祛風(fēng)活血丸對(duì)EAU大鼠模型Fas/FasL表達(dá)的影響

易妙，喻京生，龍輝

祛風(fēng)活血丸對(duì)EAU大鼠模型Fas/FasL表達(dá)的影響

易妙1，喻京生2，龍輝1

目的探討祛風(fēng)活血丸對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）大鼠血清Fas、FasL水平的影響。方法將70只Lewis大鼠隨機(jī)分為空白組（A組），模型對(duì)照組（B組），陽(yáng)性對(duì)照組（C組），以及祛風(fēng)活血丸低、中、高劑量組（D、E、F組）。采用大鼠右后足墊注射含IRBP（光感受器間維生素A類結(jié)合蛋白）的PBS溶液+完全弗氏佐劑制作EAU模型，A組大鼠注射無菌生理鹽水。造模后各組大鼠灌胃給藥，A、B組予生理鹽水，C組予熊膽開明片，D、E、F組分別予低、中、高劑量的祛風(fēng)活血丸。觀察大鼠眼部情況變化，并采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法檢測(cè)給藥后第7天、14天、21天、28天時(shí)各組大鼠的Fas、FasL血清濃度。結(jié)果1.成功誘發(fā)Lewis大鼠的EAU模型，在免疫后不同時(shí)間發(fā)生臨床可見的炎癥，造模成功率91.7%（55/60），空白組大鼠無臨床可見葡萄膜炎表現(xiàn)。2.空白組各時(shí)間點(diǎn)的Fas、FasL血清濃度始終位于較低水平，模型對(duì)照組各時(shí)間點(diǎn)的Fas、FasL水平均為最高，明顯高于空白組（P＜0.01），并有隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸下降的趨勢(shì)。中、高劑量組各時(shí)間點(diǎn)的Fas、FasL水平較為接近，低于同期低劑量組及陽(yáng)性對(duì)照組，與模型組比較下降更為明顯（P＜0.05）。結(jié)論Fas/FasL介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡對(duì)EAU發(fā)病具有重要意義，祛風(fēng)活血丸能使大鼠血清中Fas、FasL含量明顯降低。

祛風(fēng)活血丸；實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄膜炎；Fas；FasL；細(xì)胞凋亡

葡萄膜炎又稱為色素膜炎，是世界重要致盲眼病之一，指發(fā)生于葡萄膜、視網(wǎng)膜、視網(wǎng)膜血管及玻璃體的一組炎癥性疾病。葡萄膜炎的發(fā)病機(jī)制目前尚不明確，已知與感染、外傷、遺傳、自身免疫反應(yīng)等因素有關(guān)。其中針對(duì)人類葡萄膜炎的研究?jī)A向于將內(nèi)因性葡萄膜炎定義為自身免疫性疾病〔1〕。鑒于此病的特殊性，近年來常用實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄炎（experimental autoimmune uveoretinitis，EAU）模型作為常用的葡萄膜炎動(dòng)物模型，由于其特征和臨床表現(xiàn)與人類葡萄膜炎的諸多相似之處，成為了研究葡萄膜炎發(fā)病機(jī)制的重要工具。

祛風(fēng)活血丸為我院自制中成藥，具有祛風(fēng)清熱，養(yǎng)血活血的作用。本研究擬利用EAU大鼠模型，以血清Fas、FasL為指標(biāo)，觀察祛風(fēng)活血丸對(duì)Fas/FasL系統(tǒng)的免疫調(diào)節(jié)作用的影響，以探討該藥防治葡萄膜炎的機(jī)制，為該藥的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)，具體報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組健康6~8周齡，體質(zhì)量150~180 g的Lewis大鼠70只，雌雄各半，經(jīng)檢查健康無眼疾（均由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供）。采用隨機(jī)數(shù)字表法將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為空白對(duì)照組10只和EAU模型組60只，將造模成功的55只大鼠，留出5只作為補(bǔ)充組，其余50只大鼠重新采用隨機(jī)數(shù)字法分為5組，包括空白對(duì)照組共分為6組，每組10只，分別為：空白組，模型對(duì)照組，陽(yáng)性對(duì)照組，以及祛風(fēng)活血丸低劑量組、中劑量組、高劑量組。

