尋常型銀屑病患者外周血中白介素-35的檢測

林 玲 張麗丹 劉煒鈺 李 薇 龔葉青 羅 權

尋常型銀屑病患者外周血中白介素-35的檢測

林 玲 張麗丹 劉煒鈺 李 薇 龔葉青 羅 權

目的: 檢測尋常型銀屑病患者外周血中白細胞介素35(IL-35)水平。方法: 應用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測30例尋常型銀屑病患者外周血清中IL-35的水平。結果: 與正常人對照組相比，尋常型銀屑病患者血漿IL-35水平顯著降低，進行期患者組顯著低于靜止期患者組(P＜0.05)。IL-35血清水平與尋常型銀屑病嚴重程度指數呈負相關(P＜0.05)。結論: IL-35在尋常型銀屑病的發病中可能起重要作用。

銀屑病； 白細胞介素35

銀屑病是多基因遺傳背景下T細胞失常的免疫性疾病，目前其發病機制尚不清楚。有研究表明T細胞活化在銀屑病發病的免疫過程中起重要作用，在T細胞的調控中，調節性T細胞(Treg)的作用是研究的熱點之一[1]。IL-35是2007年發現的IL-12家族的一個新成員，是由EB病毒誘導基因3(epstein-barr virus-induced gene 3，EBI3)亞基和p35亞基結合而成的異二聚體[2，3]。研究表明IL-35是與Treg有密切關系的新型免疫調控分子，具有重要的免疫調節功能。本研究通過對尋常型銀屑病患者血清中IL-35表達水平進行分析，探討IL-35在尋常型銀屑病發病中的可能作用及其臨床意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象 2012年12月至2013年10月在我所門診就診的尋常型銀屑病患者共30例。病例篩選標準:根據《臨床皮膚病學》[4]診斷標準臨床確診者，其中有20例經病理活檢明確診斷；所有銀屑病患者近2個月內未系統應用維A酸、糖皮質激素、免疫抑制劑等藥物；2周內未使用任何外用藥物。病例中男20例，女10例，年齡25～70歲，平均40歲。根據《臨床皮膚病學》[4]分期標準患者進行期18例，靜止期12例，病程6個月～10余年。銀屑病患者的皮損面積和嚴重程度PASI評分為7.6～30.4分，平均(12.06 ±3.48)分。另取30名正常人血清作為對照組，無免疫性疾病及系統性疾病，無銀屑病家族史。正常人對照組與銀屑病患者組在性別及年齡上無統計學差異。

1.2 標本收集 患者自肘靜脈抽血5 mL，置于高壓消毒的試管中，2000 r/min離心15 min，小心吸取上層血清置-20℃冰箱保存備用。對照組取正常人血清按同樣條件保存備用。

1.3 檢測方法 采用雙抗體夾心酶聯免疫技術(ELISA)方法，具體操作嚴格按說明書進行。IL-35試劑盒購自武漢博士德生物工程公司。

1.4 統計學方法 統計學處理利用SPSS 11.0軟件包進行分析，各組間均數比較采用t檢驗。銀屑病患者血清IL-35與尋常型銀屑病嚴重指數PASI評分之間相互關系采用直線相關分析。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 血清IL-35濃度 尋常型銀屑病患者血清IL-35的水平低于對照組(P＜0.01)。進行期與靜止期的尋常型銀屑病患者血清IL-35水平差異有顯著性(P＜0.05)，見表1。

表1 各組血清中IL-35水平比較 (ng/mL)

2.2 血清IL-35水平與銀屑病皮損面積和嚴重程度PASI評分的關系 尋常型銀屑病患者血清中IL-35水平與銀屑病嚴重程度PASI評分呈負相關，相關系數為:0.437(P＜0.05)。

3 討論

-35血清濃度低于靜止期組患者(P＜0.05)，提示IL-35作為一種抑制性細胞因子，可能在銀屑病發病過程中起了抗炎作用。隨病情控制，銀屑病靜止期患者組IL-35水平逐漸上升至正常，提示IL-35水平隨著銀屑病病情的緩解而恢復。相關性分析顯示尋常型銀屑病患者血清中IL-35水平與銀屑病嚴重程度評分PASI呈負相關，提示尋常型銀屑病患者血清中IL -35水平與銀屑病病情輕重有關，這一結果可望成為評估尋常型銀屑病嚴重程度的指標。我們的研究結果提示IL-35可能參與了尋常型銀屑病的發病機制，在尋常型銀屑病的發病中可能發揮免疫調節作用，具體作用機制還有待進一步研究。

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(收稿:2016-05-14 修回:2016-07-07)

目前普遍認為銀屑病發病是一種多基因遺傳多因素作用參與的T細胞免疫介導的多種致炎因子共同參與的炎癥性、增生性皮膚病。既往研究表明，T細胞在銀屑病發病的免疫過程中起到重要作用，研究發現Th1細胞分化偏態性，以IFN-γ為代表的Th1細胞因子在銀屑病發病機制中起重要作用[5]。近年進一步研究發現兩種與Th1細胞和Th2細胞不同的獨立T細胞亞群Th17與Treg細胞在銀屑病發病中亦起著重要作用，介導一系列炎癥反應的Th17細胞與介導免疫耐受的Treg都來源于初始T細胞，Th17是產生IL-17的T細胞亞群，Treg則在體內執行免疫抑制功能，限制過度及錯誤的免疫應答，兩者功能和分化過程相互對抗，在正常情況下兩者保持平衡，有利于機體的免疫穩定狀態的維持。Treg細胞作用機制主要包括通過分泌細胞因子IL-10、TGF-β和細胞間直接接觸介導免疫抑制[6]。IL-35是近年來新發現的具有免疫抑制功能的細胞因子，為白介素-12家族新成員，它與TGF-β、IL-10一樣，為CD4+CD25+Treg細胞發揮免疫調節作用所依賴的細胞因子，在CD4+CD25+Treg細胞參與下通過直接作用于效應性T細胞或者通過誘導產生IL-10誘導調節性T細胞，對效應性T細胞和炎性細胞因子分泌產生抑制作用，同時IL-35能顯著抵制Th17細胞的分化和功能，從而影響IL-17的水平和作用[7，8]。我們研究結果顯示，尋常型銀屑病患者血清IL-35明顯低于正常對照組(P＜0.01)，說明血清中IL-35水平變化與銀屑病發病有著密切關系。我們的實驗結果還顯示在不同病期IL -35血清濃度差異有顯著性，其中進行期組的患者IL

Detection of interleukin-35 in serum of the patients w ith psoriasis vulgaris

LIN Ling，ZHANG Lidan，LIUWeiyu，LIWei，GONG Yeqing，LUO Quan. Guangzhou Institute ofDermatology，Guangzhou 510095，China Corresponding author:LUO Quan，E-mail:luoquan666@126.com

Objective:To detect serum level of IL-35 in the patients with psoriasis vulgaris.M ethods: Serum level of IL-35 was measured by double antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA)in 30 patients with psoriasis vulgaris.Results:The serum level of IL-35 was significantly higher than that in normal controls(P＜0.01)，and there was significant difference between the active stage and the resting stage of the disease(P＜0.05).The serum level of IL-35 was negatively correlated to PASI score. Conclusion:The IL-35 may play an important rale in the pathogenesis of psoriasis vulgaris.

psoriasis；IL-35

廣東省衛生廳醫學科研基金(編號:A2013545)廣州市醫藥衛生科研項目(編號:20131A011129)

廣州市皮膚病防治所，廣東廣州，510095

羅權，E-mail:luoquan666@126.com