長(zhǎng)吻鮠血液生理生化指標(biāo)的研究

摘要：試驗(yàn)以長(zhǎng)吻鮠（Leiocassis longirostris）為試驗(yàn)對(duì)象，對(duì)其血液的生理生化指標(biāo)進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果表明，長(zhǎng)吻鮠血液紅細(xì)胞數(shù)為（2.29±0.53）×1012個(gè)/L，白細(xì)胞數(shù)為（1.51±0.27）×1010個(gè)/L；血紅蛋白含量為（8.26±1.00） g/dL；滲透脆性測(cè)定中，開(kāi)始溶血氯化鈉濃度為（0.41±0.02）%，完全溶血氯化鈉濃度為（0.32±0.03）%；血清中血糖濃度為（5.56±2.41） mmol/L；總膽固醇含量為（4.22±1.10） mmol/L；甘油三酯含量為（2.65±1.95） mmol/L；乳酸脫氫酶活性為（4 022.37±604.71）U/L；堿性磷酸酶活性為（7.66±2.98） U/L；酸性磷酸酶活性為（13.25±2.24） U/L；谷草轉(zhuǎn)氨酶活性為（106.30±22.84） U/L；谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性為（42.53±20.26） U/L；肌酐含量為（22.18±9.16） μmol/L。

關(guān)鍵詞：長(zhǎng)吻鮠（Leiocassis longirostris）；血液；生理指標(biāo)；生化指標(biāo)

中圖分類號(hào)：Q461；S965.199 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2016）14-3690-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.14.037

Abstract： The research was aimed to determine the physiological and biochemical index of blood in Leiocassis longirostris. The results showed that the RBC number in the blood of Leiocassis longirostris was 2.29±0.53×1012 cell/L，while WBC number was 1.51±0.27×1010 cell/L. The HB content was 8.26±1.00 g/dL. The Osmotic fragility test of RBC showed that the concentration of NaCl was 0.41±0.02% when RBCs started to hemolyze，and the concentration of NaCl was 0.32±0.03% when RBCs hemolyzed completely. The content of the blood sugar，cholesterol and triglyceride in serum was 5.56±2.41 mmol/L，4.22±1.10 mmol/L and 2.65±1.95 mmol/L， respectively. The activity of LDH，AKP，ACP，GOT and GPT was 4022.37±604.71 U/L，7.66±2.98 U/L，13.25±2.24 U/L，106.30±22.84 U/L；and 42.53±20.26 U/L，respectively. The content of Cr was 22.18±9.16 μmol/L.

Key words：Leiocassis longirostris； blood； physiological index； biochemical index

長(zhǎng)吻鮠（Leiocassis longirostris）屬鯰形目鲿科鮠屬。體長(zhǎng)，吻呈錐形，并向前顯著突出。眼小，口下位，呈新月形，唇肥厚。須4對(duì)，細(xì)小。其腹部白色，體色灰白，屬于肉食性底層魚(yú)類，主要攝食水生昆蟲(chóng)與小型魚(yú)類。喜歡夜晚攝食，攝食時(shí)在水體的中下層。作為大型的經(jīng)濟(jì)魚(yú)類，其肉嫩味鮮美，又無(wú)細(xì)刺，蛋白質(zhì)含量高，富含脂肪，被譽(yù)為淡水食用魚(yú)中的上品。

目前，野生長(zhǎng)吻鮠資源較為缺乏，市場(chǎng)更是供不應(yīng)求。經(jīng)過(guò)人工馴化過(guò)的長(zhǎng)吻鮠可以在池塘、湖泊中飼養(yǎng)。近年來(lái)，長(zhǎng)吻鮠的人工養(yǎng)殖已經(jīng)在四川、湖北、安徽、廣東等省市迅速發(fā)展[1]。隨著長(zhǎng)吻鮠水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的不斷發(fā)展，其疾病的流行也日益嚴(yán)重。血液是動(dòng)物體內(nèi)循環(huán)的重要組成部分，它起著生理調(diào)節(jié)、物質(zhì)運(yùn)輸以及生理防御等重要功能[2]。血液生理生化指標(biāo)是魚(yú)類重要特征之一，能夠反映出魚(yú)類正常的生理狀態(tài)，也可用于評(píng)價(jià)魚(yú)類的營(yíng)養(yǎng)水平、健康狀況及環(huán)境的水質(zhì)情況等[3-6]，當(dāng)魚(yú)體受到外在條件的影響而發(fā)生了生理或病理變化時(shí)，血液的生理生化指標(biāo)也必定會(huì)發(fā)生變動(dòng)[7]。國(guó)內(nèi)外學(xué)者關(guān)于魚(yú)類血液指標(biāo)研究已有很多報(bào)道[8-14]，但有關(guān)于長(zhǎng)吻鮠的報(bào)道較少，并且主要集中在長(zhǎng)吻鮠的營(yíng)養(yǎng)需要、幼魚(yú)發(fā)育等方面[15-18]。本試驗(yàn)通過(guò)測(cè)定長(zhǎng)吻鮠的血液生理生化指標(biāo)，以增加人們對(duì)其生理生化特征的了解，為長(zhǎng)吻鮠的魚(yú)病防治和養(yǎng)殖提供理論參考[7]。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)魚(yú)來(lái)源與暫養(yǎng)

