水中Mn(Ⅱ)對(duì)大菱鲆幼魚(yú)生長(zhǎng)及堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶活性的影響

何忠偉，宮春光，殷 蕊，孫桂清，于 騫，符冬林

( 1. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 海洋學(xué)院，河北 秦皇島 066003； 2. 河北省海洋與水產(chǎn)科學(xué)研究院，河北 秦皇島 066200 )

水中Mn(Ⅱ)對(duì)大菱鲆幼魚(yú)生長(zhǎng)及堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶活性的影響

何忠偉1，宮春光1，殷 蕊2，孫桂清2，于 騫1，符冬林1

( 1. 河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 海洋學(xué)院，河北 秦皇島 066003； 2. 河北省海洋與水產(chǎn)科學(xué)研究院，河北 秦皇島 066200 )

水溫14～16 ℃下，將初始體質(zhì)量為(5.0±1.0) g的大菱鲆養(yǎng)殖在40 L水體的水族箱中，研究在不同Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度(0.04、0.08、0.16、0.32、0.64、1.28、2.56、5.12、10.24 mg/L)下大菱鲆的生長(zhǎng)及堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶的活性。結(jié)果表明，當(dāng)水體中Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度低于2.56 mg/L時(shí)，魚(yú)的生長(zhǎng)較快，其中Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度為0.64 mg/L時(shí)生長(zhǎng)最快；當(dāng)Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度低于0.64 mg/L時(shí)，大菱鲆肝臟的堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶活性隨著Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度的提高而增加，當(dāng)Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度超過(guò)0.64 mg/L時(shí)，堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶的活性急劇下降；0.64 mg/L組的堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶的活力均較高，隨著Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度增加，堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶的活力先增后減；據(jù)劑量效應(yīng)推測(cè)，0.64 mg/L為Mn(Ⅱ)表現(xiàn)出毒性作用的臨界質(zhì)量濃度。

錳；大菱鲆幼魚(yú)；超氧化物歧化酶；堿性磷酸酶

大菱鲆(Scophthalmusmaximus)是我國(guó)北方重要的海水養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)，主要以“地下井水+自然海水”的模式進(jìn)行養(yǎng)殖，而我國(guó)大菱鲆的主要養(yǎng)殖區(qū)山東、河北等地的地下水中常含有大量的錳[1]，在缺氧的地下水環(huán)境中錳通常以二價(jià)形式存在，即Mn(Ⅱ)。這些地區(qū)養(yǎng)殖的大菱鲆經(jīng)常出現(xiàn)原因不明的生長(zhǎng)緩慢、體質(zhì)差、易患病、死亡率高等現(xiàn)象，分析可能與養(yǎng)殖用水中含有較多的Mn(Ⅱ)有關(guān)。錳廣泛地存在于自然界中，是許多種酶的激活劑，對(duì)動(dòng)物骨骼的發(fā)育、脂肪代謝以及生殖能力具有重要作用，但水中錳含量過(guò)高對(duì)水生動(dòng)物有一定的危害[2]。

堿性磷酸酶是一種包含鋅離子和鎂離子的非特異性磷酸水解酶，催化磷酸單脂水解及磷酸基團(tuán)的轉(zhuǎn)移反應(yīng),對(duì)鈣質(zhì)吸收、骨骼生成、形成甲殼素均具有重要的作用[3]。超氧化物歧化酶在機(jī)體中承擔(dān)維護(hù)生物膜的完整性，清除氧自由基、保護(hù)細(xì)胞免受氧化損傷的作用，而錳是其重要的活性組成部分，其生物功能不能被其他的金屬離子所代替[4]。錳缺乏時(shí)，此酶的活性降低，抗氧化能力減弱；但當(dāng)錳過(guò)量時(shí)，則可抑制超氧化物歧化酶的活性，使其對(duì)超氧陰離子的歧化作用減弱而在體內(nèi)堆積，引起脂質(zhì)過(guò)氧化物增加，使細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，正常的生理功能受損，線粒體腫脹、解體，溶酶體破壞，神經(jīng)細(xì)胞變性、壞死，神經(jīng)遞質(zhì)代謝障礙。有關(guān)錳對(duì)超氧化物歧化酶影響的研究主要集中在人和鼠類(lèi)上，而對(duì)水生動(dòng)物的研究較少。

