吲哚美辛腸溶片近紅外快速定量方法的建立

吳 群

（1．重慶市食品藥品檢驗檢測研究院，重慶 401121； 2．重慶市藥物過程與質量控制工程技術研究中心，重慶 401121）

吲哚美辛腸溶片近紅外快速定量方法的建立

吳 群1，2

（1．重慶市食品藥品檢驗檢測研究院，重慶 401121； 2．重慶市藥物過程與質量控制工程技術研究中心，重慶 401121）

目的 采用近紅外漫反射光譜（NIR）分析技術和化學計量學方法對吲哚美辛腸溶片進行快速定量分析。方法 選擇8個廠家生產的156批吲哚美辛腸溶片，采集樣品的 NIR，并以法定方法測定其含量，采用偏最小二乘法建立定量模型。結果 樣品濃度范圍為24．61% ～32．96%，用78個樣品進行外部驗證，外部驗證均方差（RMSEP）為0．508%，平均相對偏差為0．45%。結論 該方法快速、簡便，結果準確，適于藥品的現場快檢。

吲哚美辛；近紅外漫反射光譜；定量模型

吲哚美辛腸溶片屬非甾體抗炎藥物，通過抑制體內前列腺素的生物合成而產生抗炎、解熱及鎮痛等作用[1]，臨床應用廣泛。現行質量標準為2010年版《中國藥典（二部）》[2]，含量測定采用高效液相色譜（HPLC）法。近紅外光是波長介于可見光區與中紅外光區的電磁波，其波數范圍約為12 500～4 000／cm[3]，近紅外漫反射光譜（NIR）分析技術是集光譜分析技術、現代電子技術和化學計量學技術為一體的現代光譜技術，主要用于供試品的快速、無損分析。該方法有操作簡便、分析速度快、非破壞性、無污染、實現現場分析的優點，故在藥物分析、在線檢測及質量控制等方面有巨大優勢[4－7]。2010年版《中國藥典（二部）》收載了近紅外光譜法[2]。本研究中采用吲哚美辛片近紅外光譜數據，以HPLC法測定含量為參考值，結合偏最小二乘法建立吲哚美辛腸溶片的近紅外定量模型，實現對吲哚美辛腸溶片的快速、簡便、準確測定[8]。現報道如下。

1 儀器與試藥

1．1 儀器

Matrix－F近紅外光譜儀，OPUS 5．0分析軟件，均由德國Bruker公司生產；Agilent 1260型高效液相色譜儀；MSU225S－000－DA型電子天平(十萬分之一，Sartorius公司)。

1．2 試藥

本研究中收集了全國在產的8個廠家156批樣本，分別來自全國生產、流通、銷售、使用領域，均為2015年國家評價性抽驗樣品；吲哚美辛對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號為0258－9602）。

2 方法與結果

2．1 方法

2．1．1 吲哚美辛含量測定

按照2010年版《中國藥典（二部）》，采用HPLC法測定的含量作為理論含量，156批樣品的濃度范圍為24．61% ～32．96%。

2．1．2 光譜采集

采用Matrix－F隨機配帶的光纖探頭，光譜掃描范圍為12 000～4 000／cm，分辨率為8 cm，掃描次數為32次，每批樣品測定6片，計算平均光譜，建模。

2．2 結果

2．2．1 建模參數選擇

各廠家樣品及吲哚美辛對照品平均光譜見圖1，可見，各廠家NIR光譜圖基本一致，吲哚美辛對照品NIR光譜圖在 5 500～6 200／cm和4 100～4 800／cm譜段有很明顯的特征吸收峰，且各廠家在相應譜段也有很強的吸收峰。選取特定譜段、適當的預處理方法、合理的化學計量學方法以突出活性成分的信息，是建立吲哚美辛腸溶片定量模型的關鍵。

2．2．2 內部交叉驗證

156批樣品全部作為校正集，利用 OPUS軟件Quant－2中所有預處理方法和自動優化功能（NIR方式）對校正集樣品進行內部交叉驗證，確定建模參數：預處理方法為一階導數和矢量歸一化，最佳光譜范圍6 202．3～5 596．7／cm，5 403．8～4 998．8／cm，4 802．1～4 196．6／cm，處理后的NIR圖見圖2。

2．2．3 外部交叉驗證建模

利用OPUS軟件Quant－2中一一間隔自動選取校正和驗證集，采用2．2．2項中的建模參數，采用外部交叉驗證，決定系數（R2）為 97．95%，外部驗證均方差（RMSEP）為0．508%，維數（Rank）為7，最大相對偏差為1．57%，平均相對偏差為0．45%，預測值與真實值的線性關系見圖3。

圖1 各廠家樣品及吲哚美辛對照品NIR圖

圖2 處理后的NIR圖

圖3 預測值與真實值的線性關系示意圖

2．3 模型驗證

2．3．1 專屬性考察

模型正確判定待測物是否為模型預測品種的能力稱為專屬性[9]。樣品的馬氏距離與限定值進行比較檢驗異常樣品：限定值＝Factor×Rank／M，Rank為階數即主成分維數；M為建模樣品數；Factor為因子，因子范圍為2～10，本試驗因子選2。利用建立的定量分析模型對常見的阿司匹林、雙氯芬酸鈉、對乙酰氨基酚、布洛芬4類解熱鎮痛樣品進行測定，其馬氏距離均大于限定值（0．10），被認定是異常樣品。說明所建立的吲哚美辛腸溶片定量模型具有較好的專屬性。

