門診干眼患者炎癥因子表達水平及干眼相關危險因素研究

李海輝 王彥榮 劉 洋 顧莉莉

陜西省延安市人民醫院眼科，陜西延安716000

門診干眼患者炎癥因子表達水平及干眼相關危險因素研究

李海輝 王彥榮 劉 洋 顧莉莉

陜西省延安市人民醫院眼科，陜西延安716000

目的探討門診干眼患者炎癥因子的表達水平及干眼相關危險因素。方法選取2014年6月～2016年3月在延安市人民醫院眼科門診就診的48例干眼患者（A組）和同期在眼科門診單純配鏡的96例非干眼者（B組）作為研究對象。所有研究對象均行眼表疾病指數（OSDI）問卷、淚膜破裂時間（BUT）檢查、淚液分泌試驗Ⅰ（SⅠt）和角膜熒光素染色試驗，采用ELISA法檢測兩組血液和眼淚中白細胞介素-6（IL-6）、白細胞介素-1β（IL-1β）和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的濃度，采用多因素Logistic回歸和Spearman秩相關分析等分析數據。結果A組血液和眼淚中IL-6、IL-1β和TNF-α濃度均明顯高于B組（均P＜0.05）。血液和眼淚中的IL-6、IL-1β和TNF-α均分別與OSDI、BUT、SⅠt和角膜熒光素染色試驗結果顯著相關（rIL-6血=0.91、-0.94、-0.93、0.61，rIL-6眼淚=0.86、-0.81、-0.77、0.58；rIL-1β血=0.56、-0.48、-0.71、0.62，rIL-1β眼淚=0.55、-0.43、-0.69、0.53；rTNF-α血=0.53、-0.49、-0.45、0.51，rTNF-α眼淚= 0.51、-0.47、-0.44、0.50，均P＜0.05）。多因素Logistic回歸分析顯示，糖尿病（OR=0.313，95%CI=0.118～0.831，P= 0.020）、沙眼（OR=0.197，95%CI=0.066～0.587，P=0.004）、視頻終端綜合征（OR=0.072，95%CI=0.007～0.774，P= 0.030）和服用抗組胺藥物（OR=0.142，95%CI=0.025～0.796，P=0.027）是干眼的獨立危險因素。結論血液和眼淚中TNF-α、IL-1β和IL-6的濃度與干眼的病情關系密切。延安地區干眼危險因素眾多，應采取針對性的預防措施。

白細胞介素-6；白細胞介素-1β；腫瘤壞死因子-α；干眼；危險因素

干眼是影響患者生活質量的常見眼部疾病，近年來因為其發病率逐年上升且年輕化而備受關注［1］。干眼的病因復雜，目前發病機制尚未完全闡明，但越來越多的研究證實炎癥因素與干眼關系密切［2］，但很少有研究比較炎癥因子在干眼患者及正常人中表達水平異同，關于炎癥因子與干眼檢查結果的相關關系也報道甚少［3］，而延安地區關于干眼相關危險因素暫未見報道。本研究擬探討干眼與非干眼患者外周血和眼淚中炎癥因子的表達水平異同，分析干眼的相關危險因素，為其防治提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2014年6月～2016年3月在延安市人民醫院（以下簡稱“我院”）眼科門診連續就診的48例（96眼）干眼患者作為實驗組（A組），同時選擇同期在我院眼科門診單純配鏡的96例非干眼者作為對照組。匹配標準：性別相同，兩組年齡差＜3歲，均同一地區居?。?0年。干眼診斷參考我國2013年角膜病學組制訂的診斷標準［2］。所有研究對象在最近3個月內均沒有眼外傷、眼手術等。研究經我院倫理委員會批準，均取得受試者和家屬知情同意。

1.2 方法

1.2.1 眼科檢查采用眼表疾病指數（ocu1ar surface disease index，OSDI）問卷對所有研究對象進行干眼癥狀評估［4］。所有研究對象均行淚膜破裂時間（breakup time of tear fi1m，BUT）、淚液分泌試驗Ⅰ（Shirmer I test，SⅠt）和角膜熒光素染色試驗。熒光素鈉試紙和準淚液檢測試紙均購自天津晶明新技術開發有限公司。

1.2.2 外周血炎癥因子檢測所有研究對象均清晨采集空腹肘靜脈血5 mL置于EDTA管中，2000 r/min離心10 min，分離血漿于-20℃保存備檢。采用酶聯免疫吸附雙抗體夾心法（ELISA）檢測白細胞介素-6（inter1eukin-6，IL-6）、白細胞介素-1β（inter1eukin-1 beta，IL-1β）和腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-a1pha，TNF-α）在靜脈血中的濃度。ELISA試劑盒購自北京晶美生物技術公司，嚴格按照試劑盒說明書操作。

1.2.3 淚液中炎癥因子檢測采用毛細管法于早晨8∶00～10∶00采集所有研究對象的淚液，通過研究對象數次瞬目后用25 μL毛細管在外眥收集淚液約15 μL，于-80℃保存備檢。采用ELISA法檢測IL-6、IL-1β和TNF-α的濃度，相關試劑盒和操作方法同“1.2.2”項下。