我國(guó)現(xiàn)行的漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)(GB 11607—1989)[5]和海水養(yǎng)殖用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)(NY 5052—2001)[6]均未對(duì)水中錳的含量做出具體限制要求。目前有關(guān)水中Mn(Ⅱ)對(duì)大菱鲆的毒性作用的研究尚未見(jiàn)報(bào)道，Mn(Ⅱ)對(duì)大菱鲆生長(zhǎng)及免疫力的影響尚不得知。筆者研究了養(yǎng)殖用水中不同含量的Mn(Ⅱ)對(duì)大菱鲆幼魚(yú)的生長(zhǎng)及堿性磷酸酶與超氧化物歧化酶活性的影響，以評(píng)價(jià)水中Mn(Ⅱ)對(duì)大菱鲆的毒性，尋找其安全用量，為大菱鲆的養(yǎng)殖生產(chǎn)提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與培育

試驗(yàn)用大菱鲆幼魚(yú)初始體質(zhì)量為 (5.0±1.0) g，購(gòu)自山海關(guān)某大菱鲆養(yǎng)殖場(chǎng)，暫養(yǎng)7 d后開(kāi)始試驗(yàn)。試驗(yàn)期間，自然光照，水溫14～16 ℃，溶解氧7.2～7.8 mg/L，pH 7～7.8，鹽度30。每日8:00和17:00投喂適口的大菱鲆餌料(廣東東丸海水魚(yú)種苗飼料)，18：00時(shí)吸底、換水90%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

向水中加入適量的MnCl2，使9個(gè)試驗(yàn)組水體中Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度分別達(dá)到0.04、0.08、0.16、0.32、0.64、1.28、2.56、5.12、10.24 mg/L ，設(shè)置1個(gè)空白對(duì)照組。所有試驗(yàn)組均設(shè)置了重復(fù)。每組20尾魚(yú)，養(yǎng)殖在40 L水體的水族箱中。每日18：00吸底、90%換水1 次。試驗(yàn)持續(xù)28 d，試驗(yàn)取樣前，各組均停止投喂24 h。

1.3 組織樣品的采取與制備

在試驗(yàn)的第7、14、21、28 d，每組隨機(jī)抽取魚(yú)3尾，用間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽麻醉后，逐尾測(cè)量體質(zhì)量和體長(zhǎng)；取出肝臟用于制作組織勻漿液。先將肝臟在冰冷的生理鹽水中漂洗，除去表面的血液，用濾紙擦干，稱(chēng)量質(zhì)量并記錄后，按照1∶9(g/mL)的比例，加入9倍體積的生理鹽水，冰水浴條件下手動(dòng)勻漿，3500 r/min冷凍離心10 min，取上清液(即10%的勻漿上清液)，根據(jù)所測(cè)酶的要求用生理鹽水稀釋成不同比例的組織勻漿溶液。

試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)測(cè)各組魚(yú)的體長(zhǎng)、體質(zhì)量及肝質(zhì)量，測(cè)定前24 h停食。計(jì)算下列指標(biāo)：

相對(duì)增長(zhǎng)率/%=(終末體長(zhǎng)-初始體長(zhǎng))/初始體長(zhǎng)×100%

質(zhì)量相對(duì)增加率/%=(終末質(zhì)量-初始質(zhì)量)/初始質(zhì)量×100%

肝質(zhì)量指數(shù)/%= 肝質(zhì)量/體質(zhì)量×100%

1.4 酶活力檢測(cè)方法

采用南京建成生物公司提供的檢測(cè)試劑盒測(cè)定堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶的活力，參照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作和計(jì)算。

堿性磷酸酶活力以每克組織蛋白在37 ℃與底物作用15 min產(chǎn)生1 mg酚為1個(gè)單位(U/g)。超氧化物歧化酶酶活力單位定義為：每毫克組織蛋白在1 mL反應(yīng)液中抑制超氧化物歧化酶率達(dá)50%時(shí)，所對(duì)應(yīng)的超氧化物歧化酶量為一個(gè)亞硝酸鹽單位(NU/mg)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用SPSS 15.0進(jìn)行單因素方差分析，并對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行Duncan多重比較，取顯著性水平為0.05。

