紫外分光光度法測定藤梨根中秦皮乙素的含量

滕 坤，譚 波，滕 云，趙曉飛

(1.通化師范學院 制藥與食品科學學院，吉林 通化134002；2.吉林吉春制藥股份有限公司，吉林 通化 134002；3.通化市通化縣三棵榆樹鎮中心校，吉林 通化 134002)

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紫外分光光度法測定藤梨根中秦皮乙素的含量

滕 坤1，譚 波2，滕 云3，趙曉飛1

(1.通化師范學院 制藥與食品科學學院，吉林 通化134002；2.吉林吉春制藥股份有限公司，吉林 通化 134002；3.通化市通化縣三棵榆樹鎮中心校，吉林 通化 134002)

目的:測定藤梨根中秦皮乙素的含量.方法:采用甲醇超聲法對藤梨根中秦皮乙素進行提取,紫外分光光度法測定藤梨根中秦皮乙素的含量.結果:秦皮乙素線性回歸方程為y=72.2804x+0.0283,R2=0.9994,平均回收率為99.36%,RSD=0.28%,藤梨根中的秦皮乙素含量為0.3604%.結論:該方法操作簡單,方便快捷,可用于測定藤梨根中秦皮乙素的含量.

紫外分光光度法;藤梨根;秦皮乙素;含量測定

藤梨根又稱陽桃根、獼猴梨，為獼猴桃科植物軟棗獼猴桃(Actinidia argutaPlanch)或中華獼猴桃(Actinidia chinensis Planch)的根.藤梨根為大型落葉藤本，長5～9m.莖枝髓大，白色，片狀.又名：藤梨、陽桃、木子、獼猴桃根[1，2].具有清熱解毒、清熱利濕、抗癌、祛風除濕、利尿止血消腫，用于消化不良、嘔吐、風濕痹痛、消化道癌腫、癰瘍瘡癤及黃疸等功能.藤梨根中含有揮發油、三萜、黃酮、多糖類等化學成分，以及Fe、Zn、Cu、Se等微量元素[3].秦皮乙素存在于藤梨根中，具有平喘、祛痰作用[4]，對痢疾桿菌有抑制作用，可用于治療急性菌痢、慢性氣管炎等.本文采用紫外分光光度法對藤梨根中秦皮乙素的含量進行了研究.

1 實驗儀器、材料與試劑

1.1 實驗儀器

紫外可見分光光度計(上海精科752N)；KQ5200DB型數控超聲波清洗器(上海科導超聲儀器有限公司)；電子分析天平(上海恒平科學儀器有限公司FA1064型)；恒溫水浴鍋(北京市永明醫療儀器廠DXKW-D-4).

1.2 實驗材料

藤梨根購自吉林通化醫藥大廈，經通化師范學院于俊林教授鑒定為獼猴桃科軟棗獼猴桃(Actinidia arguta )的干燥根；濾紙；秦皮乙素對照品(110741-200607)購自國家食品藥品檢定研究院，國家藥品標準物質，供含量測定.

1.3 實驗試劑

石油醚(60～90℃)；甲醇為分析純.

2 方法與結果

2.1 供試品溶液的制備

取藤梨根藥材100g，粉碎成細粉，精密稱取藤梨根藥材粉末3g，放置于錐形瓶中，加入一定量的石油醚(60～90℃)，振搖，放置，超聲波清洗器中脫脂20min后，放冷，棄去石油醚(60～90℃)[5]，藥渣加入甲醇40mL，放置在超聲波清洗器中超聲提取45min，重復三次，合并甲醇溶液，過濾，再用少量甲醇洗滌錐形瓶及藥渣數次，合并濾液，濾液濃縮，加甲醇定容于100mL容量瓶中，精密移取2mL于25mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，混合均勻，作為供試品溶液以待測定.

2.2 對照品溶液的制備

精密稱取秦皮乙素對照品(國家食品藥品檢定研究院)5mg,置于25mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，精密量取5mL轉移至25mL容量瓶中用甲醇定容至刻度，混合均勻，放置備用.

2.3 測定波長的選擇

精密移取秦皮乙素對照品溶液5mL，置于100mL容量瓶中用甲醇定容至刻度，混合均勻.以甲醇溶液為空白溶劑對照，在紫外分光光度計上，于353nm波長附近進行測定，結果表明，在353nm處有最大吸收波長.取配置好的供試品溶液3.0mL，以甲醇溶液為空白溶劑對照，在紫外分光光度計上，在353nm波長附近進行測定，結果表明，在353nm處有最大吸收波長，與對照品有相似的最大吸收，因此選擇353nm為測定波長.

2.4 線性關系考察

精密移取配制完成的已知濃度為0.04mg·mL-1秦皮乙素對照品溶液0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、6.00mL置于25mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，混合均勻，得到濃度分別為0、0.0016、0.0032、0.0048、0.0064、0.0096mg·mL-1的對照品溶液，以備使用.以甲醇溶液為空白溶劑對照，于353nm處進行測定各溶液吸光度值,結果見表1.以濃度c為橫坐標[6-8]，吸光度A為縱坐標，得到回歸方程y = 72.2804x + 0.0283，R2= 0.9994，說明吸光度和濃度線性關系良好，如圖1所示.