1.1.2實(shí)驗(yàn)試劑光感受器間維生素A類結(jié)合蛋白（interphotoreeeptor retinoid-binding protein，IRBP）多肽片斷（上海生工生物工程股份有限公司合成）、PBS溶液（北京索來寶科技有限公司）、弗氏完全佐劑（美國(guó)Sigma公司）。ELISA試劑盒（武漢博士德生物工程有限公司）、水合氯醛、4%多聚甲醛（美國(guó)Biosharp）。

1.1.3實(shí)驗(yàn)用藥（1）祛風(fēng)活血丸：由湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院藥劑科提供。藥物配比為熟地黃20g、當(dāng)歸15 g、川芎6 g、柴胡10 g、黃芩10 g、菊花10 g、防風(fēng)10 g、魚腥草20 g。以粉碎機(jī)粉碎，并由我校制劑室加工成1 g/ml的懸浮液，置于4℃冰箱中保存。（2）熊膽開明片：吉林長(zhǎng)白山藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，主要成分為熊膽粉、石決明、菊花、枸杞子、澤瀉、茺蔚子、龍膽，每片含藥量0.35 g。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1動(dòng)物模型的制作參照文獻(xiàn)〔2〕方法制作EAU大鼠模型。以1 mg IRBP粉劑與1 ml PBS混合調(diào)制成濃度為1 mg/ml的含IRBP的PBS溶液，放置備用。以5 ml注射器連通三通閥，分別注入0.6 ml含IRBP的PBS溶液、1.4 ml單純PBS溶液，2 ml完全弗氏佐劑，反復(fù)推注直到充分乳化，制成4 ml混合乳劑。實(shí)驗(yàn)組每只大鼠于右后足墊中部皮下進(jìn)針，緩慢推注0.2 ml的混合乳劑1次，空白組大鼠右后足墊注射等劑量無菌生理鹽水1次。每天同一時(shí)段在裂隙燈下觀察大鼠眼前節(jié)改變，詳細(xì)記錄。以出現(xiàn)結(jié)膜充血水腫、角膜緣血管充血、虹膜血管擴(kuò)張、前房滲出、晶狀體前囊有灰白色絮狀沉著物、虹膜后粘連、瞳孔膜閉以及玻璃體混濁等癥狀的大鼠作為EAU模型大鼠。

1.2.2分組給藥根據(jù)Meeh-Rubner公式，即A（體表面積m2）=K×W（2/3）/10 000（K：大鼠常數(shù)9.1；人常數(shù)10.6；W：體質(zhì)量，g），推算出大鼠的體表面積，換算出相當(dāng)于成人等效的治療劑量。造模后第7天開始給藥，空白組、模型對(duì)照組以生理鹽水4 ml灌胃；低劑量組、中劑量組、高劑量組分別以祛風(fēng)活血丸2 g/（kg·d）、3 g/（kg·d）、4 g/（kg·d）灌胃；陽(yáng)性對(duì)照組以熊膽開明片0.5 g/（kg·d）灌胃，每日2次。

1.2.3取材及檢測(cè)于給藥后第7天、14天、21天、28天分批處死動(dòng)物，每組處死2只。每組剩余2只大鼠于第30天以內(nèi)毒素誘發(fā)復(fù)發(fā)葡萄膜炎后處死。將大鼠以10%水合氯醛腹腔注射麻醉后取其靜脈血，所有血標(biāo)本儲(chǔ)存于真空采血管中，以3000 r/min離心15 min后取其血清置于-80℃冰箱保存?zhèn)溆茫瑯?biāo)本無溶血及絮狀沉淀。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）法檢測(cè)血清Fas、FasL濃度（具體測(cè)定方法參照說明書）。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 17.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，各組不同時(shí)間Fas、FasL血清濃度比較采用重復(fù)測(cè)量資料的方差分析，同一時(shí)間組間總體差異比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用LSD法。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1EAU模型表現(xiàn)

