鹽酸決奈達隆片仿制藥與原研藥的溶出度一致性評價

趙 欣，陳國華，吳瓊珠，滕海堂，郁婷婷（.中國藥科大學藥學院，南京 0009；.淮安市食品藥品檢驗所，江蘇淮安 300）

鹽酸決奈達隆片仿制藥與原研藥的溶出度一致性評價

趙 欣1＊，陳國華1#，吳瓊珠1，滕海堂2，郁婷婷1（1.中國藥科大學藥學院，南京 210009；2.淮安市食品藥品檢驗所，江蘇淮安 223001）

目的：建立鹽酸決奈達隆片的溶出度測定方法，并評價仿制藥與原研藥的質量一致性。方法：采用紫外-可見分光光度法，檢測波長為288 nm。以磷酸鹽緩沖液（pH4.5）、0.1 mol/L鹽酸溶液［加入0.5%十二烷基硫酸鈉（SDS）］、磷酸鹽緩沖液（pH6.8，加入0.5%SDS）、水為溶出介質，溶出介質體積為1 000 ml，轉速為75 r/min，分別考察鹽酸決奈達隆片仿制藥與原研藥的溶出度，并通過計算相似因子（f2）來評價其溶出曲線的相似性。結果：鹽酸決奈達隆檢測質量濃度線性范圍為2.147～25.764 μg/ml；精密度、穩定性、重復性試驗的RSD＜2.0%；4種溶出介質中的回收率分別為99.53%～101.05%（RSD=0.48%，n=9）、98.95%～100.05%（RSD=0.39%，n=9）、99.54%～100.20%（RSD=0.24%，n=9）、98.54%～100.06%（RSD=0.44%，n=9）。在4種溶出介質中，3批鹽酸決奈達隆片仿制藥與原研藥溶出曲線的f2分別為56、60、63、68，68、52、59、67，65、68、76、62。結論：該方法適用于鹽酸決奈達隆片的溶出度測定；鹽酸決奈達隆片仿制藥與原研藥的體外溶出曲線具有相似性，故其質量一致性較好。

鹽酸決奈達隆片；原研藥；仿制藥；溶出曲線；相似因子；多介質；一致性評價

鹽酸決奈達隆（Dronedarone hydrochloride）是一種新型的抗心律失常藥物，主要用于心房顫動、心房撲動、竇性心律、室性心律的治療［1-2］，由法國賽諾菲-安萬特公司研制，并分別于2009年7月和12月獲得美國食品與藥品安全管理局（FDA）和歐洲藥品評價局（EMEA）批準上市。其化學結構是苯并呋喃衍生物，與治療房顫的胺碘酮藥物相似，為鉀離子通道阻滯藥，但降低了其親脂性還減小了碘源性的器官毒性［3-4］。

溶出度系指藥物從片劑或膠囊劑等固體制劑在規定溶劑中溶出的速度和程度［5］，不僅是控制藥物質量的體外指標，也是評價藥物在體內釋放和吸收的有效手段［6］。仿制藥與原研藥質量的差異主要體現在體外溶出度和體內生物等效性上，這兩方面都直接關系藥品的等效性［7］。目前國內發表的文獻中，大多都是關于鹽酸決奈達隆片在1種溶出介質中溶出曲線的測定及溶出方法的研究，美國藥典（USP 39-NF 34）也只規定了其在磷酸鹽緩沖液（pH4.5）中的溶出方法，而我國食品藥品監督管理總局（CFDA）評價口服固體制劑內在質量需要考察多種pH溶出介質中的溶出曲線。因此，本文參照鹽酸決奈達隆片USP標準，建立其溶出度測定方法，考察鹽酸決奈達隆片在4種不同溶出介質中的溶出行為，并與原研藥進行溶出曲線的對比，采用FDA推薦的相似因子（f2）對其進行相似性評價，為鹽酸決奈達隆仿制藥的質量一致性評價工作提供參考。

1 材料

1.1 儀器

UV-1800型紫外-可見分光光度計（日本Shimadzu公司）；8453型紫外-可見分光光度計（美國Agilent公司）；RC8MD型溶出試驗儀（天津市天大天發科技有限公司）；BT-1250D型電子天平（德國Sartorius公司）。

1.2 藥品與試劑

鹽酸決奈達隆片（中國藥科大學藥物制劑教研室自制，編號：S1、S2、S3，規格：400 mg/片）；鹽酸決奈達隆片原研藥（法國Sanofi-Aventis公司，批號：GJ092，規格：400 mg/片）；鹽酸決奈達隆對照品（美國藥典委員會，批號：F029Q0，純度：99.4%）；鹽酸決奈達隆原料藥（中國藥科大學藥物化學教研室自制，編號：150401，純度：99.0%）；其余試劑均為分析純，水為超純水。