表1 秦皮乙素對照品測定結果

圖1 秦皮乙素標準曲線圖

2.5 精密度實驗

精密稱取上述藤梨根藥材粉末3g，置于錐形瓶中，按照供試品溶液制備的方法進行制備，以甲醇溶液為空白溶劑對照，再于353nm處測定其吸光度值，重復測定6次[9]，觀察吸光度值的一致性，得吸光度的RSD值為0.30%.結果表明，儀器精密度良好，測定結果見表2.

表2 精密度測定結果

2.6 穩定性實驗

精密稱取上述藤梨根藥材粉末3g，置于錐形瓶中，按照供試品溶液制備的方法進行制備，于353nm處進行測定吸光度值，分別在0min、15min、30min、60min、90min、120min進行測定，測定6次[10]，觀察其結果的一致性，吸光度的RSD值為0.19%，結果表明,供試品溶液在2小時內穩定性良好，測定結果見表3.

表3 穩定性測定結果

2.7 重復性實驗

精密稱取上述藤梨根藥材粉末18g，按照供試品溶液制備方法制備成6份，每份3g.并用紫外分光光度計在353nm處測定吸光度，進行平行測定，并計算其含量，RSD為0.12%,表明重復性良好，結果見表4.

表4 重復性測定結果

2.8 加樣回收實驗

精密稱取藤梨根藥材粉末4份，每份3g，分成2組，每組2份，按照供試品溶液制備的方法進行制備.分別添加已知濃度為0.0008mg·mL-1的秦皮乙素對照品溶液3mL、4mL于25mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混合均勻后在353nm波長處測定吸光度，并計算其含量，計算其回收率，得知平均回收率為94.36%，RSD值為0.28%，測定結果見表5.

表5 加樣回收測定結果

2.9 含量測定

精密稱取藤梨根藥材9g，稱取3份，按供試品制備方法進行制備，測定其吸光度值，求其含量，結果見表6.

表6 含量測定結果

3 結果

采用紫外分光光度法測定藤梨根中秦皮乙素的含量，對照品和供試品在紫外353nm處有最大吸收，可選擇在353nm處測定藤梨根中秦皮乙素的含量的最大吸收波長，可獲得穩定的可靠的結果.經過線性關系分析，濃度在0.1～10mg·mL-1范圍內線性關系良好(R2=0.9994)，重復性好，靈敏度高；供試品溶液在室溫下放置2小時，穩定性良好；加樣回收的回收率高，說明采用紫外分光光度法可以很好地測定藤梨根中秦皮乙素的含量，此方法方便快捷，操作簡單.

[1]唐陽.藤梨根藥用成分及作用機制的現代研究進展[J].現代中西結合雜志,2013,22(03):330-332.

[2]赫軍,趙鐵,王巍.藤梨根的化學成分研究[J].中國藥學雜志,2014,49(03):184-186.

[3]王小平,白吉慶,成奉珍.不同來源藤梨根中總黃酮含量比較研究[J].時商洛學院學報,2007,21(02):51-53.

[4]梁承遠,張詩韻,毛跟年,等.秦皮乙素及其衍生物的合成與藥理學研究進展[J].陜西科技大學學報.2015,47(02):26-28.

[5]李英霞,劉春農,韋朋.千金子種仁與種皮中總香豆素的含量測定[J].陜西中醫,2008,22(05):605-606.

[6]馬逾英,鐘世紅,賈敏如,等.紫外分光光度法測定川白芷中總香豆素類成分的含量[J].華西藥學雜志,2005,26(02):159-160.

[7]金鋒,張振凌,任玉珍,等.紫外分光光度法測定巴豆中總生物堿的含量[J].中國現代中藥,2013,47(01):22-24.

[8]杜永峰,周健,姚秉華.紫外分光光度法測定黃芩中黃芩苷的含量[J].化學分析計量,2008,75(05):43-45.

[9]張建輝,楊代明,吳廷瑞,等.HPLC法和紫外分光光度法測定葛根淀粉中葛根素含量的研究[J].食品與機械,2006,42(06):110-112.

(責任編輯:王海波)

Determination of Esculetine Tengligen by UV Spectrophotometry

TENG Kun,TAN BO,TENG Yun，ZHAO Xiao-fei

(TonghuaNormalUniversity，Tonghua,Jilin134002,China)

Objective: to determine the content of Aesculetin tengligen. Methods: tengligen Aesculetin was extracted by methanol by ultrasonic method, determination of content of Aesculetin tengligen by UV spectrophotometry. Results: esculetine linear regression equation is y = 72.2804x + 0.0283, R2= 0.9994. The average recovery rate was 99.36%, RSD=0.28%, tengligen esculetine was 0.3604%. Conclusion: this method is simple, fast and convenient, can be used for determination of the content of Aesculetin tengligen.

UV spectrophotometry; tengligen; Aesculetin; Determination of content

2016-07-12

吉林省教育廳項目“基于細胞藥代動力學的藤梨根抗腫瘤黃酮類成分研究”(吉教科合字【2015】第439號)

滕坤，女，吉林遼源人，副教授.

R285.5

A

1008-7974(2016)05-0019-03

10.13877/j.cnki.cn22-1284.2016.10.006