快速乳制品微生物檢測技術分析

摘 要：民以食為天，食以安為先，食品安全問題始終是目前社會上最受關注的問題之一。隨著人們生活品質的提高，乳制品開始成為了人們生活中的必備品，我國的乳制品生產行業也得到了巨大的發展，但是如何確保乳制品衛生安全也成為了乳制品生產行業的首要難題。文章主要針對當前我國乳制品微生物檢測相關技術進行了分析，并著重針對當前較為常見的快速檢測技術進行論述，以此闡釋快速檢測技術是當前乳制品生產領域不可或缺的。

關鍵詞：微生物；乳制品；快速檢測

隨著生活質量的提升，人民越來越重視健康和生活品質，乳制品以其豐富的營養深受人們的喜愛。但是乳制品也同樣是微生物生長繁殖的培養基，生產加工過程以及運輸儲藏過程中，乳制品都有可能被微生物污染。乳制品的質量以及保質期會直接受到產品中微生物含量影響，并且乳制品中超標的微生物更會對人們的健康安全造成威脅。傳統的乳制品生產中，針對微生物的檢測主要使用平板計數法，但是該檢測時間相對較長，已經無法滿足當前人們對食品安全的要求。因而乳制品企業針對微生物檢測技術的研究中，開始將研發重點放在快速檢測技術上。下面便針對當前我國主流的幾種快速微生物檢測技術進行分析。

1 ATP生物熒光快速檢測技術

傳統的微生物檢測技術主要為細菌采樣、培養監測，該種方式不但需要較長的培養周期，并且對操作人員的專業要求較高，費時費力。隨著科技的發展，ATP檢測技術應時而生，通過該方法可以快速獲取定量結果，因而微生物快速檢測領域發揮了巨大的優勢。不但如此，該方法在生物代謝、基礎生物學等領域同樣得到了廣泛的認可。

ATP是三磷酸腺苷的簡稱，存在于所有生物體中。目前已經證明了微生物濃度與ATP濃度之間的相互關系，可以通過ATP濃度的測定，反映細菌數目的實際情況。ATP生物熒光檢測儀是ATP生物熒光法的承載工具，目前主流的ATP生物熒光檢測儀有低端的手持型和高端的商業無菌型兩種。低端手持型ATP生物熒光法的檢測步驟簡單，僅需進行取樣操作，相關檢測儀器就會自動提取目標樣品中的ATP，進行熒光染色，掃描放射出的熒光，求出ATP濃度和活菌數，故其在地方小型乳制品生產企業中非常常見。高端的ATP生物熒光檢測儀操作步驟稍微復雜，需要一定的規范操作，不過也是取樣之后只要靜待結果即可。

一般在取樣之后30分鐘之內會得出結果。ATP熒光檢測儀的優點是：（1）檢測速度快。相對比傳統的檢測激素，ATP生物熒光檢測技術無需進行細菌培養，因而具有較快的檢測速度；（2）測定的范圍廣，由于熒光染料可以染色的為例較多，因而該技術測定范圍相對較廣；（3）操作簡單。缺點卻是：（1）低端檢測儀靈敏度不夠高，高端檢測儀相關試劑較貴；（2）受游離ATP和體細胞干擾；（3）受鹽等成分干擾等。因為這些缺點，一般低端的ATP生物熒光法僅適合用作原料奶和即將到保質期產品的檢測，對于其他乳制品微生物檢測中，該技術檢測結果誤差較大，特別是要求保質期較長的高保值期產品來說不準確。經過長期與傳統平板計數法的比較，高端ATP生物熒光法與平板計數法的相似度很高，達到0.95以上，可以作為乳制品企業判斷微生物含量指標的可靠依據，而低端的效果不理想。

