雷利度胺聯(lián)合地塞米松抗T淋巴瘤細(xì)胞作用的研究

李紅玲 陳 彤 李明玉 張旭霞 齊發(fā)梅 王 芳

1.甘肅省人民醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，甘肅蘭州730000；2.甘肅省人民醫(yī)院檢驗(yàn)中心，甘肅蘭州730000

雷利度胺聯(lián)合地塞米松抗T淋巴瘤細(xì)胞作用的研究

李紅玲1陳 彤1李明玉1張旭霞1齊發(fā)梅2王 芳2

1.甘肅省人民醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，甘肅蘭州730000；2.甘肅省人民醫(yī)院檢驗(yàn)中心，甘肅蘭州730000

目的探討雷利度胺聯(lián)合地塞米松對T淋巴瘤細(xì)胞增殖與凋亡的影響。方法預(yù)實(shí)驗(yàn)后選取雷利度胺（40、80、120、160、200、400、600 mg/L）、地塞米松（50、100、150、200、250 mg/L）及兩藥聯(lián)用處理人T淋巴瘤Jurkat細(xì)胞24、48、72 h；MTT法測試細(xì)胞毒性，流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期，光鏡、熒光顯微鏡進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，Annexin V染色檢測凋亡率。結(jié)果雷利度胺和地塞米松均以濃度和時(shí)間依賴性方式抑制Jurkat細(xì)胞生長，誘導(dǎo)Jurkat細(xì)胞凋亡。雷利度胺和地塞米松聯(lián)合處理組的Jurkat細(xì)胞增殖受抑率顯著高于單用雷利度胺組（P＜0.05）和單用地塞米松處理組（P＜0.05）。結(jié)論雷利度胺和地塞米松聯(lián)合具有協(xié)同抗T細(xì)胞淋巴瘤作用，本研究為雷利度胺和地塞米松臨床聯(lián)合應(yīng)用于T細(xì)胞淋巴瘤提供了理論基礎(chǔ)。

雷利度胺；地塞米松；T淋巴瘤細(xì)胞；增殖；凋亡

淋巴瘤是血液系統(tǒng)惡性腫瘤，分為霍奇金淋巴瘤（HD）和非霍奇金淋巴瘤（NHL）兩大類，以NHL更為多見［1］，其中NHL占淋巴瘤總數(shù)的90%，不同亞類之間惡性程度、療效、預(yù)后有很大差異［2］。常用的治療方法包括化療、干細(xì)胞移植、靶向治療等［3］，但由于耐藥、復(fù)發(fā)等因素，仍有部分患者不能得到治愈，因此有必要尋找新的治療手段。

雷利度胺（Lena1idomide）是沙利度胺的類似物，研究證實(shí)雷利度胺對部分NHL亞型及其他類型實(shí)體瘤有效，如用于T細(xì)胞淋巴瘤的治療［4］。目前雷利度胺在其他類型淋巴瘤中的作用研究仍是熱點(diǎn)。在骨髓瘤治療中雷利度胺臨床常用的方案是與地塞米松聯(lián)合，但在淋巴瘤中二者聯(lián)合是否有協(xié)同作用尚不明確。本研究對雷利度胺聯(lián)合地塞米松對T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞的抗腫瘤作用進(jìn)行探討，旨在為雷利度胺用于T細(xì)胞淋巴瘤治療提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

雷利度胺購自臺州市椒江星成醫(yī)藥化工有限公司，用DMSO配制成20 mg/mL的儲存液。地塞米松磷酸鈉注射液購自辰欣藥業(yè)股份有限公司，原液濃度5 mg/mL作為儲備液。二者均-20℃凍存，臨用時(shí)稀釋至工作濃度。其中，DMSO的使用濃度低于1%。Hoechst33258、Annexin V試劑盒為杭州碧云天公司產(chǎn)品。