試驗(yàn)魚(yú)于2014年8月1日購(gòu)于天津薊縣藍(lán)科水產(chǎn)養(yǎng)殖有限公司，共32尾，平均體長(zhǎng)（18±3） cm/尾，平均體重（150±30） g/尾，置于塑料箱中暫養(yǎng)，氣石24 h不間斷充氣。

1.2 生理生化指標(biāo)測(cè)定方法

血細(xì)胞計(jì)數(shù)采用血球計(jì)數(shù)板法。

紅細(xì)胞脆性測(cè)試方法如下：取10個(gè)小試管，分別加入10 mL不同質(zhì)量濃度（0.25%、0.30%、0.35%、0.40%、0.45%、0.50%、0.55%、0.60%、0.65%、0.90%）的氯化鈉低滲溶液，每個(gè)小試管再加入混有肝素的血液一滴，輕輕搖勻，靜置1～2 h，根據(jù)各管中液體顏色和渾濁度的不同，判斷紅細(xì)胞的脆性。

血糖、甘油三酯、總膽固醇、谷草轉(zhuǎn)氨酶（GOT）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（GPT）、酸性磷酸酶（ACP）、堿性磷酸酶（AKP）、肌酐、乳酸脫氫酶等指標(biāo)的測(cè)定，均使用南京建成生物工程研究所出產(chǎn)的試劑盒及其附帶方法。

1.3 數(shù)據(jù)處理方法

試驗(yàn)數(shù)據(jù)均使用Excel 2007進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理，結(jié)果以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 血液生理指標(biāo)

由表1可見(jiàn)，正常長(zhǎng)吻鮠血液中紅細(xì)胞為（2.29±0.53）×1012個(gè)/L，而白細(xì)胞數(shù)相對(duì)較少，為（1.51±0.27）×1010個(gè)/L，分散在紅細(xì)胞之間；血紅蛋白含量為（8.26±1.00） g/dL；滲透脆性測(cè)定中，開(kāi)始溶血氯化鈉濃度為（0.41±0.02）%，完全溶血氯化鈉濃度（0.32±0.03）%。

2.2 血液生化指標(biāo)

由表2可見(jiàn)，正常長(zhǎng)吻鮠血清中的血糖濃度為（5.56±2.41） mmol/L；總膽固醇含量為（4.22±1.10） mmol/L；甘油三酯含量為（2.65±1.95） mmol/L；肌酐含量為（22.18±9.16） μmol/L。乳酸脫氫酶活性為（4 022.37±604.71） U/L；堿性磷酸酶活性為（7.66±2.98） U/L；酸性磷酸酶活性為（13.25±2.24） U/L；谷草轉(zhuǎn)氨酶活性為（106.30±22.84） U/L；谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性為（42.53±20.26） U/L。乳酸脫氫酶活性遠(yuǎn)高于其他酶類，堿性磷酸酶活性最低。

