號：20151223)等試劑盒購自南京建成生物工程研究所；桂龍咳喘寧膠囊(批號：20160106，桂龍藥業(安徽)有限公司)。

1.3 儀器 PT-MR3100D組織勻漿機(瑞士Polytron公司)；Z160M微量高速離心機(德國HERMLE)；臺式冷凍離心機(上海安亭科學儀器公司)； UV754紫外可見分光光度計(上海佑科儀器儀表有限公司)。

2 方法

2.1 動物造模及分組給藥 隨機抽10只大鼠，為正常組。其余54只參照文獻[1]建立脂多糖煙霧誘導慢性支氣管大鼠模型：實驗第1、14天將大鼠麻醉，固定，將0.1%脂多糖200μL用靜脈導管針套管快速注入氣管；從第2天開始，將大鼠分置在自制的2個煙室中，煙室大小為100cm×60cm×40cm，每個煙室放置27只大鼠，用硫磺1.5 g及煙葉、刨花、鋸末各10g混勻，點燃熏煙，每天2次，每次1h，持續到第28天(第14天除外)，第29天，將造模大鼠隨機抽取4只，取肺組織切片，觀察造模是否成功。正常組在無煙環境中正常飼養。將以上造模成功的大鼠混合并隨機分為5組，即模型組、陽性對照組、九龍蟲高、中、低劑量組，加上正常組共6組，正常組及模型組給予生理鹽水15mL/kg·d，陽性對照組給予桂龍咳喘寧膠囊混懸液0.75g/kg·d，九龍蟲高、中、低劑量組分別給予九龍蟲混懸液0.04、0.02、0.01g/kg·d，連續給藥15d。

2.2 觀察指標

2.2.1 血清SOD、MDA和ET-1的測定 末次給藥24h后，將大鼠斷頭取血約8mL，3000 r/min離心15min，制備血清，按試劑盒說明測定血清中SOD、MDA和ET-1含量。

2.2.2 肺組織SOD、MDA和ET-1的測定 大鼠處死后，在右肺中葉距離肺門1/3取肺組織約0.5g，用4℃生理鹽水漂洗，吸濕，稱重，剪碎，加入預冷的9倍生理鹽水，用組織勻漿機制成10%的肺組織勻漿。3000 r/min離心15min，按試劑盒說明測定SOD、MDA和ET-1含量。

3 結果

3.1 對血清SOD、MDA和ET-1的影響 與正常組比較，模型組血清SOD水平降低(P<0.01)，MDA和ET-1含量升高(P<0.01)；各給藥組與模型組比較，SOD水平升高(P<0.05或P<0.01)，MDA和ET-1含量明顯降低(P<0.05或P<0.01)。見表1。

表1 九龍蟲對慢性支氣管炎大鼠血清SOD、MDA、ET-1的影響

組別劑量/g/kg動物數量/只SOD/U/mLMDA/nmol/mLET-1/pg/mL正常組蒸餾水10 69.4±11.7**6.53±1.15**64.75±10.22**模型組蒸餾水743.5±6.4 8.78±1.50 119.86±18.23 陽性對照組0.759 60.1±10.0**6.62±1.13**75.15±12.03**九龍蟲高劑量組0.049 68.5±11.2**62.1±9.3** 6.56±1.03**九龍蟲中劑量組0.028 6.63±1.20**75.54±12.32**82.32±14.38**九龍蟲低劑量組0.01854.6±9.4*6.94±1.45* 95.63±16.24*

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01。

3.2 對肺組織SOD、MDA和ET-1的影響 與正常組比較，模型組肺組織SOD水平明顯降低(P<0.01)，MDA和ET-1含量明顯升高(P<0.01)；各給藥組與模型組比較，SOD水平明顯升高(P<0.05或P<0.01)，MDA和ET-1含量明顯降低(P<0.05或P<0.01)。見表2。

表2 九龍蟲對慢性支氣管炎大鼠肺組織勻漿SOD、MDA、ET-1的影響 ±s)

注：與模型組比較，*P<0.05，**P<0.01。

4 討論

研究表明[3]，氧化應激可引起和促進氣道中多種炎癥介質的產生，從而導致慢性支氣管炎。SOD是一種清除體內氧自由基的重要酶，是機體抵抗氧化損傷的保護屏障之一，可以保護呼吸道細胞免受氧化損傷，減少炎癥介質的產生，從而維持細胞內環境的穩定，具有非常重要的意義。MDA作為機體細胞脂質過氧化反應的一種產物，其含量越高表示機體氧化損傷程度越大，炎癥介質的產生就會越多，容易引起和加重慢性支氣管炎的病情。研究結果顯示，九龍蟲可有效提高慢性支氣管炎大鼠血清和肺組織SOD水平，而降低MDA含量。(P<0.05)。

ET-1是目前發現最強的縮血管物質，是由內皮細胞合成內源性肽類物質，可引起肺血管收縮、支氣管收縮以及氣道和肺血管平滑肌增生，并且上調炎癥反應，在慢性支氣管炎的發生發展中起著重要作用。實驗結果顯示，九龍蟲可有效降低慢性支氣管炎大鼠血清和肺組織ET-1含量(P<0.05)。

綜上所述，九龍蟲具有抗慢性支氣管炎的作用，其機制可能與提高機體血清和肺組織SOD水平，降低MDA和ET-1含量有關。

[1]張良芝，謝文英，常學輝.愛羅咳喘寧口服液對慢性支氣管炎大鼠模型LTB4、IL-8 表達的影響[J].中醫學報，2014，29(19)：1267-1268．

[2]王勤，鄧家剛，楊柯，等. 芒果苷對慢性支氣管炎大鼠炎癥因子及小鼠巨噬細胞環氧化酶-2表達的影響[J].中國中藥雜志，2011，36(10)：1348-1352．

[3]MENG Y，YU C，LI T，et al. Expression and significance of Toll-like receptor-4 in rats lung established by passive smoking orassociated with intratracheal instillation of lipopolysaccharide[J]. Chin Med J，2013，93(28)：2230-2234.

(編輯：梁志慶)

2016-07-20

湖北省教育廳科學技術研究項目(B2016537)。

胡小杰(1981-)，男，講師，主要從事醫學教學與研究。

R285.5

A

1007-8517(2016)20-0016-02