豫西脂尾羊的血清酯酶與體尺性狀的關聯分析

摘要：運用聚丙烯酰胺凝膠電泳技術（PAGE）對豫西脂尾羊血清酯酶（Es）的多態性進行檢測和分析。結果表明，在豫西脂尾羊上Es基因座有2個等位基因即Es+和Es-，而且Es+和Es-的基因頻率別為0.55和0.45，有3種基因型Es+ +、Es+ -、Es- -，其頻率分別為0.425、0.250和0.325。不同基因型西清酯酶對體尺的影響結果表明，在薦高方面，Es+ +基因型顯著高于Es+-基因型（P<0.05），而兩者均與Es- -基因型沒有顯著差異（P>0.05）。在胸圍方面，Es+ +基因型極顯著高于Es--基因型（P<0.01），而兩者均與Es+ -基因型的胸圍沒有顯著差異（P>0.05）。Es對其他指標都無顯著影響（P>0.05）。

關鍵詞：豫西脂尾羊；血清酯酶；多態性

中圖分類號：S826.8+9 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2016）11-2846-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.11.033

豫西脂尾羊在動物分類學中屬牛科山羊亞科（Caprovinae）綿羊屬（Ovis）[1]，系蒙系綿羊，源于中亞和遠東地區，經過豫西人們長期馴化選育而成，因脂尾呈橢圓形，尾尖緊貼尾溝，將尾分為兩瓣，下垂于飛節之上；主要分布在原洛陽地區和原南陽地區北部，以臨汝縣最多，方城縣次之，故定名為“豫西脂尾羊”。血液蛋白及同工酶多態性可用于研究畜禽品種遺傳結構，探索品種的起源分化，親緣關系[2]以及與經濟性狀的相關性，早期檢測選種，縮短世代間隔，是血液生化遺傳標記的最常用指標，在動物遺傳標記領域一直占有十分重要的地位，對品種資源的保存和利用不但提供了有力的工具、有效的方法和豐富的研究資料等理論指導意義，而且在生產上有現實的使用價值[3]。目前，張才駿等[4，5]、馬海明等[6]、楊永新等[7]、臧榮鑫等[8]對優良品種綿羊血液蛋白多態性進行了研究。楊俊年[9]、楊慈清等[10]研究表明，血清酯酶的多態性與綿羊生產性能有一定相關性。本研究主要對豫西脂尾羊血清酯酶的多態性進行分析，這對于揭示豫西脂尾羊的種質特性、親緣關系、品種起源、進化歷程等方面均有重要的學術價值，為豫西脂尾羊的選育提高和保種提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料

采集40只純種豫西脂尾羊的新鮮血樣5 mL/只，肝素抗凝，低溫帶回實驗室，室溫下以1 500 r/min離心20 min，將上層血漿吸入滅菌小瓶，貼好標簽置于-20 ℃的冰柜中保存。體尺測量包括體長、體高、薦高、胸圍、胸深、胸寬、管圍，測量均參考《家畜育種學》的方法測定[11]。

1.2 方法

按楊廣禮[12]的方法制備凝膠，酯酶測定所用凝膠為8%分離膠和3.5%濃縮膠，淀粉酶測定所用凝膠為7.5%分離膠和4%濃縮膠，凝膠的配制成分及用量見表1。以160 V的電壓進行15 min的預電泳，然后穩壓200 V開始正式電泳，酯酶2.5～3.0 h，淀粉酶4.0～4.5 h。

血清酯酶：將電泳后的凝膠用蒸餾水漂洗后，放入酯酶的染色液（a-乙酸萘酯和β-乙酸萘酯各200 mg分別溶于10 mL丙酮和20 mL 0.15 mol/L的pH 7.5的磷酸緩沖液中，用前各取上清液10 mL再加入100 mg固藍RR鹽，用0.15 mol/L的磷酸緩沖液定容至100 mL），在37 ℃保溫20 min，取出凝膠用無離子水沖洗，酶帶呈紫色和褐色。置入7%的乙酸中保存。對Es的判型是按文獻[13，14]的方法進行。即：在15 min以內出現褐色區帶的為Es+ +型，雖然出現褐色區帶但較模糊的為Es+ -，出現紫紅色活性區帶的為Es- -。

