一起豬鏈球菌病的診治及防治措施

陳 萍

一起豬鏈球菌病的診治及防治措施

陳 萍

（江蘇省南京市江寧區林業局，江蘇南京 211100）

豬鏈球菌病是由鏈球菌引起的一種人畜共患的傳染病。能引起各種年齡的豬發病，本病呈急性感染時，病豬可迅速發展為菌血癥、毒血癥和敗血癥。本文利用傳統的實驗方法對江寧區某豬場的疑似鏈球菌病病例進行病原分離鑒定、生化試驗、藥敏試驗，逐步探討豬鏈球菌病的診斷、治療及防治措施。

豬；鏈球菌；診斷；治療

豬鏈球菌病是世界范圍內引致豬鏈球菌病最主要的病原，該菌可引起豬腦膜炎及敗血癥。1987年Kilpper Balz和Schleifer建議將豬鏈球菌歸納為一新種。到1995年，已鑒定豬35個莢膜血清型（1至34型及1/2型）［1］。包括我國在內許多國家都發生過人感染豬鏈球菌并死亡的病例，被我國農業部列為二類疫病［2］。有Ⅰ、Ⅱ兩個型，其中Ⅱ型最多見。豬鏈球菌Ⅱ型的致病性與它毒力因子關系密切，其毒力因子有溶菌酶釋放蛋白（MRP）、細胞外力因子（EF）、溶血素和莢膜等［3］。1998～1999年江蘇省部分地區爆發該病，造成25人感染發病，其中14人死亡；2005年6-7月，四川在此爆發由豬鏈球菌Ⅱ型感染引致的豬鏈球菌病，導致人和豬的發病和死亡，累計報告發病206人，死亡39例，發病者均為接觸或食用病、死豬肉的人［4，5］。不僅給養豬業造成經濟損失，而且給公共衛生和食品安全造成嚴重威脅。該病一年四季均可發生，以5～11月發病較多，多生發在混群飼養的不良環境中，全封閉、高密度的現代化集約化養殖場容易流行［6］。近年來，隨著江寧區養豬業的集約化程度的不斷提高，該病呈上升趨勢，特別是耐藥性增強，給鏈球菌的防治帶來困難，針對江寧某養殖場的一起疑似豬鏈球菌病進行了實驗室診斷，確診并為養殖戶選擇和使用抗菌藥物提供重要依據。

1 發病情況

江寧某一規模自繁自養豬場的4-10周齡的10頭仔豬突然大病，體溫較高，不食或少食，精神萎靡，發病初期，用青霉素治療后，體溫有所下降，但發病后2d已死亡4頭，治療效果不佳。

2 臨床癥狀

病豬精神不振，食欲減少或廢絕，體溫40～42 ℃，并呼吸緊迫。眼結膜潮紅，流淚。部分仔豬有關節炎癥狀，關節腫脹、疼痛、后肢不能站立，頭、頸、背部出現水腫，指壓凹陷。病死豬皮膚發紺，耳朵、四肢末端、服下等處皮膚紫紅色。

3 剖檢變化

死亡的仔豬剖檢呈明顯敗血癥，頸部、耳根發紺，鼻粘膜紫紅色、充血及出血，喉頭、器官黏膜出血，常見大量泡沫，肺充血腫脹，淋巴結不同程度的出血、腫大；肝臟充血腫大，有片狀出血點；脾臟腫大呈暗紅色；心肌松軟，有不規則出血斑。關節皮下有膠樣水腫，關節囊內有黃色膠樣或纖維素性滲出物。

4 實驗室診斷

根據本病的發病情況、臨床癥狀及剖檢變化的特征，一般可做出初步診斷，但由于本病癥狀和病變易與急性豬丹毒、及急性豬瘟相混淆，因此為了確診進行了實驗室診斷。

4.1試驗材料

4.1.1病料 無菌采集疑似豬鏈球菌病豬關節液、肝、脾、淋巴結各1份，編號1號、2號、3號、4號。

4.1.2培養基及試劑 鮮血瓊脂培養基 、血清肉湯培養基、化學試劑及生化微量反應管糖發酵管等。

4.1.3試驗藥物 藥敏紙片（青霉素、土霉素、鏈霉素、慶大霉素、卡那霉素、環丙沙星、頭孢菌素）。

4.2方法

4.2.1涂片鏡床 無菌采集急性死亡的病豬關節液、肝、脾、淋巴結等病料制成涂片，干燥、火焰固定后進行革蘭氏染色、鏡檢。

4.2.2細菌分離培養 將無菌采集的病料分別接種于血清肉湯進行增菌培養，然后接種在血液瓊脂平板，37 ℃培養18～24 h后，觀察菌落特征及溶血類型，進行革蘭氏染色，顯微鏡檢查。挑取疑似菌落再次接種置血清肉湯37 ℃培養18～24 h做純培養，放置4℃環境下，保存，待鑒定［7］。

