鮑曼不動桿菌生物被膜與耐藥性的相關性分析

賴其偉，黃麗芳

(韶關市第一人民醫院檢驗科，廣東韶關 512000)

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·論 著·

鮑曼不動桿菌生物被膜與耐藥性的相關性分析

賴其偉，黃麗芳

(韶關市第一人民醫院檢驗科，廣東韶關 512000)

目的 探討鮑曼不動桿菌生物被膜與其耐藥性的相關性。方法 對2011年6月至2014年8月該院分離的鮑曼不動桿菌臨床分布、生物膜形成情況及生物膜形成與耐藥性的關系進行研究。結果 標本來源主要為痰液、分泌物、腹腔積液等；強度為“+”生物膜菌株56株，占66.67%(56/84)；強度為“-”生物膜菌株3株，占3.57%(3/84)，所占比例最低，96.43%鮑曼不動桿菌具有較強的生物膜形成能力；具有生物膜的菌株耐藥性明顯高于不具有生物膜的菌株，差異有統計學意義(P<0.05)，不同強度生物膜菌株的耐藥性比較差異無統計學意義(P>0.05)。結論 鮑曼不動桿菌生物膜與其耐藥性密切相關，但不同強度生物膜與其耐藥性無明顯相關性，值得對生物膜與其耐藥性的關系進行更加深入的研究。

鮑氏不動桿菌； 生物膜； 藥物耐受性

鮑曼不動桿菌是一種在周圍環境和人體皮膚表面常見的革蘭陰性菌，也是一種常見條件致病菌[1]，該菌可引起醫院獲得性肺炎、傷口感染、菌血癥等，臨床研究發現，隨著臨床用藥的增加鮑曼不動桿菌耐藥性有逐漸升高的趨勢，且這種耐藥菌在全球各地的瘟疫中出現[2-3]，給人類對于該菌引起的感染的治療帶來了極大困難，鮑曼不動桿菌已成為臨床治療的一個難題，因此，尋找鮑曼不動桿菌的耐藥性的相關因素并采取有效措施降低其耐藥性具有十分重要的意義。越來越多的研究發現，鮑曼不動桿菌的耐藥性與其細菌的生物被膜有著密切的關系[4-5]，因此，對鮑曼不動桿菌耐藥性與生物被膜關系的研究成為一個重要的研究課題。本研究選擇的對象為2011年6月至2014年8月本院臨床送檢標本中分離得到的鮑曼不動桿菌，對鮑曼不動桿菌的臨床分布、生物膜形成情況及生物膜形成與耐藥性的關系進行研究，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究選擇的對象為2011年6月至2014年8月本院臨床送檢標本中分離得到的鮑曼不動桿菌，主要來自痰液、血液、下呼吸道分泌物、導管、膽汁等。科室主要包括呼吸科、腦外科、重癥科、急診科、骨科、腫瘤科、神經內科、消化科、心外科等。

1.2 生物膜的培養 將對數期生長的鮑曼不動桿菌接種到96孔板中，在培養箱中培養24 h。采用結晶紫染色法測定生物膜形成能力，將接種的96孔板取出，用磷酸鹽緩沖液(PBS)洗凈，加入結晶紫染色1 min，洗去染液，晾干后用酶標儀在590 nm處測定其吸光度值，判斷細菌生物膜形成能力。

1.3 細菌耐藥性研究 所用的抗菌藥物為哌拉西林、慶大霉素、頭孢他啶、妥布霉素、環丙沙星、氧氟沙星、氨曲南、亞胺培南、左氧氟沙星、頭孢哌酮/舒巴坦及多黏菌素B(后2種藥常在鮑曼不動桿菌感染時做藥敏試驗)，上述藥品均由中國藥品生物制品檢定所提供。通過上述抗菌藥物的藥敏紙片試驗判斷鮑曼不動桿菌對上述抗菌藥物的耐藥性，主要分為耐藥、敏感和中介。

1.4 觀察指標 本研究的觀察指標主要包括鮑曼不動桿菌在臨床標本的分布情況、鮑曼不動桿菌生物膜形成能力情況分布、鮑曼不動桿菌生物膜形成能力與其耐藥性的關系等。

2 結 果

2.1 鮑曼不動桿菌標本分布情況 痰液標本中分離鮑曼不動桿菌62株，占73.81%；氣管和喉中分離鮑曼不動桿菌數量最少，均占1.19%。見表1。

2.2 鮑曼不動桿菌生物膜形成能力分布情況 強度為“+”生物膜菌株56株，占66.67%，所占比例最高；強度為“-”生物膜菌株3株，占3.57%，所占比例最低；96.43%鮑曼不動桿菌具有較強生物膜形成能力。見表2。

表1 鮑曼不動桿菌標本分布情況

表2 鮑曼不動桿菌生物膜形成能力分布情況(n=84)