3 小結(jié)與討論

3.1 長(zhǎng)吻鮠血液細(xì)胞數(shù)與血紅蛋白含量

魚(yú)類血細(xì)胞參數(shù)是血液指標(biāo)的重要組成部分，參數(shù)特征可以用來(lái)反映魚(yú)體健康狀況以及生存環(huán)境情況。血紅蛋白是紅細(xì)胞中負(fù)責(zé)運(yùn)載氧的一種蛋白質(zhì)，它和紅細(xì)胞的主要功能是攜帶與運(yùn)輸氧氣，以滿足魚(yú)類正常的生命活動(dòng)的需要。所以紅細(xì)胞數(shù)值與血紅蛋白含量直接反映了機(jī)體的耐低氧能力[19]。另外，魚(yú)類營(yíng)養(yǎng)狀況對(duì)其血液指標(biāo)產(chǎn)生重要影響。錢(qián)云霞等[6]對(duì)養(yǎng)殖鱸魚(yú)的饑餓試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)饑餓對(duì)鱸魚(yú)血液生理生化指標(biāo)產(chǎn)生顯著影響。鱸魚(yú)在饑餓2周后，紅細(xì)胞的數(shù)目便開(kāi)始顯著下降。南方鯰魚(yú)饑餓后，紅細(xì)胞數(shù)與血紅蛋白含量急劇下降[12]。在本試驗(yàn)中，長(zhǎng)吻鮠紅細(xì)胞數(shù)目為（2.29±0.53）×1012個(gè)/L，血紅蛋白含量為（8.26±1.00） g/dL。趙海鵬[20]對(duì)野生長(zhǎng)吻鮠的研究結(jié)果中，紅細(xì)胞數(shù)目為（1.85±0.53）×1012個(gè)/L，血紅蛋白含量為（4.75±0.56） g/dL。由此看出，養(yǎng)殖的長(zhǎng)吻鮠的紅細(xì)胞數(shù)目與血紅蛋白含量都比野生長(zhǎng)吻鮠的高。這可能是由于長(zhǎng)吻鮠在養(yǎng)殖條件下餌料比較充足，營(yíng)養(yǎng)豐富；而野生長(zhǎng)吻鮠可能經(jīng)常受到饑餓與營(yíng)養(yǎng)不良的影響，血液的運(yùn)輸氧的能力下降，代謝水平降低。

白細(xì)胞是機(jī)體與疾病斗爭(zhēng)的“衛(wèi)士”，它擔(dān)負(fù)著許多重任，具有吞噬異物并且產(chǎn)生抗體的作用。還具有抗御病原入侵、機(jī)體傷病的損傷治愈、對(duì)疾病的免疫抵抗能力等。當(dāng)機(jī)體出現(xiàn)不適時(shí)，便啟動(dòng)機(jī)體的免疫防御機(jī)制，通過(guò)升高白細(xì)胞數(shù)量增加自身抵抗力，來(lái)維持機(jī)體基本生命活動(dòng)。白細(xì)胞參數(shù)存在性別差異，趙明薊等[11]對(duì)鯉和草魚(yú)的研究發(fā)現(xiàn)，白細(xì)胞在性腺已經(jīng)成熟或接近成熟時(shí)才表現(xiàn)出兩性差異。長(zhǎng)吻鮠的白細(xì)胞數(shù)量為（1.51±0.27）×1010個(gè)/L，黃顙魚(yú)[21]的白細(xì)胞數(shù)為（3.38±0.25）×1010個(gè)/L，二者生活習(xí)性相似，但長(zhǎng)吻鮠的白細(xì)胞比黃顙魚(yú)少得多。這可能是長(zhǎng)吻鮠的免疫力、抗病力差，更容易患病的重要原因之一。

3.2 長(zhǎng)吻鮠血液紅細(xì)胞脆性

紅細(xì)胞的膜對(duì)低滲溶液具有一定的抵抗力，這一特征稱之為紅細(xì)胞的滲透脆性。紅細(xì)胞膜對(duì)低滲溶液的抵抗力越大，紅細(xì)胞在低滲溶液中越不容易發(fā)生破碎，也就是紅細(xì)胞滲透脆性越小。有關(guān)紅細(xì)胞滲透脆性指標(biāo)的測(cè)定較少。在本試驗(yàn)中，長(zhǎng)吻鮠紅細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)溶血時(shí)氯化鈉濃度為（0.41±0.02）%，完全溶血時(shí)氯化鈉溶度為（0.32±0.03）%。瓦氏黃顙魚(yú)[22]剛?cè)苎獣r(shí)對(duì)應(yīng)的氯化鈉濃度是（0.45±0.01）%，完全溶血時(shí)對(duì)應(yīng)的氯化鈉濃度是（0.27±0.01）%。這表明長(zhǎng)吻鮠紅細(xì)胞對(duì)低滲溶液的抵抗力與瓦氏黃顙魚(yú)相近，這可能與它們的生活習(xí)性相似有關(guān)。