4.2.3生化試驗特性床床 分離菌純培養物分別接種于蔗糖、乳糖、麥芽糖、山梨醇、葡萄糖、甘露糖、棉實糖、水楊苷培養基，37 ℃培養24 h后，觀察其生化反應特性。

判定標準："+"表示大多數菌株（90～100%）為陽性；"-"表示大多數菌株（90～100%）為陰性［8，9］。

4.2.4藥敏試驗 采用紙片擴散法［10］，根據藥敏試驗要求的距離，用無菌棉簽蘸取分離菌的肉湯培養物，涂布法接種于瓊脂平板，待稍干后，用無菌鑷子將各種藥敏紙片分別平貼在培養基表面，37 ℃培養20-24 h，觀察結果，分別測定抑菌環的直徑。

判定標準：經培養后，有抑菌能力的抗菌藥在紙片周圍出現一個無菌生長的圓圈，成為抑菌圈。抑菌圈直徑在15 mm以上為高度敏感，10-15 mm為中度敏感，10 mm以下為低度敏感，無抑菌環為不敏感。

5 結果

5.1涂片鏡檢

革蘭氏染色、顯微鏡檢查為革蘭氏陽性球菌，多數為圓形或橢圓形，呈成對或短鏈狀排列。

5.2培養特性

37 ℃培養24 h后，在鮮血瓊脂平板上形成半透明、表面光滑、微隆起的灰白色露珠狀的小菌落，外層有明顯的β-溶血環，生長良好。在血清肉湯中先均勻渾濁，后在試管底部形成沉淀，上部澄清，不形成菌膜。鮮血瓊脂、血清肉湯培養物涂片，可見革蘭氏染色陽性，多呈長鏈狀球菌。

5.3生化試驗結果

見表1。表明生化反應結果均符合豬鏈球菌的生化特性，說明分離的菌為豬鏈球菌。

表1　分離菌生化試驗結果

5.4藥敏試驗結果

見表2。藥敏試驗結果敏感的藥物依次是頭孢菌素、環丙沙星；中度的藥物是卡那霉素；對青霉素、土霉素、鏈霉素、慶大霉素不敏感。

表2　藥敏實驗結果（單位：cm）

6 防治

6.1治療

按藥敏試驗選擇高敏藥物進行治療。

6.1.1清除病原 環丙沙星治療豬鏈球菌病，用2.5～10.0mg/ kg，每12h注射1次，連用3d，能迅速改善癥狀，療效明顯優于青霉素。對敗血型及關節型，應早期大劑量使用抗生素。青霉素每頭每次40萬～100萬單位，每天肌注2～4次；肌注慶大霉素，1～2mg/kg，每日2次。肌注慶增安注射液0.1ml/kg，肌肉每日2次，也有很好的療效。為了鞏固療效，應連續用藥5d以上。對淋巴結膿腫型，待膿腫成熟后，及時切開排出濃汁，用3%雙氧水或0.1%新潔爾滅等沖洗后，涂以碘酊，有膿腫轉移時，應注射抗生素。

6.1.2對對的行 在治療過程中有明顯發熱癥狀的，配合使用解熱鎮痛藥物安普定，嚴重病例配合鏈霉素、維生素C，一同注射，2次/d，或用頭孢菌素效果更好。

6.1.3防止繼發感染 全群口服抗生素，每1t飼料加入500g土霉素，連用7d以防繼發感染。

6.2預防

6.2.1清除傳染源 病豬和帶菌豬是該病的重要傳染源。一旦發現病豬隔離治療，帶菌母豬盡可能淘汰，死豬全部進行深埋或焚燒，糞便做堆積發酵處理。污染的用具和環境用清水徹底沖洗，然后場地用2%的熱燒堿溶液消毒，用具用強力金碘噴灑消毒，并注意消毒，1次/d，連續7d。