1.3 統計學方法

采用SPSS 17.0統計學軟件進行數據分析，符合正態分布的數據用均數±標準差（）表示，如方差齊，兩組間比較采用t檢驗，如方差不齊，則采用Wilcoxon秩和檢驗；不符合正態分布的數據用中位數（四分位數）［M（Q25，Q75）］表示，兩組間比較采用Wilcoxon秩和檢驗；計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗；眼科檢查結果與炎癥因子的相關性分析采用Spearman秩相關分析；干眼相關影響因素分析采用多因素Logistic回歸分析（以P＜0.1為納入標準）。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組眼科檢查結果比較

兩組OSDI評分、SⅠt、BUT和熒光素染色評分差異均有統計學意義（均P＜0.05）。見表1。

2.2 兩組外周血和眼淚中炎癥因子水平比較

A組外周血和眼淚中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均高于B組，差異有統計學意義（均P＜0.05）。見表2。

2.3 眼科檢查結果與炎癥因子相關性分析

Spearman相關分析顯示，眼科檢查結果（OSDI、SⅠt、BUT和熒光素染色評分）均與炎癥因子（外周血和眼淚中IL-6、IL-1β和TNF-α水平）顯著相關，其中，SⅠt和BUT與炎癥因子（外周血和眼淚中IL-6、IL-1β和TNF-α水平）呈負相關，而OSDI評分和熒光素染色評分與炎癥因子（外周血和眼淚中IL-6、IL-1β和TNF-α水平）呈正相關。見表3。

2.4 干眼相關因素的單因素分析

單因素分析顯示，高血壓?。é?=15.73，P＜0.01）、糖尿?。é?=13.37，P＜0.01）、沙眼（χ2=14.67，P＜0.01）、結締組織病（χ2=7.43，P＜0.01）、絕經后雌激素治療（χ2=3.13，P＜0.1）、視屏終端綜合征（χ2= 12.91，P＜0.01）、服用抗組胺藥（χ2=12.38，P＜0.01）、使用角膜接觸鏡（χ2=3.17，P＜0.1）和長期濫用滴眼液（χ2=10.48，P＜0.01）均符合多因素Logistic回歸分析的納入條件。見表4。

表1 兩組眼科檢查結果比較［M（Q25，Q75）］

表2 兩組外周血和眼淚中炎癥因子水平比較（）

表2 兩組外周血和眼淚中炎癥因子水平比較（）

注：與B組相比，*P＜0.05；IL-6：白細胞介素-6；IL-1β：白細胞介素-1β；TNF-α：腫瘤壞死因子-α

組別IL-6（μg/L）外周血眼淚IL-1β（μg/L）外周血眼淚TNF-α（ng/L）外周血眼淚A組（n=48）B組（n=96）100.55±13.56*32.72±13.11 22.06±7.68*8.06±5.99 38.56±8.67*10.22±8.17 132.22±11.05*14.12±10.12 38.56±20.11*27.04±15.64 708.26±100.24*20.12±10.12

表3 眼科檢查結果與炎癥因子相關性分析

表4 干眼相關因素的單因素分析［n（%）］

2.5 干眼相關因素的多因素Logistic回歸分析

以單因素分析P＜0.1的因素為自變量，以干眼為因變量，進行多因素Logistic回歸分析，結果顯示，糖尿病、沙眼、視屏終端綜合征和服用抗組胺藥為干眼的獨立危險因素（均P＜0.05）。見表5。

表5 干眼相關因素的多因素Logistic回歸分析

3 討論

IL-6、IL-1β和TNF-α是單核巨噬細胞等產生的體內重要炎癥因子，均可通過激活單核細胞和中性粒細胞等促進局部白細胞聚集，引起炎性反應［5-6］。A組血液與眼淚中炎癥因子（IL-6、IL-1β和TNF-α）的表達均明顯強于B組（均P＜0.05），這與北京等地報道的類似［2，7-9］，提示炎癥在干眼發病中起著重要作用，其原因可能與干眼患者眼表常存在免疫調節機制紊亂有關［10］。國外也證實了眼表上皮自身反應性T細胞浸潤及前炎癥因子的高表達所致的炎性反應是導致干眼發病及病情進展的關鍵因素［11］。

IL-6、IL-1β和TNF-α均與眼科檢查結果相關，其中與SⅠt和BUT呈負相關，而與熒光素染色評分呈正相關，這與Boehm等［12］報道類似，提示IL-6、IL-1β和TNF-α可反映淚膜的穩定性、淚液動力學和眼表完整性，也參與了淚膜穩定性下降和眼表損害等過程，其表達水平變化反映了干眼的進展過程［13］。IL-6、IL-1β和TNF-α與OSDI評分呈正相關，提示IL-6、IL-1β和TNF-α也可反映干眼患者的癥狀和體征。

