化學(xué)發(fā)光法與PCR法聯(lián)合檢測(cè)孕婦單純皰疹病毒感染率分析

倪雪梅，朱巧英，李 寧，成春嵐

(四川省婦幼保健院檢驗(yàn)科，四川成都 610036)

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·論 著·

化學(xué)發(fā)光法與PCR法聯(lián)合檢測(cè)孕婦單純皰疹病毒感染率分析

倪雪梅，朱巧英，李 寧，成春嵐

(四川省婦幼保健院檢驗(yàn)科，四川成都 610036)

目的 對(duì)化學(xué)發(fā)光法與聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)聯(lián)合檢測(cè)孕婦單純皰疹病毒(HSV)的感染率進(jìn)行分析，為臨床診斷提供依據(jù)。方法 采集該院孕期常規(guī)建卡的孕婦血清，用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清HSVIgM與IgG抗體水平；對(duì)其中任一項(xiàng)結(jié)果陽性者取宮頸分泌物進(jìn)行HSVDNA定性檢測(cè)。結(jié)果HSV1DNA陽性率為0.5%(7/1 422)，HSV2DNA陽性率為1.1%(16/1 422)。HSVIgM和IgG同時(shí)陽性者HSV1DNA陽性率為0.4%(4/1 008)，HSV2DNA陽性率為0.6%(6/1 008)；僅HSVIgM陽性者HSV1DNA陽性率為0.8%(1/130)，HSV2DNA陽性率為3.1%(4/130)；僅HSVIgG陽性者HSV1DNA陽性率為0.7%(2/284)，HSV2DNA陽性率為2.1%(6/284)。3種情況HSV抗體陽性者HSV1DNA陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而HSV2DNA陽性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 在孕期對(duì)HSV抗體進(jìn)行常規(guī)檢查，對(duì)抗體陽性者進(jìn)行DNA檢測(cè)，能提高診斷準(zhǔn)確率。盡量做到早期篩查、早期發(fā)現(xiàn)、及早對(duì)孕婦進(jìn)行治療。

化學(xué)發(fā)光測(cè)定法； 聚合酶鏈反應(yīng)； 單純皰疹病毒屬/分離和提純； 孕婦

單純皰疹病毒(HSV)屬皰疹病毒科，有包膜雙鏈的DNA病毒。HSV有2種血清型，即HSV1和HSV2，其所致感染極為常見，且癥狀多樣。HSV1潛伏于三叉神經(jīng)節(jié)內(nèi)的神經(jīng)元細(xì)胞中。其原發(fā)或激活感染主要為腰以上部位，由口腔、呼吸道傳播。而HSV2主要潛伏于脊骶神經(jīng)節(jié)內(nèi)的神經(jīng)元細(xì)胞內(nèi)，主要感染生殖器和腰以下部位，傳播途徑以性傳播為主。

HSV的宿主范圍較廣，幾乎可以感染各種胚胎和新生動(dòng)物來源的上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。HSV感染后常潛伏于神經(jīng)節(jié)中，極易復(fù)發(fā)和傳播，近年來其感染趨勢(shì)在全球迅速增加。隱性患者及無癥狀者是該病的主要傳染源，及時(shí)發(fā)現(xiàn)并采取措施是預(yù)防該病傳播和及時(shí)治療的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。特別是孕婦HSV的早期檢測(cè)可預(yù)防因感染而導(dǎo)致的新生兒死亡或神經(jīng)系統(tǒng)功能受損[1]。孕期HSV抗體檢測(cè)很有必要，作者對(duì)2014年1～12月于本院產(chǎn)科建卡的孕婦進(jìn)行HSV抗體檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，HSV IgM或IgG抗體陽性標(biāo)本1 422例，取宮頸分泌物進(jìn)行HSV DNA檢測(cè)，并進(jìn)行陽性率分析，旨在了解孕期HSV感染情況并為臨床診斷提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 對(duì)2014年1～12月于本院產(chǎn)科建卡的孕婦進(jìn)行HSV抗體檢測(cè)，將檢測(cè)結(jié)果為HSV IgM或IgG 陽性者1 422例作為研究對(duì)象。其中HSV IgM和IgG同時(shí)陽性者1 008例，僅HSV IgM陽性者130例，僅HSV IgG陽性者284例。

1.2 方法 采用索林(Dia Sorin)LIAISON 儀器，應(yīng)用化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)血清HSV IgM 和IgG 抗體，其中任一項(xiàng)抗體為陽性者取宮頸分泌物采用羅氏 Light Cycler儀器檢測(cè) HSV DNA。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以率或構(gòu)成比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

HSV1 DNA陽性率為0.5%(7/1 422)，HSV2 DNA陽性率為1.1%(16/1 422)。HSV IgM和IgG同時(shí)陽性者HSV1 DNA陽性率為0.4%(4/1 008)，HSV2 DNA陽性率為0.6%(6/1 008)；僅HSV IgG陽性者HSV1 DNA陽性率為0.7%(2/284)，HSV2 DNA陽性率為2.1%(6/284)；僅HSV IgM陽性者HSV1 DNA陽性率為0.8%(1/130)，HSV2 DNA陽性率為3.1%(4/130)。3種情況HSV抗體陽性者HSV1 DNA陽性率比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而HSV2 DNA陽性率比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 HSV抗體陽性與HSV DNA陽性結(jié)果比較[n(%)]