1.2 細(xì)胞培養(yǎng)、形態(tài)學(xué)觀察

本研究采用的細(xì)胞系為人T淋巴瘤細(xì)胞株Jurkat，購自中國科學(xué)院上海細(xì)胞庫。用RPMI1640完全培養(yǎng)液，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的恒溫孵箱中培養(yǎng)。所有細(xì)胞系分別以（2～3）×105/mL個(gè)細(xì)胞的起始濃度接種于含或不含相應(yīng)藥物的新鮮RPMI1640培養(yǎng)液（內(nèi)含10%小牛血清和1%青、鏈霉素）中。實(shí)驗(yàn)選用對數(shù)生長期細(xì)胞。藥物處理的細(xì)胞，經(jīng)離心、涂片、Wright's染色后在光鏡下觀察其細(xì)胞形態(tài)學(xué)。

1.3 MTT比色法檢測細(xì)胞毒作用

在預(yù)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)低濃度雷利度胺（1.25、2.5、5、10、20 mg/L）對Jurkat細(xì)胞無明顯抑制作用，故本研究中選擇雷利度胺濃度為40、80、120、160、200、400、600 mg/L。各組均按每孔3×104個(gè)細(xì)胞數(shù)接種96孔板，每組設(shè)3復(fù)孔。分別于轉(zhuǎn)染后24，48，72 h測定570 nm處吸光度值A(chǔ)570。細(xì)胞抑制率=（1-A570處理組/A570未處理組）×100%。地塞米松劑量選擇50、100、150、200、250 mg/L，檢測方法同上。

1.4 細(xì)胞周期檢測

收集不同處理后Jurkat細(xì)胞，PBS洗滌后，70%乙醇固定，4℃冰箱過夜。檢測前PBS沖洗細(xì)胞1次，調(diào)整樣品濃度至1×106/mL，加入碘化丙啶染色液，4℃冰箱中避光染色30 min，流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期。

1.5 細(xì)胞凋亡檢測

1.5.1 光鏡下檢測Jurkat細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)變化采用瑞氏吉姆薩染色，熒光顯微鏡檢測Jurkat細(xì)胞凋亡按Hoechst33258說明書進(jìn)行熒光染色，熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。

1.5.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率分別取對照組及各實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞1×106個(gè)，用PBS洗滌2次，加入490 μL結(jié)合緩沖液，充分混勻細(xì)胞，加入5μL FITC標(biāo)記AnnexinV和15 μL溶解的碘化丙錠于細(xì)胞懸液中，輕輕混勻，將試管置于4℃避光孵育10 min，流式細(xì)胞儀檢測凋亡細(xì)胞比例。

1.6 MTT及Annexin V檢測雷利度胺聯(lián)合地塞米松對Jurkat細(xì)胞增殖及凋亡的作用

實(shí)驗(yàn)分組：對照組、雷利度胺組（200 mg/L）、地塞米松組（250 mg/L）、雷利度胺（200 mg/L）聯(lián)合地塞米松組（250 mg/L），以上均為終濃度。調(diào)整各組細(xì)胞數(shù)為5×103個(gè)/孔，置37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)48 h，MTT法檢測細(xì)胞毒作用，Annexin V-FITC/PI檢測凋亡率。采用金正均法［5］計(jì)算雷利度胺和地塞米松聯(lián)合應(yīng)用在促進(jìn)凋亡方面是否有協(xié)同作用；q=Ea+b/（Ea+Eb-Ea×Eb）；Ea+b為聯(lián)合用藥組的細(xì)胞凋亡率；Ea、Eb分別為應(yīng)用a藥和b單獨(dú)處理組的細(xì)胞凋亡率。q值在0.85～1.15之間為兩藥聯(lián)合作用單純相加，q值＜0.85為兩藥合用有拮抗作用，q值＞1.15為兩藥合用有協(xié)同作用。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 體外實(shí)驗(yàn)檢測單用雷利度胺對Jurkat細(xì)胞增殖的抑制作用

預(yù)實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)雷利度胺劑量低于40 mg/L時(shí)難以檢測到顯著的細(xì)胞抑制作用，低濃度雷利度胺（1.25、2.5、5、10、20 mg/L）的細(xì)胞抑制率與對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究以40 mg/L為起始劑量，發(fā)現(xiàn)劑量增加后雷利度胺細(xì)胞抑制率逐漸增加，40、80、120、160、200、400、600 mg/L雷利度胺對Jurkat細(xì)胞增殖均有抑制作用，呈時(shí)間和劑量依賴性。200 mg/L雷利度胺作用Jurkat細(xì)胞24、48、72 h后，細(xì)胞增殖抑制率分別為18.2%、27.7%、31.8%。但這種抑制作用總體上較弱，因?yàn)槔桌劝穭┝考词惯_(dá)到600 mg/L作用72 h，抑制率僅為39.1%，仍未達(dá)到IC50。見圖1。