2 方法與結果

2.1 溶液的制備

2.1.1 對照品溶液 精密稱取鹽酸決奈達隆對照品約21.3 mg，置于50 ml量瓶中，加入1 ml甲醇使其溶解，分別用0.1 mol/L鹽酸溶液（加入0.5%SDS）、磷酸鹽緩沖液（pH4.5）、磷酸鹽緩沖液（pH6.8，加入0.5%SDS）、水這4種溶出介質定容，搖勻，精密量取1 ml，置于20 ml量瓶中，用相應的溶出介質定容，搖勻，作為對照品溶液。

2.1.2 供試品溶液 取樣品原研藥（批號：GJ092）12片，取0.1 mol/L鹽酸溶液（加入0.5%SDS）、磷酸鹽緩沖液（pH4.5）、磷酸鹽緩沖液（pH6.8，加入0.5%SDS）、水4種溶出介質各1 000 ml，按溶出度測定法［2015年版《中國藥典》（四部）0931通則第二法（漿法）］進行溶出度試驗，轉速為75 r/min，溫度為37.0℃，分別于10、15、20、30、45、60、90、120 min時取溶出液10 ml，并即時在溶出杯中補充37℃溶出介質10 ml，用0.45 μm微孔濾膜濾過，精密量取續濾液適量，用甲醇稀釋20倍，搖勻，作為供試品溶液。

2.2 4種溶出介質的選擇

目前，鹽酸決奈達隆已被收入USP標準，其在USP標準中溶出度測定方法為漿法，75 r/min，標準溶出介質為1 000 ml的磷酸鹽緩沖液（pH4.5）。本品規格為400 mg/片且為異形片，參考鹽酸決奈達隆片USP標準和相關文獻［6］，故擬采用漿法和溶出體積1 000 ml進行溶出度試驗。

由于鹽酸決奈達隆為低溶解高滲透藥物，屬于BCSⅡ類，其解離常數（pKa）為9.8，為弱堿性藥物，因此根據相關文獻報道［6-8］，推薦溶出介質為：0.1 mol/L鹽酸溶液、磷酸鹽緩沖液（pH6.8）、磷酸鹽緩沖液（pH4.5）和水。在（37.0±0.5）℃下，用以上4種介質作為溶劑，制備鹽酸決奈達隆飽和溶液，經適當稀釋后，用紫外-可見分光光度法在288 nm波長處測定其吸光度，計算鹽酸決奈達隆在4種介質中的溶解度，進而考察是否達到漏槽條件，結果見表1。取樣品原研藥（批號：GJ092）適量，分別采用上述4種溶出介質，依法測定，計算各時間點的累積溶出度并繪制溶出曲線，詳見圖1。

結合表1和圖1可知，樣品原研藥在磷酸鹽緩沖液（pH4.5）和水中具有較好的溶解度，均達到漏槽條件，可以直接作為與仿制藥進行溶出比較的溶出介質，但在0.1 mol/L鹽酸溶液和磷酸鹽緩沖液（pH6.8）中溶出率很低，無法區分各制劑的質量，故需加入表面活性劑來提高溶出度。因此，首先篩選吐溫80和十二烷基硫酸鈉（SDS）來確定表面活性劑的種類，然后再進行表面活性劑用量的篩選。

表1 鹽酸決奈達隆溶解度Tab 1 The solubility of Dronedarone hydrochloride

圖1 樣品原研藥在不同溶出介質中的溶出曲線Fig 1 Dissolution curves of original preparation samples in different dissolution media

《普通口服固體制劑溶出曲線測定與比較指導原則》中規定表面活性劑濃度推薦在0.01%～1.0%（W/V）范圍，故本試驗選擇中間濃度0.5%來篩選表面活性劑的種類。取樣品原研藥（批號：GJ092）適量，分別采用加入0.5%SDS和0.5%吐溫80的0.1 mol/L鹽酸溶液作為溶出介質，依法測定，計算各時間點的累積溶出度并繪制溶出曲線。另取加入0.5%SDS和0.5%吐溫80的磷酸鹽緩沖液（pH6.8）同法進行測定，詳見圖2。