裂隙燈下每日觀察大鼠眼部，空白組無炎癥反應(yīng)；EAU模型組造模后出現(xiàn)一系列炎癥反應(yīng)，與葡萄膜炎一致。最早于造模后第4天觀察到炎癥反應(yīng)，表現(xiàn)為角膜緣血管充血，虹膜血管輕度擴(kuò)張（圖1）；于造模后第5天出現(xiàn)葡萄膜炎反應(yīng)，表現(xiàn)為不同程度前房混濁及角膜后沉著物（KP），房水閃光（+），瞳孔縮小，紅光反射減弱，部分出現(xiàn)晶狀體前灰白色絮狀物；于造模后第14天炎癥達(dá)到高峰，開始出現(xiàn)瞳孔緣灰白色絮狀物，前房變淺，房水混濁，角膜后KP，瞳孔膜閉等體征（圖2）。注射的60只大鼠共有55只出現(xiàn)不同程度的葡萄膜炎反應(yīng)，造模成功率為91.7%。2.2Fas血清濃度變化

圖1 EAU模型大鼠裂隙燈像。1A.造模第4天眼部炎癥情況；1B.造模第14天眼部炎癥情況EAU：實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄炎

不同組大鼠的血清Fas濃度以及各組大鼠整體上不同時(shí)間的血清Fas濃度均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異（重復(fù)測(cè)量資料的方差分析，F(xiàn)分組=12.770，P= 0.004；F時(shí)間=34.246，P＜0.001；F交互作用=1.663，P= 0.151）。空白組各時(shí)間點(diǎn)的Fas血清濃度始終位于較低水平，模型組各時(shí)間點(diǎn)的Fas水平均為最高，明顯高于空白組（P＜0.01），并有隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸下降的趨勢(shì)。其余各組各時(shí)間點(diǎn)血清Fas濃度低于模型組，與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的包括：陽(yáng)性對(duì)照組給藥后第14天（P=0.004）、第21天（P=0.025）、第28天（P=0.002）；低劑量組給藥后第14天（P= 0.001）、第28天（P=0.003）；中劑量組給藥后第7天（P=0.042）、第14天（P=0.000）、第21天（P=0.001）、第28天（P=0.000）；高劑量組給藥后第14天（P= 0.000）、第21天（P=0.001）、第28天（P=0.001）。與陽(yáng)性對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的包括：中劑量組給藥后第14天（P=0.004）、第21天（P=0.015）；高劑量組給藥后第14天（P=0.007）、第21天（P=0.024）；與低劑量組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的包括：中劑量組給藥后第14天（P=0.015）、第21天（P=0.008）；高劑量組給藥后第14天（P=0.032）、第21天（P= 0.012）。總體上，中、高劑量組各時(shí)間點(diǎn)的Fas水平較為接近，低于同期低劑量組及陽(yáng)性對(duì)照組；中劑量組各時(shí)間點(diǎn)數(shù)值低于高劑量組，但兩組間差異不大（P＞0.05）（表1，圖2）。提示祛風(fēng)活血丸可以減少EAU大鼠血清中Fas的表達(dá)，且以中、高劑量組最為明顯。

2.3FasL血清濃度變化

圖2 各組大鼠給藥后不同時(shí)間血清Fas濃度（ng/ml）的變化情況

表1 各組大鼠給藥后不同時(shí)間血清Fas濃度變化情況（x±s，ng/ml）

各組大鼠不同時(shí)間的血清FasL濃度總體差異不同（重復(fù)測(cè)量資料的方差分析，F(xiàn)分組=73.455，P＜0.001；F時(shí)間=84.876，P＜0.001；F交互作用=6.587，P＜0.001）。空白組的FasL血清濃度始終較低，模型組FasL血清水平最高，兩組各時(shí)間點(diǎn)的差異明顯，統(tǒng)計(jì)學(xué)比較均有意義（P＜0.01）。與陽(yáng)性對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的包括：低劑量組給藥后第7天（P=0.009）；中劑量組給藥后第7天（P＜0.001）、第14天（P＜0.001）、第21天（P=0.004）、第28天（P= 0.002）；高劑量組給藥后第7天（P=0.001）、第14天（P=0.001）、第21天（P=0.003）、第28天（P=0.001）；與低劑量組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的包括：中劑量組給藥后第7天（P=0.004）、第14天（P=0.002）、第21天（P=0.018）、第28天（P=0.014）；高劑量組給藥后第7天（P=0.028）、第14天（P=0.005）、第21天（P=0.010）、第28天（P=0.007）（表2，圖3）。提示祛風(fēng)活血丸亦可減少EAU大鼠血清中FasL的表達(dá)，中、高劑量組的藥效最為明顯。