2 結(jié) 果

試驗(yàn)期間，對(duì)照組和Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度為2.56 mg/L及其以下質(zhì)量濃度組均未見(jiàn)大菱鲆幼魚(yú)死亡，幼魚(yú)的游泳與攝食也均未出現(xiàn)異常。幼魚(yú)的死亡出現(xiàn)在Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度 5.12 mg/L組和10.24 mg/L質(zhì)量濃度組，其中5.12 mg/L質(zhì)量濃度組的魚(yú)在第8 d攝食開(kāi)始明顯減少，第12 d后幾乎不進(jìn)食；并于第10 d開(kāi)始試驗(yàn)魚(yú)陸續(xù)有死亡，至第21 d該組試驗(yàn)魚(yú)全部死亡; 10.24 mg/L質(zhì)量濃度組在第1 d時(shí)，魚(yú)攝食即明顯少于其他質(zhì)量濃度組，并有魚(yú)死亡，至第14 d時(shí)該組試驗(yàn)魚(yú)全部死亡。死亡大菱鲆幼魚(yú)體色先明顯變深、隨后明顯變淡，鰓蓋張開(kāi)，個(gè)別死魚(yú)魚(yú)體彎曲。2.56 mg/L及以下質(zhì)量濃度組中，1.28 mg/L和2.56 mg/L質(zhì)量濃度組攝食量較其他組略少，但差異不明顯，其他質(zhì)量濃度組攝食正常。

2.1 生長(zhǎng)性能

5.12 mg/L質(zhì)量濃度組和10.24 mg/L質(zhì)量濃度組的試驗(yàn)魚(yú)在第21 d前已全部死亡，因此，這兩組魚(yú)的生長(zhǎng)性能數(shù)據(jù)不具有比較意義，予以剔除。本次試驗(yàn)有關(guān)生長(zhǎng)性能的比較為2.56 mg/L及其以下質(zhì)量濃度組。

2.1.1 相對(duì)增長(zhǎng)率

各質(zhì)量濃度組大菱鲆幼魚(yú)的相對(duì)增長(zhǎng)率均高于對(duì)照組，且隨水中Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度的增加先升后降。2.56 mg/L質(zhì)量濃度組與1.28、0.04 mg/L質(zhì)量濃度組無(wú)顯著性差異(P>0.05)，1.28 mg/L質(zhì)量濃度組與0.08 mg/L質(zhì)量濃度組間無(wú)顯著性差異(P>0.05)，其余各組之間均差異顯著(P<0.05)(表1)。

2.1.2 質(zhì)量相對(duì)增加率

各質(zhì)量濃度組大菱鲆幼魚(yú)的相對(duì)質(zhì)量增加率均高于對(duì)照組(表1)。當(dāng)Mn(Ⅱ) 質(zhì)量濃度由0.04 mg/L增至0.64 mg/L時(shí)，大菱鲆幼魚(yú)的相對(duì)質(zhì)量增加率也逐步增加，0.64 mg/L質(zhì)量濃度組大菱鲆幼魚(yú)的相對(duì)質(zhì)量增加率達(dá)到最大值，之后隨著Mn(Ⅱ) 質(zhì)量濃度的繼續(xù)增加，相對(duì)質(zhì)量增加率急劇下降，但仍高于對(duì)照組(P<0.05)。0.04 mg/L質(zhì)量濃度組大菱鲆幼魚(yú)的相對(duì)質(zhì)量增加率與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)，0.08 mg/L質(zhì)量濃度組與1.28 mg/L質(zhì)量濃度組無(wú)顯著性差異(P>0.05)，2.56 mg/L質(zhì)量濃度組與0.16 mg/L質(zhì)量濃度組無(wú)顯著性差異(P>0.05)，其余各組之間均差異顯著(P<0.05)。

2.1.3 肝質(zhì)量指數(shù)

1.28 mg/L質(zhì)量濃度組與2.56 mg/L質(zhì)量濃度組大菱鲆幼魚(yú)的肝質(zhì)量指數(shù)顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，但這兩組間無(wú)顯著性差異(P>0.05)，其余各組間均差異顯著(P<0.05)(表1)。肝質(zhì)量指數(shù)隨Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度的增加先增后減，最大值出現(xiàn)在0.64 mg/L質(zhì)量濃度組。

表1 第28 d時(shí)各組大菱鲆幼魚(yú)的生長(zhǎng)性能

注：同列數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同字母平均值間差異顯著(P<0.05)，相同字母的平均值間差異不顯著(P>0.05)(下同).