圖2 不同種類表面活性劑的溶出曲線A.0.1 mol/L鹽酸溶液；B.磷酸鹽緩沖液（pH6.8）Fig 2 Dissolution curves of different kinds of surfactantsA.0.1 mol/L Hydrochloric acid solution；B.Phosphate buffer solution（pH6.8）

由圖2可知，樣品原研藥在加入表面活性劑SDS介質中的溶出速率明顯高于加入吐溫80的介質，而且吐溫80為黏稠液體，不宜操作，加之易造成各樣品間質量差異較大，故選擇加入表面活性劑SDS。

表面活性劑SDS常規用量范圍為0.01%～1.0%（W/V），故用量篩選從低濃度到高濃度依次遞增。取樣品（編號：S1）適量，分別采用0.01%、0.05%、0.1%、0.3%、0.5%、1.0%SDS的0.1 mol/L鹽酸溶液和磷酸鹽緩沖液（pH6.8）作為溶劑，進行溶解度測定，結果見表2。

表2 鹽酸決奈達隆在不同濃度SDS介質中的溶解度（mg/ml）Tab 2 The solubility of dronedarone hydrochloride in the different concentration of SDS（mg/ml）

由表2可知，加入0.5%SDS和1.0%SDS的2種介質均達到了漏槽條件，但1.0%SDS比0.5%SDS溶液的黏度大，且由于表面活性劑用量越少越好，故最終選擇加入0.5%SDS。

綜上所述，樣品的4種溶出介質為：0.1 mol/L鹽酸溶液（加入0.5%SDS）、磷酸鹽緩沖液（pH4.5）、磷酸鹽緩沖液（pH6.8，加入0.5%SDS）和水。

2.3 線性關系考察

精密稱取鹽酸決奈達隆對照品（批號：F029Q0）適量，共4份，先用1 ml甲醇溶解，再分別用0.1 mol/L鹽酸溶液（加入0.5%SDS）、磷酸鹽緩沖液（pH4.5）、磷酸鹽緩沖液（pH6.8，加入0.5%SDS）、水定容于50 ml量瓶中，制備質量濃度為0.426 mg/ml的對照品貯備液，然后精密移取上述貯備液0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 ml，分別置于20 ml量瓶中，并用相應的溶出介質定容，搖勻，按紫外-可見分光光度法在288 nm波長處測定吸光度。以鹽酸決奈達隆質量濃度（x，μg/ml）為橫坐標、吸光度（y）為縱坐標進行線性回歸，回歸方程與線性范圍見表3。

表3 回歸方程與線性范圍Tab 3 Regression equations and linear ranges

2.4 精密度試驗

取“2.1.1”項下對照品溶液適量，按紫外-可見分光光度法在288 nm波長處重復測定6次。結果，鹽酸決奈達隆吸光度的RSD分別為0.84%、0.36%、0.21%、0.62%（n=6），表明儀器精密度良好。

2.5 穩定性試驗

取“2.1.2”項下4種介質中120 min時的供試品溶液適量，分別于室溫下放置0、2、4、6、8 h時在288 nm波長處測定其吸光度。結果，鹽酸決奈達隆吸光度的RSD分別為0.78%、0.82%、0.70%、0.91%（n=5），表明供試品溶液在4種介質中室溫下8 h內穩定性良好。

2.6 重復性試驗

取樣品原研藥（批號：GJ092）適量，按“2.1.2”項下方法制備供試品溶液，按紫外-可見分光光度法在288 nm波長處測定其吸光度。結果，鹽酸決奈達隆吸光度的RSD分別為0.98%、0.59%、0.71%、0.81%（n=6），表明本方法重復性良好。

2.7 回收率試驗

取樣品原料藥（編號：150401）約3.41、4.26、5.11 g（分別約為處方量的8、10、12倍），精密稱定，分別置于3個研缽中，再分別加入空白輔料2.24 g（約為處方量的10倍），混勻；分別從3個研缽中精密稱取細粉各3份，再分別置于50 ml量瓶中，按“2.1.2”項下方法制備供試品溶液，取上述供試品溶液適量，按紫外-可見分光光度法在288 nm波長處測定吸光度并計算回收率，結果見表4。

表4 回收率試驗結果（n=9）Tab 4 Results of recovery tests（n=9）

2.8 溶出曲線的繪制

取3批樣品（編號：S1、S2、S3）和1批原研藥（批號：GJ092）各12片，取“2.2”項下4種溶出介質適量，分別按“2.1.2”項下方法制備供試品溶液［磷酸鹽緩沖液（pH6.8，加入0.5%SDS）中，取樣時間點延長至360 min］；取上述供試品溶液和“2.1.1”項下對照品溶液各適量，按紫外-可見光分光光度法在288 nm波長下分別測定吸光度并計算各時間點的累積溶出度，繪制溶出曲線，詳見圖3。