表2 各組大鼠給藥后不同時(shí)間血清FasL濃度變化情況（x±s，ng/ml）

圖3 各組大鼠給藥后不同時(shí)間血清FasL濃度（ng/ml）的變化情況

3 討論

葡萄膜炎多發(fā)生于青壯年，易合并全身性自身免疫性疾病，常反復(fù)發(fā)作，可引起一些嚴(yán)重并發(fā)癥甚至致盲。葡萄膜炎分類方法繁多，可以分為感染性和非感染性兩大類，除開感染性因素之外，目前認(rèn)為，葡萄膜的發(fā)病主要與免疫相關(guān)〔3〕。EAU是研究人類葡萄膜炎乃至全身自身免疫性疾病的一種實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型，其模型表現(xiàn)特征性強(qiáng)，可重復(fù)，易于觀察與記錄，是藥物治療評(píng)估的理想模型〔4〕。本實(shí)驗(yàn)證明IRBP能在Lewis大鼠上成功誘發(fā)葡萄膜炎，累及角膜、虹膜、睫狀體等部位，出現(xiàn)一系列的炎癥反應(yīng)，并且隨著時(shí)間的推移，炎癥愈發(fā)加重，所以本研究制作的EAU模型是成功的。

大多數(shù)葡萄膜炎是由于自身抗原突破血-眼屏障，打破視網(wǎng)膜的免疫特赦所致。這些自身抗原被T細(xì)胞接收，從而引起針對(duì)自身抗原的免疫反應(yīng)〔5〕，已經(jīng)證實(shí)T細(xì)胞表面Fas/FasL表達(dá)的平衡性與葡萄膜炎的發(fā)病有關(guān)。Fas抗原又稱Apo-1 CD95，屬于TNF（腫瘤壞死因子）/NGF（神經(jīng)生長(zhǎng)因子）受體超家族成員，F(xiàn)asL是Fas在人體內(nèi)的天然配體，可與Fas特異性結(jié)合，也屬于TNF/NGF超家族成員。二者結(jié)合向細(xì)胞內(nèi)傳導(dǎo)死亡信號(hào)，誘導(dǎo)激活的T淋巴細(xì)胞凋亡。有研究表明，EAU過程中有大量炎癥細(xì)胞凋亡，眼組織中浸潤(rùn)細(xì)胞的凋亡可能是標(biāo)志EAU開始消退的最初征象之一。楊培增等〔6〕發(fā)現(xiàn)在EAU中，虹膜、睫狀體、視網(wǎng)膜、脈絡(luò)膜上不僅發(fā)生炎癥反應(yīng)，也出現(xiàn)炎癥細(xì)胞的凋亡，推測(cè)此炎癥之所以迅速消退，可能與浸潤(rùn)的炎癥細(xì)胞快速凋亡有關(guān)。在本實(shí)驗(yàn)研究中發(fā)現(xiàn)無論是空白組還是藥物干預(yù)組均可見到Fas、FasL的表達(dá)，但是模型組的Fas、FasL表達(dá)明顯高于空白組，且隨著炎癥的高峰期到來也表達(dá)增多，經(jīng)過藥物干預(yù)后，各藥物組Fas、FasL出現(xiàn)不同程度下降，其中以祛風(fēng)活血丸中、高劑量組最為明顯。同時(shí)，模型組中亦可見到Fas、FasL也呈下降趨勢(shì)。因此，我們認(rèn)為，EAU模型屬于T細(xì)胞介導(dǎo)的器官特異性自身免疫病，在這個(gè)過程中炎癥細(xì)胞釋放大量炎癥因子，從而刺激眼內(nèi)組織中Fas表達(dá)，與配體FasL相結(jié)合誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡，從而破壞正常組織結(jié)構(gòu)。隨著炎癥高峰期到來，F(xiàn)as、FasL表達(dá)增多，與炎癥反應(yīng)呈正相關(guān)，但伴隨著時(shí)間延長(zhǎng)，有自行下降的傾向，且藥物組與模型組相比較，F(xiàn)as、FasL表達(dá)的下降幅度更明顯，這表明藥物干預(yù)加快了Fas、FasL下降的速度，加速了炎癥消退時(shí)間，從而達(dá)到治療效果，這可能與其促進(jìn)細(xì)胞凋亡相關(guān)。