圖1 MTT法檢測雷利度胺對Jurkat細(xì)胞增殖能力的影響

2.2 體外實(shí)驗(yàn)檢測單用地塞米松對Jurkat細(xì)胞增殖的抑制作用

預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，較低濃度地塞米松對Jurkat細(xì)胞增殖的抑制作用微弱，劑量低于50 mg/L時(shí)難以檢測到顯著的細(xì)胞抑制作用，故本研究中選擇≥50 mg/L的濃度進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示，50、100、150、200、250 mg/L地塞米松對Jurkat細(xì)胞增殖均有抑制作用，呈時(shí)間和劑量依賴性。見圖2。

圖2 MTT法檢測地塞米松對Jurkat細(xì)胞增殖能力的影響

2.3 體外實(shí)驗(yàn)檢測單用雷利度胺對Jurkat細(xì)胞周期的影響

用200 mg/L雷利度胺作用Jurkat細(xì)胞48 h后，G0/G1、S和G2/M期細(xì)胞比例分別為（29.4±2.5）%、（8.42± 1.1）%、（62.2±3.2）%，與對照組［（29.2±1.8）%、（8.12± 0.8）%、（62.7±4.4）%］相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），說明200 mg/L雷利度胺作用48 h對Jurkat細(xì)胞周期無顯著影響。見圖3。

2.4 光鏡、Hoechst33258染色檢測單用雷利度胺對Jurkat細(xì)胞凋亡的影響

2.4.1 光鏡檢測Jurkat細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)變化光鏡下顯示，對照組細(xì)胞胞體圓形或近圓形，細(xì)胞膜有少量突起，胞膜完整，胞漿豐富，呈藍(lán)色或淡藍(lán)色，細(xì)胞核較大，呈圓形或近圓形，細(xì)胞核膜完整。與對照組相比，雷利度胺處理組出現(xiàn)細(xì)胞變形，胞膜不完整，胞漿丟失，細(xì)胞核碎裂等凋亡改變，并出現(xiàn)凋亡小體。見圖4。

2.4.2 Hoechst33258染色熒光顯微鏡檢測Jurkat細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)變化在熒光顯微鏡下，對照組Jurkat細(xì)胞形態(tài)完整，染色均勻一致，Hoechst 33258熒光染色檢測結(jié)果顯示，對照組的細(xì)胞核大小均一，形態(tài)完整，較圓，核內(nèi)熒光均勻彌散，呈藍(lán)色淡染。雷利度胺處理后，Jurkat細(xì)胞呈現(xiàn)典型的凋亡改變，出現(xiàn)部分細(xì)胞凋亡變化，細(xì)胞核體積縮小，有核碎裂現(xiàn)象，可見染色質(zhì)高度濃集、核染色質(zhì)凝聚成明亮的團(tuán)塊狀等改變。見圖5，封三。

2.5 MTT檢測雷利度胺聯(lián)合地塞米松對Jurkat細(xì)胞生長的抑制作用

200 mg/L雷利度胺與250 mg/L地塞米松聯(lián)合作用24、48、72 h對Jurkat細(xì)胞生長抑制率顯著高于單用雷利度胺組（P＜0.05）和單用地塞米松組（P＜ 0.05）。見表1。

圖3 流式細(xì)胞術(shù)檢測單用雷利度胺對Jurkat細(xì)胞周期的影響

圖4 光鏡觀察雷利度胺誘導(dǎo)凋亡的形態(tài)學(xué)改變（100×）

2.6 Annexin V染色檢測雷利度胺聯(lián)合地塞米松對Ju鄄rkat細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用

流式細(xì)胞術(shù)檢測分析顯示，200 mg/L雷利度胺與250 mg/L地塞米松聯(lián)合作用48 h細(xì)胞凋亡率顯著高于單用雷利度胺組和單用地塞米松組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見圖6。本研究中通過金正均法計(jì)算出q=1.21，說明雷利度胺和地塞米松聯(lián)合應(yīng)用在促進(jìn)凋亡方面有協(xié)同作用。