2.9 溶出曲線相似性評價

以美國和日本規定采用的f2法來評價仿制藥與原研藥體外溶出曲線的相似性，以考察制劑其內在質量的差異。f2計算公式如下：

圖3 鹽酸決奈達隆仿制藥與原研藥在4種溶出介質中的溶出曲線A.磷酸鹽緩沖液（pH4.5）；B.水；C.0.1 mol/L鹽酸溶液（加入0.5% SDS）；D.磷酸鹽緩沖液（pH6.8，加入0.5%SDS）Fig 3 Dissolution curves of generic and original preparations of Dronedarone hydrochloride tablet in 4 dissolution mediaA.Phosphate buffer solution（pH4.5）；B.water；C.0.1 mol/L Hydrochloric acid solution（adding into 0.5%SDS）；D.Phosphate buffer solution（pH6.8，adding into 0.5%SDS）

其中，n為取樣時間點個數；Rt為原研藥在t時刻的溶出度值；Tt為仿制藥在t時刻的溶出度值；f2取值在1～100之間。f2值計算規定，原研藥和仿制藥在15 min內溶出達到85%時，不用再計算f2值，可直接認為兩種制劑溶出行為相似。一般情況下，f2≥50時，可認為兩條曲線具有相似性，仿制藥與原研藥具有等效性［9］。仿制藥與原研藥在不同溶出介質中的溶出曲線f2測定結果見表5。由表5可知，樣品仿制藥與原研藥在4種溶出介質中的溶出行為相似。

表5 4種溶出介質下的f2相似因子Tab 5 The f2factors in 4 dissolution media

3 討論

3.1 波長的選擇

鹽酸決奈達隆在溶出介質中的最大紫外吸收分別為210 nm和288 nm波長，由于在288 nm波長處輔料無吸收，干擾小，因此本試驗選擇288 nm作為溶出度檢測波長。

3.2 轉速的選擇

漿法常用的轉速為50、75 r/min［10］。為了確定最佳轉速，本試驗需對比鹽酸決奈達隆片在這兩種轉速條件下的溶出曲線。結果表明，在兩種轉速條件下鹽酸決奈達隆片的溶出行為基本一致，而在75 r/min條件下，樣品的溶出速率高于50 r/min條件下的溶出速率；且同時參考鹽酸決奈達隆片USP標準中溶出度測定方法，故本試驗溶出度試驗的轉速選擇75 r/min。

3.3 仿制藥與原研藥的質量一致性

在多種pH溶出介質中溶出曲線的測定是先進國家藥物審評機構評價口服固體制劑內在質量的一種重要手段［6］，我國也于2012年開始實施“仿制藥質量一致性評價”工程［11］。考察多種溶出介質條件下溶出行為，可以更全面、真實反映藥物的體外釋藥情況和內在質量［12］。本試驗以3個編號的鹽酸決奈達隆片仿制藥與1個批號的原研藥分別在4種溶出介質中進行溶出度試驗并繪制溶出曲線。結果發現，兩種制劑在4種溶出介質中的溶出曲線均具有相似性，說明鹽酸決奈達隆片仿制藥與原研藥質量一致性較好。

3.4 表面活性劑的篩選

通過溶解度試驗和鹽酸決奈達隆原研藥在4種溶出介質中溶出曲線的測定，可知鹽酸決奈達隆在0.1 mol/L鹽酸溶液、磷酸鹽緩沖液（pH6.8）的溶解性不好，需通過加入表面活性劑改善其溶解性。本試驗先篩選表面活性劑的種類，確定使用SDS；再篩選SDS的用量，最終確定分別在0.1 mol/L鹽酸溶液、磷酸鹽緩沖液（pH6.8）中加入0.5%SDS，由此可提高鹽酸決奈達隆在這兩種介質中的溶解度，使之溶出曲線具有可比性。另外，在pH6.8的磷酸鹽介質中，加入0.5%SDS后，2 h的溶出率仍低于50%，溶出曲線無區分度，結合現有文獻報道［13］，故本試驗將取樣時間點延長至360 min，使溶出曲線能更好的區分。因此，本試驗選擇0.5%SDS為表面活性劑。

綜上所述，本方法適用于鹽酸決奈達隆片的溶出度測定；鹽酸決奈達隆片仿制藥與原研藥的體外溶出曲線具有相似性，故其質量一致性較好。

［1］李峰，田拴紅，宋曉峰，等.鹽酸決奈達隆合成新工藝［J］.高等學校化學學報，2013，34（4）：858.