2.2 酶活性指標(biāo)

2.2.1 堿性磷酸酶活力

處理7 d時(shí)，各組間大菱鲆肝臟堿性磷酸酶活力均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。第14 d時(shí)，Mn(Ⅱ) 5.12 mg/L質(zhì)量濃度組大菱鲆肝臟堿性磷酸酶活力顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，2.56 mg/L質(zhì)量濃度組略高于對(duì)照組，但差異不顯著(P>0.05)，其余各組均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；第21 d時(shí)，除2.56 mg/L質(zhì)量濃度組與對(duì)照組無(wú)顯著差異外(P>0.05)，其余各組均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；第28 d時(shí)，2.56 mg/L質(zhì)量濃度組顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，0.04 mg/L和1.28 mg/L質(zhì)量濃度組與對(duì)照組無(wú)顯著性差異(P>0.05)，其余各組均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)(表2)。

2.2.2 超氧化物歧化酶活力

處理7 d時(shí)，Mn(Ⅱ) 2.56 mg/L質(zhì)量濃度組大菱鲆肝臟超氧化物歧化酶的活力與對(duì)照組無(wú)顯著性差異(P>0.05)，5.12 mg/L和10.24 mg/L質(zhì)量濃度組顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，其余組別均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；第14 d時(shí)，各試驗(yàn)組均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；第21 d時(shí)，除2.56 mg/L質(zhì)量濃度組與對(duì)照組無(wú)顯著差異外(P>0.05)，其余各試驗(yàn)組均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；第28 d時(shí)，2.56 mg/L質(zhì)量濃度組顯著低于對(duì)照組(P<0.05)，其余各試驗(yàn)組均顯著高于對(duì)照組(P<0.05)。在每個(gè)時(shí)間段內(nèi)，超氧化物歧化酶活性均隨著Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度的增加先增后減(表3)。

表2 不同處理時(shí)間水中Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度對(duì)大菱鲆肝臟堿性磷酸酶活力的影響

表3 不同處理時(shí)間水中Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度對(duì)大菱鲆肝臟超氧化物歧化酶活力的影響

3 討 論

3.1 養(yǎng)殖用水中Mn(Ⅱ)對(duì)大菱鲆生長(zhǎng)的影響

錳是動(dòng)物體內(nèi)重要的微量元素之一，適量的錳是動(dòng)物正常生長(zhǎng)和發(fā)育所必需，但過(guò)量的錳對(duì)動(dòng)物生長(zhǎng)極為不利。有研究表明，飼料中錳含量過(guò)高，會(huì)影響團(tuán)頭魴(Megalobramaamblycephala)對(duì)鐵、鋅和銅元素的吸收[7]，也會(huì)抑制黃顙魚(yú)(Pelteobagrusfulvidraco)的生長(zhǎng)[8]。當(dāng)飼料中錳的添加量大于30 mg/kg時(shí)，牙鲆(Paralichthysolivaceus)幼魚(yú)的質(zhì)量增加率會(huì)明顯下降[9]。又有研究表明，當(dāng)水體中Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度超過(guò)49.0 mg/L，仿刺參(Apostichopusjaponicus)幼參的生長(zhǎng)會(huì)受到影響，同時(shí)錳元素會(huì)在幼參體內(nèi)蓄積[10]。

本試驗(yàn)表明，當(dāng)水體中Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度低于2.56 mg/L時(shí)，大菱鲆生長(zhǎng)顯著加快，但高于該值時(shí)大菱鲆陸續(xù)中毒死亡；水體中Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度高于0.64 mg/L時(shí)，大菱鲆的肝臟指數(shù)急劇下降，顯著低于對(duì)照組。本試驗(yàn)持續(xù)28 d，水體中Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度為5.12、10.24 mg/L時(shí)大菱鲆幼魚(yú)陸續(xù)中毒死去，其他組魚(yú)生長(zhǎng)正常。本次飼養(yǎng)時(shí)間較短，隨著養(yǎng)殖時(shí)間的延長(zhǎng)，錳還會(huì)在大菱鲆幼魚(yú)體內(nèi)繼續(xù)富集，長(zhǎng)期處于Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度1.28、2.56 mg/L下的大菱鲆幼魚(yú)在后期的養(yǎng)殖中是否會(huì)中毒或死亡還需延長(zhǎng)試驗(yàn)時(shí)間進(jìn)行判斷；不同規(guī)格的大菱鲆對(duì)錳的耐受能力不同，各個(gè)生長(zhǎng)階段大菱鲆對(duì)養(yǎng)殖用水中錳的耐受能力還需進(jìn)一步研究。