表1 雷利度胺與地塞米松聯(lián)合應(yīng)用對Jurkat細(xì)胞的增殖抑制作用（%，n=4）

圖6 流式細(xì)胞術(shù)檢測雷利度胺聯(lián)合地塞米松對Jurkat細(xì)胞凋亡的影響

3 討論

雷利度胺是沙利度胺的衍生物，其研發(fā)主要是基于減少沙利度胺的不安全性。2000年后，雷利度胺顯著的抗腫瘤作用［6］成為研究熱點(diǎn)，2006年被相關(guān)組織批準(zhǔn)用于多發(fā)性骨髓瘤的治療，其治療方案為雷利度胺與地塞米松聯(lián)合應(yīng)用［5］。骨髓增生異常綜合征的亞型5q-綜合征也是其治療的適應(yīng)證之一［7］。

隨著對雷利度胺抗腫瘤作用的研究，發(fā)現(xiàn)其對某些淋巴瘤如T細(xì)胞淋巴瘤也有一定臨床效果［8］，在濾泡性淋巴瘤、彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤患者的臨床應(yīng)用中也有一定的臨床反應(yīng)［9］。但其對T細(xì)胞淋巴瘤的作用及與地塞米松的聯(lián)合作用研究較少，機(jī)制仍不明確。本研究選擇T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞株Jurkat作為研究對象，探討雷利度胺聯(lián)合地塞米松對T淋巴瘤細(xì)胞增殖與凋亡的影響。雷利度胺、地塞米松及兩藥聯(lián)用處理人淋巴瘤Jurkat細(xì)胞24、48、72 h，MTT法測試細(xì)胞毒性，光鏡下及熒光顯微鏡進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察。結(jié)果提示，雷利度胺以濃度和時(shí)間依賴性方式抑制Jurkat細(xì)胞生長及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。在熒光顯微鏡下，雷利度胺處理48 h后，可見核染色質(zhì)凝聚成明亮的團(tuán)塊狀，部分細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則，并有核碎裂現(xiàn)象，提示Jurkat細(xì)胞呈現(xiàn)典型的凋亡改變。經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)Annexin V分析顯示，雷利度胺對T細(xì)胞淋巴瘤也有抗增殖與誘導(dǎo)凋亡作用，與其他腫瘤中的研究結(jié)果一致。Mitsiades等［10］研究發(fā)現(xiàn)，雷利度胺抗骨髓瘤細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡作用與其抑制NF-κb的活性有關(guān)。

在預(yù)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，劑量低于40 mg/L時(shí)難以檢測到雷利度胺顯著的細(xì)胞抑制作用，增大劑量后，在40～600 mg/L劑量區(qū)間，其增殖抑制率和凋亡率均顯著低于常用的化療藥物的相應(yīng)數(shù)值，說明與常用化療藥物相比，雷利度胺的抗增殖和誘導(dǎo)凋亡作用較弱，推測其發(fā)揮抗腫瘤作用的機(jī)制可能更多的與免疫調(diào)控、抗血管生成［11］等相關(guān)。研究表明，雷利度胺作為一個(gè)多效免疫調(diào)節(jié)劑可殺傷腫瘤細(xì)胞，也可增強(qiáng)對腫瘤細(xì)胞的免疫應(yīng)答［12-15］。雷利度胺通過上調(diào)CDK抑制劑p21 waf-1引起濃度依賴的細(xì)胞周期停滯在G0/G1期，并下調(diào)促存活的活性激酶ERK1/2和Akt的活性發(fā)揮抗腫瘤作用［16-17］。基于以上分析，認(rèn)為雷利度胺抗Jurkat細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡可能是其抗腫瘤作用機(jī)制之一。