［2］鄧萬俊.治療心房顫動新藥決奈達隆［J］.中國新藥與臨床雜志，2010，29（1）：5.

［3］賀鵬康，周菁.抗心律失常新藥決奈達隆［J］.臨床藥物治療雜志，2010，8（2）：58.

［4］孟祥業，金仲品.決奈達隆的藥動學及臨床研究概況［J］.當代醫學，2010，16（33）：32.

［5］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典：四部［S］.2015年版.北京：中國醫藥科技出版社，2015：121.

［6］張啟明，謝沐風，寧保明，等.采用多條溶出曲線評價口服固體制劑的內在質量［J］.中國醫藥工業雜志，2009，40（12）：946.

［7］夏錦輝，劉昌孝.固體藥物制劑的體外溶出度的統計學評價分析［J］.中國藥學雜志，2000，35（2）：130.

［8］謝沐風.如何科學、客觀地制訂溶出度試驗質量標準［J］.中國醫藥工業雜志，2012，43（3）：243.

［9］張艷俠，袁轉梅，陳育育.阿利苯多片溶出度方法的建立及溶出曲線的比較［J］.西北藥學雜志，2014（5）：508.

［10］王亞敏.淺談溶出度檢查方法的研究［J］.藥物分析雜志，2007（10）：1 667.

［11］孫婷，姜建國，宋更申，等.國內外不同廠家馬來酸依那普利片在4種溶出介質中溶出曲線的比較［J］.中國藥房，2014，25（32）：3 053.

［12］陳加飛，王平，趙昕，等.國產與原研洛索洛芬鈉片的體外溶出曲線一致性的比較［J］.國際檢驗醫學雜志，2015，36（2）：198.

［13］謝沐風.溶出曲線相似性的評價方法［J］.中國醫藥工業雜志，2009，40（4）：308.

（編輯：劉 柳）

Consistency Evaluation of the Dissolution of Generic and Original Preparations of Dronedarone Hydrochloride Tablet

ZHAO Xin1，CHEN Guohua1，WU Qiongzhu1，TENG Haitang2，YU Tingting1（1.School of Pharmacy，China Pharmaceutical University，Nanjing 210009，China；2.Huaian Institute for Food and Drug Control，Jiangsu Huaian 223001，China）

OBJECTIVE：To establish a method for the dissolution determination of Dronedarone hydrochloride tablet，and evaluate the quality consistency of its generic and original preparations.METHODS：UV spectrometry was performed on the column of 288 nm，dissolution media of Phosphate buffer solution（pH4.5），0.1 mol/L Hydrochloric acid solution［adding into 0.5%sodium dodecyl sulfate（SDS）］，Phosphate buffer solution［pH6.8，adding into 0.5%SDS］and water，volume of dissolution medium was 1 000 ml，rotation speed was 75 r/min，the dissolution of generic and original preparations of Dronedarone hydrochloride tablet was detected，and the similarity of dissolution curve was evaluated by calculating the similarity factor（f2）.RESULTS：The linear range of dronedarone hydrochloride was 2.147-25.764 μg/ml；RSDs of precision，stability and reproducibility tests were lower than 2.0%；recoveries 4 dissolution media were 99.53%-101.05%（RSD=0.48%，n=9），98.95%-100.05%（RSD=0.39%，n=9），99.54%-100.20%（RSD=0.24%，n=9）and 98.54%-100.06%（RSD=0.44%，n=9）.In the 4 dissolution media，f2of the dissolution curve of 3 batches of generic and original preparations of Dronedarone hydrochloride tablet was 56，60，63，68，68，52，59，67，65，68，76，62，respectively.CONCLUSIONS：The method is suitable for the dissolution determination of Dronedarone hydrochloride tablet；meanwhile，the in vitro dissolution curves of generic and original preparations of Dronedarone hydrochloride tablet show similarity，so the quality consistency is good.

Dronedarone hydrochloride tablet；Original preparation；Generic preparation；Dissolution curve；Similarity factor；Various media；Consistency evaluation

R927

A

1001-0408（2016）30-4278-04

2016-03-09

2016-07-16）

＊碩士研究生。研究方向：工業藥學。E-mail：814998462@qq. com

#通信作者：副研究員，博士，碩士生導師。研究方向：新藥開發。E-mail：cgh63@163.com

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2016.30.33