3.2 水中Mn(Ⅱ)對(duì)大菱鲆體內(nèi)堿性磷酸酶、超氧化物歧化酶的影響

堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶為代謝或抗氧化過(guò)程中的關(guān)鍵酶，常用其活力來(lái)研究重金屬或其他外源污染物對(duì)魚(yú)類(lèi)的毒性作用，如重金屬鎘影響鰱魚(yú)(Hypophthalmichthysmolitrix)的超氧化物歧化酶活性[11]，以及鯽魚(yú)(Carassiusauratus)的堿性磷酸酶活性[12]。有研究表明，飼料中添加適量的錳顯著激活不同生長(zhǎng)階段凡納濱對(duì)蝦(Litopenaeusvannamei)的堿性磷酸酶活力[13]；海水中錳質(zhì)量濃度為20 μg/L 和 40 μg/L 時(shí)中國(guó)明對(duì)蝦(Fenneropenaeuschinensis)仔蝦和日本囊對(duì)蝦(Marsupenaeusjaponicus)仔蝦的堿性磷酸酶活性最高, 但錳質(zhì)量濃度過(guò)高則會(huì)抑制其活性[14-15]。

本試驗(yàn)中，養(yǎng)殖用水中Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度低于0.64 mg/L時(shí)，大菱鲆肝臟堿性磷酸酶的活性顯著提高；堿性磷酸酶活性隨 Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度的升高呈先升后降的趨勢(shì)，呈生物對(duì)污染反映的最常見(jiàn)形式——明顯的拋物線形的劑量—效應(yīng)曲線。一般認(rèn)為，拋物線頂點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的含量即為該污染物對(duì)這種生物毒性的閾值[12]。汞對(duì)草魚(yú)(Ctenopharyngodonidella)[16]、鎘對(duì)鯽魚(yú)[17]以及鐵對(duì)大菱鲆[18]的堿性磷酸酶活性影響也呈拋物線形的劑量—效應(yīng)曲線。本次試驗(yàn)中，拋物線頂點(diǎn)所對(duì)應(yīng)的Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度為0.64 mg/L，即當(dāng)Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度超過(guò)0.64 mg/L，對(duì)大菱鲆有毒性作用。

本試驗(yàn)中，Mn(Ⅱ)對(duì)大菱鲆超氧化物歧化酶活力的影響也呈拋物線形的劑量—效應(yīng)曲線。在處理7、14、21、28 d時(shí)，隨著水中Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度增加，大菱鲆超氧化物歧化酶活力均呈現(xiàn)先增后減的趨勢(shì)，并隨著處理時(shí)間的延長(zhǎng)，各組超氧化物歧化酶活力有所降低并趨于穩(wěn)定，但仍隨Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度增加呈拋物線形曲線。在各個(gè)處理時(shí)間段，Mn(Ⅱ) 0.64 mg/L質(zhì)量濃度組的超氧化物歧化酶活力最高且穩(wěn)定。根據(jù)劑量效應(yīng)，0.64 mg/L為Mn(Ⅱ)表現(xiàn)出毒性作用的臨界質(zhì)量濃度。在第7 d時(shí)，5.12、10.24 mg/L質(zhì)量濃度組的超氧化物歧化酶活性顯著低于對(duì)照組，表明水體中錳含量過(guò)高抑制了大菱鲆肝臟超氧化物歧化酶的活性，甚至導(dǎo)致魚(yú)體中毒死亡。

綜上所述，養(yǎng)殖用水中的Mn(Ⅱ)影響大菱鲆幼魚(yú)的生長(zhǎng)及免疫力。當(dāng)Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度低于0.64 mg/L時(shí)，促進(jìn)了大菱鲆的生長(zhǎng)，維持了高堿性磷酸酶和超氧化物歧化酶活性；而當(dāng)Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度高于0.64 mg/L時(shí)，則抑制了大菱鲆的生長(zhǎng)和堿性磷酸酶、超氧化物歧化酶活性。可以認(rèn)為，0.64 mg/L是Mn(Ⅱ)對(duì)大菱鲆幼魚(yú)的安全質(zhì)量濃度。