2．3．2 線性關系考察

近紅外的線性與傳統分析方法的線性不同，由于近紅外方法的建立一般采用多元回歸，為二級分析方法，故其線性主要用待分析物的預測結果與真實值之間的關系來評價[10]。在 24．61% ～32．96%的濃度范圍內，以NIR預測值（Y）對HPLC測定值（X）進行線性回歸，得回歸方程 Y＝0．975 4 X＋0．829 9（R2＝0．980 1），表明建立的近紅外定量預測值與真實值之間具有良好的相關性。

2．3．3 準確性考察

驗證集的NIR預測結果與法定方法測量結果比較，偏差（mg／mg，%）在0．1%以下的有10批，0．1%～0．2%有 16批，0．2%～0．3%有 10批，0．3～0．4%有12批，0．4% ～0．5%有 9批，0．5% ～1．0%有 16批，1．0%以上有 5批。最大偏差為 1．57%，平均偏差為0．40%。小于近紅外快速檢測對于偏差的限度要求為5%。

2．3．4 重復性考察

取樣品1份，在同1天內、由同一操作者在同樣的環境中按前述方法掃描NIR光譜，測定6次，分別求其平均光譜并利用所建模型預測其主成分的含量。測定的RSD為0．37%，表明該方法重復性良好。

3 討論

近年來，近紅外光譜法在各種質量控制中的應用逐漸增多[11－14]。本研究中建立的吲哚美辛腸溶片近紅外定量分析模型在日常應用時，僅需掃描未知樣品光譜后，計算出平均光譜代入模型，便可得出其含量，較傳統檢測方法具有快速、簡便、不消耗試劑的優點，且本研究中樣品幾乎涵蓋了全國所有生產企業，故樣品數量多、代表性強，故可用于全國各企業的快速定量分析。同時，本方法不局限于實驗室，也可用于市場、偏遠地區的藥品打假、質量控制，不局限于藥品終端檢測，為實現在線監控吲哚美辛腸溶片的質量提供了依據。

[1]王開翔，安益國，王玉芬．吲哚美辛的臨床應用進展[J]．醫學綜述，1997，3（6）：271－274．

[2]國家藥典委員會．中華人民共和國藥典（二部）[M]．北京：中國醫藥科技出版社，2010：347，附錄208．

[3]張繼紅．乳酸菌素片近紅外定量模型的建立[J]．中國執業藥師，2015，12（4）：27－30．

[4]王小亮，傅 強，繩金房，等．近紅外光譜技術在制藥過程分析中的應用進展[J]．西北藥學雜志，2009，24（3）：228－230．

[5]Wang XL，Fu Q，Sheng JF，et al．Construction of a universal quantitative model for ibuprofen sustained－release capsules from different manufactures using near－infrared diffuse reflection[J]．Vibratoinal Spectroscopy，2010，53（2）：214－217．

[6]王小亮，賈建忠，楊 欣，等．近紅外透射光譜法快速測定布洛芬緩釋膠囊釋放度[J]．藥物分析雜志，2012，32（10）：1 898－1 902．

[7]Feng YC，Yang XL，Yang ZH，et al．Monitoring the quality of drugs in circulation using rapid NIR spectral comparison methods[J]．Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences，2011，20（3）：290－296．

[8]李軍山，張 博，校軍彥 ．近紅外光譜法快速測定大豆磷脂粉的干燥失重及磷含量[J]．中國藥業，2013，22(16)：41－43．

[9]仲 瑤，劉 楊，張亞杰，等．注射用磷霉素鈉近紅外定量分析通用性模型的建立[J]．中國藥師，2015，18（7）：1 241－1 243．

[10]劉緒平，馮艷春，胡昌勤，等．頭抱拉定膠囊劑通用性近紅外定量分析模型的建立[J]．藥物分析雜志，2008，28（5）：722－726．

[11]耿 ，胡浩武，李勝華，等．近紅外光譜技術用于川紅活血膠囊提取過程的研究[J]．中國藥業，2012，21（11）：14－15．

[12]王小亮，張秉華，馮潤東，等．硝酸咪康唑栓劑近紅外快速定量方法的建立[J]．中國藥物警戒，2015，12（7）：398－401．

[13]黃艷萍，袁 萍，黃勇紅．減肥保健品中西布曲明的近紅外光譜法快速測定[J]．海峽藥學，2015，27（11）：42－44．

[14]李 敏，毛丹卓，楊永健．復方益肝靈膠囊近紅外光譜快檢方法研究[J]．中國藥事，2015，29（8）：879－884．

Construction of a Quantitative M odel for Determination of Indometacin Enteric－Coated Tablets

Wu Qun1，2
（1．Chongqing Institute for Food and Drug Control，Chongqing，China 401121； 2．Chongqing Research Center for Drug Process and Quality Control Engineering，Chongqing，China 401121）

Objective To quantitatively analyze the Indometacin Enteric－coated Tablets by near infrared diffuse reflection spectroscopy technology and chemometrics．M ethods 156 batches of Indometacin Enteric－coated Tablets from 8 different manufacturers were chosen for analyzing．The near infrared diffuse reflection spectrum of the samples was collected；the active pharmaceutical ingredient（API）contents were determined by the conventional method；the model with the partial least square（PLS）algorithm available in the quant was developed．Results The model was based on cross validation with API from 24．61% to 32．96%．78 batches were used as validation set，the RMSEP was 0．508%，and the average relative deviation for the validation set was 0．45%．Conclusion The method is accurate，quick and convenient，which can be used for quick analysis in drug control．

indometacin；near infrared spectroscopy；quantitative model

R927．11；R971＋．1

A

1006－4931(2016)10－0066－03

吳群（1979－），女，大學本科，主管藥師，研究方向為藥物分析，（電話）023－86072731（電子信箱）920817428＠qq．com。

2016－01－10；

2016－02－07)