犬血斑STR直接擴增體系研究

錢 水，杜蔚安，劉超，楊前勇，葉俊華

（1.佛山市公安司法鑒定中心，廣東 佛山528000；2.南方醫科大學法醫學系，廣州510000；3.廣州市刑事科學技術研究所，廣州510080；4.公安部南昌警犬基地，南昌330100）

犬血斑STR直接擴增體系研究

錢 水1,*，杜蔚安2，劉超3，楊前勇4，葉俊華4

（1.佛山市公安司法鑒定中心，廣東 佛山528000；2.南方醫科大學法醫學系，廣州510000；3.廣州市刑事科學技術研究所，廣州510080；4.公安部南昌警犬基地，南昌330100）

目的 構建犬血斑DNA的直接擴增體系。方法 依據犬17A STR熒光復合擴增體系（包含基因座DAmel、PEZ1、PEZ2、PEZ3、PEZ5、PEZ6、PEZ8、PEZ12、PEZ15、PEZ20、PEZ21、FH2010、FH2054、FH2079、FH2132、FH2611以及VWFX），通過優化PCR反應組分和濃度，對犬血斑進行直接擴增，用ABI 3130遺傳分析儀檢測擴增產物。結果 16個STR基因座和1個性別決定基因座均得到擴增，整體平衡，結果 穩定。結論 優化后的犬17 ASTR基因座熒光復合擴增體系可以對犬血斑進行直接擴增。

犬；STR基因座；血斑；直接擴增

STR復合擴增分析現已成為犬個體識別和親權鑒定的主要方法，在犬的檔案管理、遺傳育種及涉犬案件處理中發揮著重要作用[1-3]。

犬血斑是目前犬類鑒定最常見的樣本來源，但其含有許多抑制PCR順利進行的成分[4]，如血紅素、血紅蛋白及載體雜質等，因此在進行常規PCR擴增前必須對犬血斑進行DNA提取純化以除去其中的抑制成分，但這個步驟將至少需要2～3h，且過程繁瑣又極易污染，會耗費大量人力物力，不適合大規模的DNA檢測分析。

本研究依據犬17A STR熒光復合擴增體系，通過優化PCR反應組分配方，成功克服了上述PCR抑制因素的影響，可無需經DNA提取和純化處理便對犬血斑進行直接擴增和檢測。……