2.3 鮑曼不動桿菌生物膜形成能力與其耐藥性的相關性 具有生物膜菌株的耐藥性明顯高于不具有生物膜菌株，差異有統計學意義(P<0.05)；不同強度生物膜菌株耐藥性比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表3 鮑曼不動桿菌生物膜形成能力與其耐藥性的相關性(%)

3 討 論

鮑曼不動桿菌是一種在自然界中廣泛存在的革蘭陰性菌，該細菌是一種常見不動桿菌，對營養要求不高，主要存在于生活中的水和土壤里，也存在于健康人的呼吸道、泌尿道及胃腸道中，該菌為條件致病菌[6]，在健康者中其致病能力較低，但在醫院等醫療環境中其存活的周期很長，鮑曼不動桿菌通過吸附在醫療器械上從而引起不同組織部位的感染[7]。臨床對于鮑曼不動桿菌的治療多采用廣譜抗生素治療，但是抗生素的長期應用使得患者的免疫力變低，反而導致鮑曼不動桿菌感染率升高，究其原因主要與鮑曼不動桿菌在長期接觸抗生素的過程中產生的多藥耐藥性有關，在世界暴發的流行菌株感染中鮑曼不動桿菌都扮演著重要的角色，該細菌的耐藥性增加了臨床對其治療的難度，加重了患者的負擔，因此對鮑曼不動桿菌耐藥性相關因素的研究具有十分重要的臨床意義。

目前國內外對鮑曼不動桿菌的耐藥性研究較多，其中研究最多的是關于細菌的生物膜與其耐藥性的關系。在本研究對本院分離得到的鮑曼不動桿菌的生物膜形成能力的測定及生物膜與耐藥性的關系測定中發現，具有生物被膜的鮑曼不動桿菌的耐藥性顯著高于不具有生物被膜的細菌的耐藥性，且不同強度的生物被膜的鮑曼不動桿菌耐藥性大小無明顯差異。在鮑曼不動桿菌中生物膜是其一種特殊生長狀態的體現，生物膜在鮑曼不動桿菌耐藥機制的形成中具有非常重要的作用，細菌生物膜可以使得細菌逃避免疫系統的攻擊，同時生物膜的存在還會導致該細菌的反復感染，增加治療的難度[8]。目前對于生物膜的耐藥機制有以下幾種可能的解釋：(1)生物膜的存在對抗菌藥物的滲透有限制作用，使達到生物膜內的抗菌藥物濃度顯著降低[9]；(2)細菌生物膜內營養的缺乏使細菌生長與代謝較游離態緩慢，對常見抗生素不敏感；(3)生物膜內細菌的群體效應調節某些基因的表達而導致耐藥；(4)外排泵的表達增強，能主動將抗生素泵出細菌外[10-11]。本研究結果也表明，鮑曼不動桿菌生物膜情況對其耐藥性具有直接影響。

綜上所述，通過本院分離得到的鮑曼不動桿菌的分布及耐藥性研究，可以總結出生物被膜與鮑曼不動桿菌耐藥性存在明顯相關性，通過抗菌藥物的藥敏試驗可以得到鮑曼不動桿菌對不同抗菌藥物的耐藥情況，因此，臨床可以根據致病菌的耐藥情況，合理選擇抗菌藥物，盡量減少耐藥情況的發生。且具有不同強度生物被膜的鮑曼不動桿菌其耐藥性大小無明顯差異，具體機制尚有待于進一步研究。

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Acinetobacter baumannii biofilm and antimicrobial resistance correlation Analysis

LaiQiwei，HuangLifang

(DepartmentofLaboratory，theFirstPeople′sHospitalofShaoguanCity，Shaoguan,Guangdong512000，China)

Objective To investigate the correlation between Acinetobacter baumannii biofilms and their drug resistance.Methods The clinical distribution,biofilm formation and the correlation between biofilm formation and drug resistance of Acinetobacter baumannii isolated in the hospital from June 2011 to August 2014 were studied.Results The types of specimens from which the Acinetobacter baumannii stains were isolated were mainly sputum,secretion and peritoneal effusion.There were 56 strains with "+" biofilm intensity accounting for 66.67%(56/84),and 3 strains with "-" biofilm intensity accounting for 3.57%(3/84) which was relatively lower.96.43% of the Acinetobacter baumannii had strong ability of biofilm formation.The strains with the ability to form biofilm had stonger drug resistance than those without the ability(P<0.05)，no significant difference of drug resistance was observed among strains with biofilm of different intensity(P>0.05).Conclusion Acinetobacter baumannii biofilms and their drug resistance are closely related，but biofilms intensity are not correlated with the drug resistance.Therefore,further study needs to be done on the relationship between biofilms of Acinetobacter baumannii and the drug resistance.

Acinetobacter baumannii； biofilms； drug resistance

賴其偉，男，副主任技師，主要從事臨床免疫和微生物檢驗的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.02.004

A

1673-4130(2016)02-0153-02

2015-08-12)