Srivastava等[26]證實(shí)了水生動(dòng)物能夠從水體中攝取錳，但攝取的機(jī)制尚不清楚。有研究表明，仿刺參會(huì)從水中攝取Mn(Ⅷ)，并且Mn(Ⅷ)會(huì)在仿刺參體內(nèi)富集[27]。錳在海水中主要以不溶態(tài)的Mn(Ⅲ)和Mn(Ⅳ)的氧化物及可溶性的Mn(Ⅱ)存在。有研究表明，通過(guò)攪拌、降低pH值、增加光照度，海水中的錳會(huì)由四價(jià)的顆粒態(tài)轉(zhuǎn)化為二價(jià)的可溶態(tài)；而當(dāng)水體處于富氧狀態(tài)時(shí), Mn(Ⅱ)可被氧化成水合二氧化錳并發(fā)生沉積[28]。本次試驗(yàn)?zāi)７麓罅怫茵B(yǎng)殖生產(chǎn)環(huán)境，力求與其實(shí)際生產(chǎn)相吻合，但在實(shí)際生產(chǎn)中有很多影響水體中Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度的因素，如溶氧量、水交換量等。如果溶解氧含量高，水體中Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度由二價(jià)的可溶態(tài)氧化成水合二氧化錳而沉積；水交換量大的水體中Mn(Ⅱ)含量會(huì)更高一些，要將Mn(Ⅱ)含量降低到同一水平所需的時(shí)間相應(yīng)會(huì)變長(zhǎng)。因此，在生產(chǎn)中應(yīng)根據(jù)各大菱鲆養(yǎng)殖場(chǎng)的實(shí)際情況，采取有效措施，盡量將水中Mn(Ⅱ)質(zhì)量濃度降至0.64 mg/L以下，以確保大菱鲆的養(yǎng)殖安全。

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EffectsofWaterborneMn(Ⅱ)onGrowthandActivitiesofAKPandSODinJuvenileTurbot(Scophthalmusmaximus)

HE Zhongwei1, GONG Chunguang1, YIN Rui2, SUN Guiqing2, YU Qian1, FU Donglin1

( 1.Ocean College, Agricultural University of Hebei, Qinhuangdao 066003, China; 2. Hebei Ocean & Fisheries Science Research Institute, Qinhuangdao 066200, China )

In this study, growth and alkaline phosphatase (AKP), and superoxide dismutase (SOD) activities were studied in juvenile turbotScophthalmusmaximusexposed to 0.04 mg/L, 0.08 mg/L, 0.16 mg/L, 0.32 mg/L, 0.64 mg/L, 1.28 mg/L, 2.56 mg/L, 5.12 mg/L, and 10.24 mg/L waterborne Mn(Ⅱ). The results showed that better growth was observed in the turbot exposed to the waterborne Mn(Ⅱ) concentration of less than 2.56 mg/L, the best growth at 0.64 mg/L waterborne Mn(Ⅱ). The AKP and SOD activities in the liver were shown to be increased with increasing Mn(Ⅱ) concentration, within less than 0.64 mg/L. At higher than 0.64 mg/L in Mn(Ⅱ) concentration, however, AKP and SOD activities were decreased dramatically. During various treatment periods, the maximal AKP and SOD activities were observed in the turbot juveniles exposed to Mn(Ⅱ) concentration of 0.64 mg/L, indicating that 0.64 mg/L was inferred as the critical concentration to exhibit toxic effects according to dose-effect relation. The findings help to assess the toxicity of the water Mn(Ⅱ) to juvenile turbot, and provide the basis for aquaculture water management for Mn(Ⅱ) including determination of safe concentration.

Mn(Ⅱ);Scophthalmusmaximus; AKP; SOD

S965.399

A

1003-1111(2016)04-0364-06

10.16378/j.cnki.1003-1111.2016.04.009

2015-11-16；

2016-03-02.

國(guó)家鲆鰈類(lèi)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系項(xiàng)目(nycytx-50)；河北省科學(xué)技術(shù)廳項(xiàng)目(12226748，14227111D)；河北省教育廳項(xiàng)目(ZD20131062).

何忠偉(1989—)，男，碩士研究生；研究方向：水產(chǎn)動(dòng)物病害防治.E-mail:veryzones@163.com.通訊作者：宮春光(1971—)，男，副教授；研究方向：水產(chǎn)動(dòng)物病害和海水魚(yú)養(yǎng)殖.E-mail:gongcg2005@163.com.