地塞米松是一種皮質(zhì)類固醇藥物，常用于腫瘤的化療，尤其是在多發(fā)性骨髓瘤中地塞米松常單獨(dú)或與其他化療藥物聯(lián)合應(yīng)用［18］，但雷利度胺與地塞米松聯(lián)合應(yīng)用是否也適用于淋巴瘤尚不明確。本研究選擇雷利度胺與地塞米松聯(lián)合應(yīng)用，觀察對淋巴瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響，旨在為臨床二者的聯(lián)合應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，雷利度胺和地塞米松聯(lián)合處理組Jurkat細(xì)胞增殖受抑率顯著高于單用雷利度胺組（P＜0.05）和單用地塞米松處理組（P＜0.05）。在凋亡誘導(dǎo)方面，流式細(xì)胞術(shù)檢測分析顯示，200 mg/L雷利度胺與250 mg/L地塞米松聯(lián)合作用48 h細(xì)胞凋亡率顯著高于單用雷利度胺組和單用地塞米松組，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，差異均有顯著性（P＜0.05）。為了解雷利度和地塞米松聯(lián)合應(yīng)用在促進(jìn)凋亡方面是否有協(xié)同作用，通過金正均法計(jì)算出q=1.21，提示雷利度胺與地塞米松聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同作用。

綜上所述，雷利度胺具有抗T細(xì)胞淋巴瘤作用，其作用機(jī)制可能與其抗淋巴瘤細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡有關(guān)，雷利度胺和地塞米松聯(lián)合具有協(xié)同作用。本研究為臨床雷利度胺和地塞米松聯(lián)合應(yīng)用于T細(xì)胞淋巴瘤治療提供了一定理論基礎(chǔ)。

［1］Jema1 A，Siege1 R，Ward E，et a1.Cancer statistics 2006［J］. Ca A Cancer Journa1 for C1inicians，2006，56（2）：23-47.

［2］Kossakowska AE，Edwards DR，Prusinkiewicz C，et a1.Inter1eukin-6 regu1ation of matrix meta11oproteinase（MMP-2 and MMP-9）and tissue inhibitor of meta11oproteinase（TIMP-1）expression in ma1ignantnon-Hodgkin's 1ymphomas［J］.B1ood，1999，94（6）：2080-2089.

［3］Van Besien K.Current status of a11ogeneic transp1antation for aggressivenon-Hodgkin 1ymphoma［J］.Curr Opin Onco1，2011，23（6）：681-691.

［4］Kritharis A，Coy1e M，Sharma J，et a1.Lena1idomide in non-Hodgkin 1ymphoma：bio1ogica1 perspectives and therapeutic opportunities［J］.B1ood，2015，125（16）：2471-2476.

［5］Weber DM，Chen C，Niesvizky R，et a1.Mu1tip1e Mye1oma（009）Study Investigators Lena1idomide p1us dexamethasone for re1apsed mu1tip1e mye1oma in North America［J］. N Eng1 J Med，2007，357（21）：2133-2142.

［6］Davies F，Baz R.Lena1idomide mode of action：1inking bench and c1inica1 findings［J］.B1ood Rev，2010，24（Supp1 1）：S13-19.

［7］List A，Kurtin S，Roe DJ，et a1.Efficacy of 1ena1idomide in mye1odysp1astic syndromes［J］.N Eng1 J Med，2005，352（6）：549-557.

［8］Dawar R，Hernandez-I1iza1iturri F.The emerging ro1e of 1ena1idomide in the management of mant1e ce11 1ymphoma（MCL）［J］.Best Pract Res C1in Haemato1，2012，25（2）：185-190.

［9］Kritharis A，Coy1e M，Sharma J，et a1.Lena1idomide in non-Hodgkin 1ymphoma：bio1ogica1 perspectives and therapeutic opportunities［J］.B1ood，2015，125（16）：2471-2476.

［10］Mitsiades N，Mitsiades CS，Pou1aki V，et a1.Apoptotic signa1ing induced by immunomodu1atory tha1idomide ana1ogs in human mu1tip1e mye1oma ce11s：therapeutic imp1ications［J］.B1ood，2002，99（12）：4525-4530.

［11］Gupta D，Treon SP，Shima Y，et a1.Adherence of mu1tip1e mye1oma ce11s to bone marrow stroma1 ce11s upregu-1ates vascu1ar endothe1ia1 growth factor secretion：therapeutic app1ications［J］.Leukemia，2001，15（12）：1950-1961.