3.3 長(zhǎng)吻鮠血液中血糖、總膽固醇、甘油三酯和肌酐的含量

糖、脂肪、蛋白質(zhì)是魚(yú)類獲得能量的重要來(lái)源。葡萄糖是許多組織的必需燃料，是機(jī)體維持基本生命活動(dòng)的保證。魚(yú)體的血糖濃度容易受到外界刺激而變化。鱸魚(yú)在饑餓7 d后血糖濃度顯著降低，之后保持相對(duì)穩(wěn)定[6]。魚(yú)類在受傷或患病的時(shí)候，血糖濃度也會(huì)變化，如患有敗血癥的鰱魚(yú)其血糖濃度顯著升高[23]。長(zhǎng)吻鮠與鳙魚(yú)[24]、草魚(yú)[24]血糖、甘油三酯等生化指標(biāo)見(jiàn)表3。由表3可知，長(zhǎng)吻鮠的血糖濃度最低，草魚(yú)的血糖濃度最高。林光華等[25]認(rèn)為，魚(yú)類的活動(dòng)性和食性影響它的血液指標(biāo)的高低。一般活動(dòng)性越強(qiáng)的魚(yú)類，血糖含量越高。養(yǎng)殖的長(zhǎng)吻鮠多靜臥于池底，活動(dòng)性較弱，需要較少能量來(lái)維持運(yùn)動(dòng)，草魚(yú)力大性剛，性情活潑，活動(dòng)性較強(qiáng)。因而，血糖濃度與魚(yú)類的生活習(xí)性息息相關(guān)。

總膽固醇是血液中所有脂蛋白所含膽固醇之總和，是脂肪在血液中存在的一種形式。膽固醇在生物學(xué)中起著重要作用，是一些激素和酶類的合成原料，魚(yú)類正常生命活動(dòng)的必需物質(zhì)[26]。甘油三酯是魚(yú)類脂類代謝的主要物質(zhì)，體脂高的魚(yú)類血脂一般也高，血脂與體脂有正相關(guān)性[27]。肌酐主要是肌酸與磷酸肌酸代謝的最終產(chǎn)物，因此，肌酐含量與肌肉活動(dòng)密切相關(guān)[28]。肌酐的產(chǎn)量一定，而且不會(huì)在過(guò)濾后被腎小管重吸收，它的排泄量能夠反映出腎臟的機(jī)能。當(dāng)腎臟發(fā)生病變時(shí)，肌酐排泄受阻，血液中肌酐含量顯著升高[29]。由表3可見(jiàn)，長(zhǎng)吻鮠甘油三酯與總膽固醇含量與草魚(yú)較為接近，高于鳙魚(yú)。肌酐含量排序?yàn)轺~(yú)>草魚(yú)>長(zhǎng)吻鮠。長(zhǎng)吻鮠為養(yǎng)殖魚(yú)類，比較容易獲取餌料，活動(dòng)量較少，因而肌酐含量少。正由于活動(dòng)量少，消耗的能量較低，所以貯存的脂肪較多，總膽固醇與甘油三酯含量較高。與此相對(duì)應(yīng)，鳙魚(yú)為濾食性魚(yú)類，主要以浮游動(dòng)物為食，需要長(zhǎng)時(shí)間活動(dòng)來(lái)濾取食物，活動(dòng)量較大，因而血清中肌酐含量較高，總膽固醇與甘油三酯含量低。至于總膽固醇、甘油三酯含量與肌酐的具體關(guān)系有待更深入的研究。

3.4 長(zhǎng)吻鮠血液生化指標(biāo)

堿性磷酸酶是一種重要的代謝調(diào)控酶，直接參與磷酸基團(tuán)的轉(zhuǎn)移，并且也是魚(yú)類溶酶體酶的重要組成部分，在免疫過(guò)程中發(fā)揮重要作用[9]。酸性磷酸酶是巨噬細(xì)胞溶酶體的標(biāo)志酶，在血液與血細(xì)胞中起重要的機(jī)體防御功能[30]。血細(xì)胞進(jìn)行吞噬過(guò)程中，會(huì)伴隨著酸性磷酸酶的釋放。

谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶在蛋白質(zhì)代謝中起重要的作用，是魚(yú)類生命活動(dòng)中不可缺少的酶類之一。它們是存在于線粒體中的重要的氨基酸轉(zhuǎn)氨酶，血清中它們的活性一般不高。谷草轉(zhuǎn)氨酶主要存在于肝臟中，它能夠反映出肝臟的生理狀態(tài)[31]。當(dāng)組織發(fā)生病變或者組織受損較為嚴(yán)重時(shí)，谷丙轉(zhuǎn)氨酶便會(huì)釋放到血液中，血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶含量便會(huì)顯著提高。它是肝細(xì)胞壞死的最具有特異性和應(yīng)用最廣泛的指標(biāo)[32]。

從圖1可以看出，長(zhǎng)吻鮠與黃顙魚(yú)除堿性磷酸酶活性有差異外，其他酶活性均比較接近?？赡苡捎陂L(zhǎng)吻鮠與黃顙魚(yú)都屬于底層肉食性魚(yú)類，生活習(xí)性相似的原因。

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