6.2.2除去感染的因素 豬圈和飼槽上的尖銳物體，如釘頭、鐵片、碎玻璃、尖石頭等能引起外傷的物體，一律清除。新生仔豬斷臍、剪牙、斷尾、打耳號等要嚴格用碘酊消毒，當發生外傷時要及時按外科方法進行處理，防止傷口感染病菌，引發本病。

6.2.3免疫局種疫苗 疫區在60日齡進行第一次免疫，以后春秋各免疫一次，豬鏈球菌弱毒菌苗注射免疫。特別注意疫苗菌株的血清型是否含致病菌株的血清型或是否一致。

6.2.4加強飼養管理 豬鏈球菌主要通過呼吸道（扁桃體和鼻腔）、生殖道和感染，搞好豬舍內外的環境衛生，豬舍要保持清潔干燥，通風良好；豬群的飼養密度要適中，特別是仔豬的飼養密度不可過大；豬舍每周應堅持用百毒殺或菌毒敵等高效消毒劑進行噴霧消毒。豬場嚴禁飼養貓、犬和其它動物，徹底消滅鼠類和吸血昆蟲（蚊、蠅等），控制傳遞媒介傳播病原體，可有效的防止本病的發生與流行。

7 討論與分析

7.1不斷學習新知識，提高對疾病的認識

該豬場為自繁自養，管理要求較高，一般基層獸醫對豬瘟等重大疫病的預防都十分重視，均按嚴格的免疫程序操作，而對豬鏈球菌病的危害認識不足，同時本次疫情由于實驗條件有限，具體分屬哪一血清型，還需進一步分離鑒定。所以應選擇適合的血清型疫苗或做自家苗，按規定的免疫程序進行預防注射。

7.2配合實驗室診斷結果，合理用藥

因紙片擴散法受培養基的質量、細菌接種量、培養基藥敏紙片的質量、紙片含藥的準確性和均勻性等諸多因素的影響較大［11］，與之前做的數值有差別，但從本次藥敏試驗來看，以往首選的藥物已經產生耐藥性，因此在臨床上不能亂用抗生素，還是應該按照嚴格的免疫程序，使用疫苗來預防本?。?2］。使用藥物預防時應避免長期使用同一種藥物，可幾種藥物交替使用。

7.3提高自身抵抗力是防止疾病的關鍵

豬鏈球菌病的發生與飼養管理密切相關，加強消毒、提高飼養管理水平、改善豬場衛生條件，合理使用營養豐富的全價飼料以增強抵抗力是控制該病的基本措施。

［1］ 陳溥言.獸醫傳染病學（第五版）［M］.北京：中國農業出版社，2006.

［2］ 馬學恩.家畜病理學（第四版）［M］.北京：中國農業出版社，2007.

［3］ 何孔旺，陸承平.豬鏈球菌2型的致病特性與毒力因子［J］.中國獸醫科技，2000，30（9）：17-21.

［4］ 何家惠，王繼春，林繼煌.豬鏈球菌2型—人畜共患病新病原菌的研究概況［J］.畜牧與獸醫，2001，33（4）：27-29.

［5］ 崔立，朱建國，華修國，等.豬鏈球菌2型四川株與江蘇株對SPF豬的致病性［J］.上海交通大學學報，2006，24（1）：54-57.

［6］ 孟利梅.豬鏈球菌病的分離鑒定和藥敏試驗［J］.畜禽業，2013，（5）：28-30.

［7］ 何宇喜，馬鐵峰.豬鏈球菌病的診斷及防治措施［J］.畜牧獸醫科技信息，2012，（11）：69-70.

［8］ 趙海忠，王生奎.豬鏈球菌病的分離鑒定與藥敏試驗［J］.中國畜牧獸醫，2006，（11）：85-87.

［9］ Silva L M，Baums C G，Rehm T，et al. Vimalcnce associated gene profiling of streptococcus suis isolates by PCR ［J］.Vet Microbiol，2006，115（3）：117-127.

［10］ 譚瑤，趙清. K-B紙片擴散法藥敏試驗［J］.檢驗醫學與臨床，2010，7（20）：2290-2291.

［11］ 倪語星.抗微生物藥物敏感性試驗規范［M］.上海：上海科學技術出版社，2002.

［12］ 陳強，齊麗娜，甄志剛，等.遼寧省豬源鏈球菌病的分離鑒定與藥敏試驗［J］.畜牧與獸醫，2013，45（7）：83-85.