2 結果與分析

2.1 血清酯酶（Es）

血清酯酶（Es）在豫西脂尾羊中存在多態性，根據顯帶顏色將其判定為Es+ +、Es+ -和Es- -。血清酯酶3種基因型Es+ +、Es+ -、Es- -的基因型頻率分別為0.425、0.250、0.325；血清酯酶有2個等位基因Es+和Es-，Es+和Es-的基因頻率分別為0.55、0.45。豫西脂尾羊Es基因型頻率和基因頻率見表2，可見Es+基因是豫西脂尾羊的優勢基因，其頻率為0.55。而Es+ +基因型是豫西脂尾羊的優勢基因型，其頻率為0.425。

2.2 血清酯酶多態與體尺性狀的關系

豫西脂尾羊的不同基因型血清酯酶對體尺指標（體長、體高、薦高、胸圍、胸深、胸寬、管圍）的影響結果見表3，不同基因型血清酯酶除了對薦高和胸圍有顯著影響外，對其他指標都無顯著影響（P>0.05）。在薦高方面，Es+ +基因型顯著高于Es+ -基因型，而兩者均與Es- -基因型的薦高（61.00）沒有顯著差異。在胸圍方面，Es+ +基因型極顯著高于Es- -基因型，而兩者均與Es+ -基因型沒有顯著差異。

3 討論

酯酶有羧基酯酶、膽堿酯酶和芳基酯酶3種酯酶，但只有芳基酯酶（Arylesterase，Es）存在多態性[10]，因此，豫西脂尾羊血清酯酶指芳基酯酶。按照張才俊等[4]的研究結果，根據Es的基因頻率可將綿羊分為兩大類：一類是Es-占有絕對優勢，其Es-基因頻率在0.8～1.0之間；另一類的Es+和Es-基因頻率大致相等，豫西脂尾羊的Es-基因頻率是0.45，故應屬于后一類綿羊。楊廣禮[12]研究發現，Es在甘肅藏羊和小尾寒羊中的表型均為Es+ +、Es+ -、Es- -，該位點受一對共顯性等位基因Es+、Es-控制，在甘肅藏羊中Es- -為優勢基因型，頻率為0.370 4，小尾寒羊中以Es- -為優勢基因型，其頻率為0.459 2。甘肅高山細毛羊、青海細毛羊、青海藏羊以Es+ -為優勢基因型，而灘羊以Es+ +為優勢基因型。如果以優勢基因計算的話，小尾寒羊、青海細毛羊以Es-為優勢基因；而甘肅高山細毛羊、青海藏羊、甘肅藏羊、灘羊以Es+為優勢基因。在本研究中，Es在豫西脂尾羊中以Es+為優勢基因，因此作為一個群體與其他群體不同的特殊蛋白位點，這與張慧茹等[15]的研究結果相一致。

楊俊年[9]和楊慈清等[10]研究表明，小尾寒羊Es+ +型的產羔數顯著（P<0.05）高于Es- -型和Es+ -型。而本研究與以上研究有相似的結果，從豫西脂尾羊的不同基因型血清酯酶對體尺指標和產羔數的影響中可以看出，按照Es- -、Es+ -、Es+ +的順序，第一胎次產羔數、第二胎次產羔數、第三胎次產羔數表現為增加趨勢，但是不同基因型血清酯酶對產羔數無顯著影響（P>0.05）。不同基因型血清酯酶除了對薦高和胸圍有顯著影響（P<0.05）外，對其他體尺指標都無顯著影響（P>0.05）。Es+ +基因型的薦高顯著高于Es+ -基因型的薦高（P<0.05），而兩者均與Es- -基因型的薦高沒有顯著差異（P>0.05）。Es+ +基因型的胸圍顯著高于Es- -基因型的胸圍（P<0.05），而兩者均與Es+ -基因型的胸圍沒有顯著差異（P>0.05）。

參考文獻：

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