［12］Semeraro M，Vacche11i E，Eggermont A，et a1.Tria1 Watch：Lena1idomide-based immunochemotherapy［J］.Oncoimmuno1ogy，2013，2（11）：1091-1096.

［13］Vie1 S，Charrier E，Marc，ais A，et a1.Monitoring NK ce11 activity in patients with hemato1ogica1 ma1ignancies［J］. Oncoimmuno1ogy，2013，2（9）：e26011.

［14］Teo SK.Properties of tha1idomide and its ana1ogues：imp1ications for anticancer therapy［J］.AAPS J，2005，7（1）：E14-19.

［15］Gupta D，Treon SP，Shima Y，et a1.Adherence of mu1tip1e mye1oma ce11s to bone marrow stroma1 ce11s upregu-1ates vascu1ar endothe1ia1 growth factor secretion：therapeutic app1ications［J］.Leukemia，2001，15（12）：1950-1961.

［16］Verhe11e D，Corra1 LG，Wong K，et a1.Lena1idomide and CC-4047 inhibit the pro1iferation of ma1ignant B ce11s whi1e expanding norma1 CD34+progenitor ce11s［J］.Cancer Res，2007，67（2）：746-755.

［17］Kot1a V，Goe1 S，Nischa1 S，et a1.Mechanism of action of 1ena1idomide in hemato1ogica1 ma1ignancies［J］.J Hemato1 Onco1，2008，2（1）：1-10.

［18］Cavo M，Tacchetti P，Patriarca F，et a1.Bortezomib with tha1idomide p1us dexamethasone compared with tha1idomide p1us dexamethasone as induction therapy before，and conso1idation therapy after，doub1e auto1ogous stemce11 transp1antation in new1y diagnosed mu1tip1e mye1oma：a randomised phase 3 study［J］.Lancet，2010，376（9758）：2075-2085.

Combination effects of Lenalidomide and Dexamethasone on inhibition of T lymPhoma cells

LI Hongling1CHEN Tong1LI Mingyu1ZHANG Xuxia1QI Famei2WANG Fang2
1.Department of Onco1ogy，Peop1e's Hospita1 of Gansu Province，Lanzhou730000，China；2.Department of C1inica1 Laboratory，Peop1e's Hospita1 of Gansu Province，Lanzhou730000，China

Objective To study the effect of combination of Lena1idomide and Dexamethasone（DEX）on the T 1ymphoma ce11s growth and apoptosis.Methods After the pre1iminary experiment，Lena1idomide（40，80，120，160，200，400，600 mg/L）and Dexamethasone（50，100，150，200，250 mg/L），and the combination of these two drugs were used to treat Jurkat 1ymphoma ce11s for 24，48 or 72 hours.MTT was used to eva1uate the cytotoxic effects.F1ow cytometry was used to detect ce11 cyc1e.Ce11u1ar morpho1ogic changes of apoptotic ce11 nuc1eus were observed using the Hoechst 33258 staining.The percentage of apoptosis ce11s was detected by f1ow cytometry using Annexin V-FITC/PI Apoptosis assay.Results Both Lena1idomide and Dexamethasone cou1d inhibit the ce11s pro1iferation and induce the apoptosis of Jurkat ce11s in a dose and time dependent manner.There was a significant increase of the ce11 inhibitory rate after exposure to combination of Lena1idomide and Dexamethasone compared to Lena1idomide a1one（P＜0.05）or Dexamethasone a1one（P＜0.05）.Conclusion Combination of Lena1idomide and Dexamethasone has synergistic activity in inhibition of T 1ymphoma ce11s.This study，therefore，provides the framework for c1inica1 eva1uation of Lena1idomide combined with Dexamethasone to improve patients'outcome in T 1ymphoma.

Lena1idomide；Dexamethasone；T 1ymphoma ce11s；Pro1iferation；Apoptosis

R285

A

1673-7210（2016）07（c）-0008-05

2016-04-24本文編輯：程銘）

國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（30960438；81260 342）；甘肅省蘭州市科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目（2009-1-56）。

李紅玲（1969.12-），女，甘肅蘭州人，博士，碩士生導(dǎo)師，主任醫(yī)師，主要從事惡性腫瘤藥物治療研究工作。