葡萄膜炎多見風(fēng)熱外襲。肝開竅于目，肝主疏泄，若情志不暢，則肝氣郁結(jié)，郁而化火，火熱之邪上擾于目；風(fēng)為陽(yáng)邪，“傷于風(fēng)者，上先受之”，目居于上位，易受風(fēng)邪侵襲。風(fēng)邪易挾它邪，熱邪亦屬陽(yáng)邪，同氣相求，故風(fēng)熱之邪常合而侵襲眼目。同時(shí)考慮到葡萄膜多氣多血，炎癥時(shí)易造成局部瘀滯，因此氣滯血瘀為其常見的病理改變，基本病機(jī)為外感風(fēng)熱，氣滯血瘀。陽(yáng)性對(duì)照組選用中成藥熊膽開明片，各藥配伍，具有清肝泄熱，滋陰明目的作用，研究顯示熊膽開明片對(duì)白內(nèi)障術(shù)后并發(fā)癥及急性虹膜睫狀體炎具有很好地療效〔7-9〕。治療組藥物選用湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院院內(nèi)制劑祛風(fēng)活血丸，主要組成為熟地黃、當(dāng)歸、川芎、柴胡、黃芩、菊花、防風(fēng)、魚腥草等。方中熟地黃滋陰補(bǔ)血，當(dāng)歸養(yǎng)血和血，川芎行血活血，熟地黃乃血中之血藥，當(dāng)歸、川芎為血中之氣藥，可收補(bǔ)而不滯之效；黃芩、魚腥草清熱解毒；柴胡疏肝解郁；菊花清肝明目；防風(fēng)祛風(fēng)止痛；藥少功強(qiáng)，共奏祛風(fēng)清熱、行氣活血之功效。在前期研究中，李維等〔10〕發(fā)現(xiàn)祛風(fēng)活血丸能夠明顯降低白內(nèi)障術(shù)后遲發(fā)型葡萄膜炎的發(fā)生率，且能緩解眼局部癥狀；肖霞等〔11〕在西醫(yī)基礎(chǔ)上加用祛風(fēng)活血丸治療葡萄膜炎，發(fā)現(xiàn)中西結(jié)合療效佳；曾靜等〔12〕對(duì)祛風(fēng)活血丸治療前葡萄膜炎療效觀察，結(jié)果顯示該藥既能提高療效，又能減少?gòu)?fù)發(fā)，值得推廣應(yīng)用。故本實(shí)驗(yàn)選用祛風(fēng)活血丸對(duì)EAU大鼠進(jìn)行干預(yù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明祛風(fēng)活血丸可以減少實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄膜炎Fas、FasL的表達(dá)，且以中、高劑量組的治療效果最好，我們因此推測(cè)祛風(fēng)活血丸可通過調(diào)整Fas/FasL系統(tǒng)的平衡性，從而促進(jìn)活化的淋巴細(xì)胞迅速凋亡，降低炎癥反應(yīng)的程度。

[1]Gupta V NQD，Zierhut M TI.Update on Uveitis Management[J].J Ophthalmol，2015，1（23）：382747.

[2]李光達(dá).間充質(zhì)干細(xì)胞治療大鼠自身免疫性葡萄膜炎作用機(jī)制的研究[D].天津：天津醫(yī)科大學(xué)，2012.

[3]曲盛妮.葡萄膜炎的中西醫(yī)病理機(jī)制及其治療研究近況[J].四川中醫(yī)，2009，27（11）：47-49.