*：P<0.05，與HSV-IgM和IgG同時(shí)陽性比較。

3 討 論

HSV1感染一般發(fā)生于眼唇、口腔、腦和腰部以上皮膚，HSV2感染較常見于子宮頸、外生殖器及腰部以下皮膚[2]。孕婦感染HSV可使胎兒產(chǎn)生先天性感染，誘發(fā)流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎、畸形等[3-4]。因此，懷孕期間應(yīng)將HSV作為常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目，對(duì)陽性患者早做處理，即產(chǎn)前診斷很有必要。產(chǎn)前診斷是指在出生前對(duì)胚胎或胎兒的發(fā)育狀態(tài)、是否患有疾病等進(jìn)行檢測(cè)診斷，產(chǎn)前診斷是圍生期保健的重要組成部分，是有效提高我國人口素質(zhì)、減少各種缺陷性疾病發(fā)生的重要手段[5]。

HSV主要經(jīng)產(chǎn)道感染胎兒黏膜進(jìn)而感染胎兒。胎兒及新生兒感染HSV后預(yù)后較差，有研究表明，在原發(fā)感染HSV胎兒中40%出現(xiàn)嚴(yán)重圍產(chǎn)期死亡，而繼發(fā)感染病例圍生期死亡率顯著降低[6]。

孕婦若發(fā)生感染大約在4～7 d時(shí)能檢測(cè)出IgM抗體，是早期發(fā)生感染的指標(biāo)；IgG抗體大約在感染15 d后才出現(xiàn)[7-8]。聯(lián)合IgM和IgG檢測(cè)有利于幫助孕婦查明是最近感染、再次感染、還是既往感染：(1)IgG(+)、IgM(-)說明是既往發(fā)生的感染，孕婦具有一定免疫力；(2)IgG(-)、IgM(+)說明是最近發(fā)生的感染；(3)IgG(+)、IgM(+)說明是既往感染或再次感染；(4)IgG(-)、IgM(-)說明無免疫力，能夠進(jìn)行免疫接種。其中(2)項(xiàng)和(3)項(xiàng)均可表明是最近可能發(fā)生感染，確認(rèn)需要做進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)[9]。

母體HSV1抗體對(duì)胎兒的保護(hù)效應(yīng)顯著弱于HSV2抗體的保護(hù)，妊娠期間激活的HSV1抗體傳播給胎兒的風(fēng)險(xiǎn)顯著高于HSV2[10]。由于化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)的HSV抗體不能區(qū)分HSV1還是HSV2，本院采用PCR檢測(cè)患者宮頸分泌物中HSV DNA，對(duì)HSV種類進(jìn)行鑒別。因采用的標(biāo)本是宮頸分泌物，可能對(duì)HSV1的檢測(cè)陽性率會(huì)偏低一些，但是HSV是作用于神經(jīng)節(jié)，而且主要經(jīng)產(chǎn)道感染胎兒，所以足以達(dá)到檢測(cè)目的。

綜上所述，在臨床工作中對(duì)HSV應(yīng)早期篩查、早期發(fā)現(xiàn)，及早對(duì)孕婦進(jìn)行治療很有必要。如孕婦早期或中期檢測(cè)出HSV DNA陽性時(shí)最好立即終止妊娠；而孕婦處于妊娠晚期或不愿終止妊娠時(shí)應(yīng)主動(dòng)配合檢查，同時(shí)結(jié)合超聲波、羊水穿刺等方式進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，及時(shí)采取適當(dāng)措施。

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The detection of herpes simplex virus infection rate by jointly using chemiluminescence assay and PCR

NiXuemei，ZhuQiaoying，LiNing，ChengChunlan

(DepartmentofClinicalLaboratory，Maternal&ChildHealthHospitalofSichuanProvince，Chengdu，Sichuan610036,China)

Objective Detect the infection rate of herpes simplex virus (HSV) by jointly using chemiluminescence assay and PCR,and provides reference for clinical diagnosis.Methods The serum samples were collected from the pregnant women who had routine examination records in the hospital.Chemiluminescence assay was used to detect HSV IgM and IgG in those samples.Cervical secretions were collected from pregnant women with positive results and qualitatively tested for HSV DNA.Results The positive rate of HSV1 DNA was 0.5%(7/1 422)，the positive rate of HSV2 DNA was 1.1% (16/1 422).For pregnant women whose HSV IgM and IgG were both positive，positive rate of HSV1 DNA was 0.4% (4/1 008) and that of HSV2 DNA was 0.6%(6/1 008);for those who only had HSV IgM positive，the positive rate of HSV1 DNA was 0.8%(1/130)，and that of HSV2 DNA was 3.1% (4/130);for those who only had HSV IgG positive，the positive rate of HSV1 DNA was 0.7%(2/284)，that of HSV2 DNA was 2.1%(6/284).Among those three HSV antibody positive cases,the difference in HSV1 DNA positive rate was not statistically significant(P>0.05)，while the difference in HSV2 DNA positive rate was statistically significant(P<0.05).Conclusion The test of HSV antibodies during pregnancy can be used as a routine test，and HSV DNA test can be used as further test for those with HSV antibody positive，which could improve the accuracy of diagnosis.Early screening，detection，and treatment are important for pregnant women with HSV infection.

chemiluminescent measurements； polymerase chain reaction； simplexvirus/isolation & purification； pregnant women

倪雪梅，女，主管技師，主要從事臨床及免疫學(xué)檢驗(yàn)的研究。

10.3969/j.issn.1673-4130.2016.02.006

A

1673-4130(2016)02-0157-02

2015-08-17)