本研究顯示，糖尿病是干眼的獨立危險因素，其原因可能如下：高糖狀態可導致糖尿病患者的角膜感覺神經障礙，造成眼淚放射的傳入路徑受阻，降低三叉神經對角膜的營養作用，同時可破壞角膜上皮的屏障作用和導致杯狀細胞減少從而減低眼表面親水性。高糖狀態也可導致糖尿病患者的上皮剝脫，角膜知覺減退，瞬目減少和淚液蒸發增加等［14-15］。此結果與廣東省惠東縣報道一致［16］，但與新疆喀什地區報道不同［14］，原因可能與各地區的研究對象、環境、研究手段和醫療條件等不同有關。沙眼是干眼的獨立危險因素，這與劉菲菲等［17］報道一致，原因可能與沙眼可導致淚液分泌異常有關。視頻終端綜合征患者常存在屏幕放置距離太近、工間休息時間太少和視覺常處于陰暗環境等情況［18］，可能導致干眼，該結果與德州市和惠東縣的研究結果一致［16，19］。服用抗組胺藥是干眼的獨立危險因素，其原因可能與抗組胺藥物是H1或H2受體拮抗劑，有些能通過血液循環穿透淚腺，影響毒蕈堿活動，減少淚液中水液層和杯狀細胞的分泌有關［20-21］。值得注意的是，抗組胺藥若與某些藥物（例如抗鎮靜藥、鼻血管收縮藥等）聯合應用，可加重干眼癥狀［21］，臨床中應盡可能避免此情況出現。值得一提的是，高血壓、結締組織病、絕經后雌激素治療、使用角膜接觸鏡和長期濫用滴眼液在本研究中均未顯示為干眼的獨立危險因素，這與其他地區報道不同［19-20］，提示干眼獨立危險因素有地區差異性，原因可能與我國幅員廣闊，不同地區的遺傳因素、生活環境等存在差異有關［20］，臨床工作者應注意本地區的干眼獨有危險因素，采取有效應對措施。

綜上所述，IL-6、IL-1β和TNF-α與干眼病情關系密切，而干眼的危險因素眾多，鑒于陜北地區處于干燥風沙地帶，干眼患者常見，臨床應關注干眼的危險因素，特別對于有獨立危險因素的的患者，應采取合理措施干預和防治干眼。

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Study on the inflammatory factor exPression level and risk factors of Patients with dry eye in outPatient clinic

LI HaihuiWANG YanrongLIU YangGU Lili
Department of Ophtha1mo1ogy，the Peop1e's Hospita1 of Yan'an City，Shaanxi Province，Yan'an716000，China

Objective To investigate the the expression 1eve1 of inf1ammatory factor in dry eye patients of outpatient c1inic and its risk factors.Methods 48 patients with dry eye（group A）and 96 vo1unteers（group B）were enro11ed from Ophtha1mo1ogy C1inic of the Peop1e's Hospita1 of Yan'an City from June 2014 to March 2016.The test of ocu1ar surface disease index（OSDI）questionnaire，tear fi1m breakup time（BUT），sehirmerⅠtest（SⅠt）and cornea1 f1uorescence staining test were performed.Inter1eukin-6（IL-6），inter1eukin-1beta（IL-1β）and tumor necrosis factor-a1pha（TNF-α）in serum and tear were detected using enzyme-1inked immunosorbent assay.Data was ana1yzed by the method of mu1-tifactor Logistic regression ana1ysis and Spearman rank corre1ation ana1ysis.Results The concentrations of IL-6，IL-1β and TNF-α in serum and tear in group A were significant1y higher than those in group B（P＜0.05）.IL-6，IL-1β and TNF-α 1eve1s in serum and tear were a11 corre1ated with the score of OSDI，BUT，SⅠt and cornea1 f1uorescence staining test resu1ts（rIL-6-b1ood=0.91，-0.94，-0.93，0.61；rIL-6-tear=0.86，-0.81，-0.77，0.58；rIL-1β-b1ood=0.56，-0.48，-0.71，0.62；rIL-1β-tear=0.55，-0.43，-0.69，0.53；rTNF-α-b1ood=0.53，-0.49，-0.45，0.51；rTNF-α-tear=0.51，-0.47，-0.44，0.50；a11 P＜0.05）. Mu1ti-factor Logistic regression ana1ysis showed that diabetes（OR=0.313，95%CI=0.118-0.831，P=0.020），trachomatis（OR=0.197，95%CI=0.066-0.587，P=0.004），visua1 disp1ay termina1 syndrome（OR=0.072，95%CI=0.007-0.774，P= 0.030）and taking antihistamines（OR=0.142，95%CI=0.025-0.796，P=0.027）were independent risk factors of dry eye. Conclusion The concentrations of TNF-α，IL-1β and IL-6 in serum and tear are c1ose1y re1ated to dry eye condition. Many risk factors contributed to dry eye in Yan'an District.Pertinence measures shou1d be taken to prevent the disease.

Inter1eukin-6；Inter1eukin-1beta；Tumor necrosis factor-a1pha；Dry eye；Risk factors

R770.4

A

1674-4721（2016）07（c）-0127-04

2016-04-22本文編輯：程銘）

陜西省衛生科研項目（E8）；陜西省延安市科學技術研究發展計劃項目（2014KW-12）。