[4]Luger D SPB，Tang J CD，Chen Z.Either a Th17 or a Th1 effector response can drive autoimmunity：conditions of disease induction affect dominant effector category[J].J Exp Med，2008，205（4）：799-810.

[5]Von Toeme C SC，Kaufmann U DM.Effector T cells driving monophasicvs.relapsing/remittingexperimentalautoimmune uveitis show unique pathway signatures[J].Mol Immunol，2010，48（1-3）：272-280.

[6]楊培增，周紅顏.實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄膜視網(wǎng)膜炎中浸潤(rùn)細(xì)胞的表型及其凋亡的研究[J].中華眼底病雜志，2000，16（1）：35-38.

[7]劉斌，汪紅.熊膽開明片防治白內(nèi)障超聲乳化人工晶體植入術(shù)后并發(fā)癥的臨床觀察[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2005，16（4）：341.

[8]張慶蓮，張文志.熊膽開明片治療急性虹膜睫狀體炎60例[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志，2000，20（1）：57-58.

[9]賴惠玲.中西醫(yī)結(jié)合治療急性虹膜睫狀體炎26例臨床分析[J].福建醫(yī)藥雜志，2002，（5）：85.

[10]李維，顏家朝.祛風(fēng)活血丸預(yù)防白內(nèi)障術(shù)后遲發(fā)型葡萄膜炎的效果觀察[J].湖南中醫(yī)雜志，2016，32（4）：6-7.

[11]肖霞，李維，龍輝.中西醫(yī)結(jié)合治療葡萄膜炎123例療效觀察[J].湖南中醫(yī)雜志，2016，32（3）：74-75.

[12]曾靜，顏家朝.祛風(fēng)活血丸治療前葡萄膜炎療效觀察[J].中國(guó)中醫(yī)眼科雜志，2012，22（6）：409-411.

Functions of Huoxue Pill on EAU Rats Model of Fas/FasL Expression Effect

YI Miao，YU Jingsheng，LONG Hui.Hunan University of Traditional Chinese Medicine，Changsha 410208，Hunan，China

OBJECTIVEExplore the functions of huoxue pill on experimental autoimmune uveitis（EAU）serum level of Fas and FasL in rats.METHODS0 Lewis rats were randomly divided into blank group（group A），model control group（group B），positive control group（group C），as well as the functions of huoxue pill low，medium and high dose group（group D，E，F(xiàn)）.Using the right rear foot pad injection in rats including IRBP（vitamin A binding protein）between photoreceptor of PBS solution+make EAU model complete freund's adjuvant，group A sterile saline injection in rats.After building groups of rats lavage，A，B group with physiological saline，group C to bear bile enlightened，D，E，F(xiàn) group to low，medium and high doses of the functions of huoxue pellet.Observation rat eye situation changes，and using enzyme-linked immunosorbent assay（ELISA）method to detect drug delivery after 7 days，14 days，21 days，28 days between groups of Fas and FasL in rats serum concentration.RESULTS1.The EAU successfully induce Lewis rats model，clinical visible at different time before and after the immune inflammation，building success rate 91.7%（55/60），blank group rats without clinical visible uveitis.2.Each time point blank group serum concentrations of Fas and FasL always located in the lower level，model control group of each time point was the highest level of Fas and FasL，significantly higher than the blank group（P<0.01），and has a tendency to extend gradually decreases with time.Each point in time，the high dose group of Fas and FasL level is relatively close，lower than the same period and low dose group and positive control group，compared with model group decreased more significantly（P<0.05）.CONCLUSIONSFas/FasL mediated apoptosis of EAU incidence is of great significance and functions of huoxue pill can make the rats serum content of Fas and FasL decreased obviously.

functions of huoxue pill；experimental autoimmune uveitis；Fas；FasL；cell apoptosis

R285.5

：A

：1002-4379（2016）04-0226-05

10.13444/j.cnki.zgzyykzz.2016.04.005

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（81273808/H2713）

1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)（2014級(jí)碩士研究生），長(zhǎng)沙410208

2.湖南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院，長(zhǎng)沙410007

喻京生，E-mail：yujingsheng-mike@163.com