雖然實際的應用中ATP生物熒光檢測技術存在無法避免的缺陷，但是事物存在必然有其兩面性，乳制品生產企業應當結合自身生產實際需求慎重選擇微生物檢測技術。

2 電阻抗快速檢測技術

該檢測技術主要以樣品電導特性的改變為基礎，微生物在生長、代謝時會引發培養基電導特性發生改變，通過對該變化的測量，便能夠對微生物含量進行快速確定。微生物在被培養過程中，對培養基中大分子營養物質（碳水化合物、脂肪、蛋白質等）通過代謝作用轉化為小分子物質（乳酸鹽、氨基酸等），該物質具有微電活性，易于吸收利用。隨著培養時間的延長，培養基中會逐漸累積電活性物質，致使培養基導電性增加。從接種微生物結束時起到可檢測出培養基阻抗值變化所需時間稱為檢出時間（DT），研究發現，DT值與培養基中微生物的初始濃度的對數值存在著一定相關性，即微生物的初始濃度越大，DT值越小，反之則越大。在正式檢測前，需建立微生物的初始濃度的對數值與DT值之間的標準曲線。在對樣品進行檢測時需要進行稀釋，需要注意的是稀釋操作需要按比例進行。完成稀釋操作后進行接種培養，得到微生物DT值，依照該指數可以確定微生物初始濃度?；谏鲜鲈?，可以快速檢測到乳制品中的微生物數量。該方式相對于其他快速檢測方式，具有較強的特異性，并且靈敏性較高、反應相對較快，能夠重復利用。

相對比ATP檢測技術，電阻抗檢測技術相對復雜。應用該技術首先需要進行增菌培養，通過特定的培養基培養菌落，只有細菌濃度達到一定值時才可以使用特定的測量阻抗的設備進行分析。該方式在檢測即將到期的乳制品以及原料奶中微生物數量中較為快捷，但針對標準化成品以及半成品，利用電阻抗檢測技術則需要較長的檢測時間。阻抗測量設備依照電極接觸方式不同還可以將檢測方式分為直接測量、間接測量兩種。在實際的生產檢測中，間接測量更加常用，這是因為間接測量法測量電極無需直接接觸培養基，如此無需進行培養基優化。除此之外，間接測量方法還可以針對特殊培養基進行測量。而直接測量法由于測量電極接觸培養基，因而測量數據會受到樣品的影響，因而產生誤差較大。

3 流式細胞計數快速測量技術

該種快速檢測技術應用相對較廣，通過利用熒光標記技術，對乳制品中的微生物進行檢驗。由于利用了熒光標記技術作為基礎技術支持，凡事可以被標記的微粒、細胞都可以利用專業的設備檢測出來，其具有快速、靈敏、高精度、多元化的技術優勢因而在微生物檢測領域迅速得到了推廣。但是該技術的前期投入相對較高，并且樣品處理以及熒光染料的選擇都會影響檢測結果。除此之外流式細胞計數設備價格相對較高，日常維護費用也相對昂貴，并且要求操作人員具備相應的專業素養。這并不影響流式細胞計數檢測技術的發展，該技術以其全面、高效、準確的檢測效果得到了廣泛認可。但是相關生產企業需要綜合考量自身經濟實力以及實際需要進行選擇。

利用該技術進行微生物檢測需要利用專業的檢測設備，該設備檢測速率可以達到5000個/S～10000個/S，并且可以檢測微生物的表征、內部構造、外部構造以及體積大小等相關參數，全面檢測乳制品中微生物含量。利用流式細胞計數技術可以在1min左右獲取結果，相比較前兩種快速檢測技術，該技術無需進行樣品的制備、培養，節省了時間、人力、物力等，在現代化快速生產要求越來越高的今天，該技術十分實用。

4 結束語

由于我國對食品安全監管越來越嚴格，與人們生活息息相關的乳制品安全監控力度逐漸加大，乳制品食品安全問題主要集中在微生物污染方面，傳統針對食源性致病菌標準檢測相對復雜，不但操作繁瑣、檢驗周期長，對技術操作人員的要求也相對較高，著對于食品的流通、生產等極為不利。因此乳制品生產技術研發開始將重點轉向微生物快速檢驗，各類快速微生物檢驗技術應時而生，并在乳制品檢驗領域得到了廣泛認可，進一步推進了我國乳制品生產業的發展。

參考文獻

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