藍莓組織培養體系的建立

摘要：本文以藍豐為試驗對象，確定了藍莓外植體的最佳消毒時間是8-10min，最適宜的增殖培養基為WPM+ZT1.0mg/L+IBA0.1mg/L，最最適宜的生根粉（ABT 1號）濃度為1.0g/L。

關鍵詞：藍莓；組織培養；增殖；生根

藍莓（Blueberry），又名越橘，是一種多年生的落葉果樹。藍莓，果實為深藍色，因此得名藍莓。藍莓在我國的種植時間比較長，主要的種植區域在我國的華東、華中、華南到西南以及東北地區，野山藍莓主要分布在山地以及不規則的丘陵地帶，主要海拔高度為400～1400 米[1]。藍莓果實中含有大量的營養物質，平均每100克新鮮果實內含蛋白質600mg，脂肪550 nag，碳水化合物14 g，并且還含有豐富的維生素和微量元素，尤其是Ca、P、Mg、Zn、Fe、Cu含量特別豐富，其抗氧化能力顯著高于其它水果[2]。

本試驗以現在種植面積比較大的藍豐品種為研究對象，對其組織培養體系的建立進行了研究，希望可以為我國藍莓的繁殖技術提供參考依據。

1試驗材料與方法

1.1 試驗材料

本次試驗的材料取自聊城市農科院的自建苗圃內。

1.2試驗方法

1.2.1 初代培養

在春季藍莓剛剛開始發芽時，挑選生長良好，沒有病蟲害的當年生紙條，用枝剪剪下，然后簡稱1cm作用長度的小段，一個小段上至少帶一個飽滿芽，用流動的自來水沖洗30min，然后在超凈臺內用75% 的酒精首次消毒處理，時間30s，用無菌水沖洗3-5次，以外植體上完全沒有酒精味道為準，然后再用0.1%的HgCl溶液進行二次消毒處理，完成后再用無菌水沖洗3-5次。根據HgCl消毒時間的長短，分為6個處理，每個處理50瓶，每瓶1個外植體，重復3次。45天后統計外植體的生長情況。

1.2.2增殖培養

在初代培養基內培養45天后，轉移到增殖培養基內（蔗糖含量、瓊脂含量、pH、溫度、光照時間同上），基本培養基為WPM，根據ZT和IBA的濃度，分為9個處理，每個處理20瓶。每瓶5個，重復3次。45天后統計外植體的增殖情況。

1.2.3 生根培養

培養50天，用剪刀分成單株，然后用生根粉蘸根，栽植到生根基質（苔蘚）中，大約45天后，其根部就會長出細小的根系。根據生根劑的濃度分為4個處理。每個處理100顆小苗，重復3次。45天后統計生根情況。

2 實驗結果及分析

2.1 不同消毒時間對消毒效果的影響

消毒時間依次為4、6、8、10.、12min，其污染率分別為92%、11%、4%、2%、4%、2%，萌芽率依次為4%、83%、93%、92%、86%、85%。消毒時間少于6min，消毒效果不理想，污染率比較高，消毒時間超過12min，外植體就會因為汞中毒影響發芽率，所以消毒時間控制在8-10min最合適，此時外植體的污染率最低，萌芽率最高。

2.2 不同激素濃度對外植體增殖及生長的影響

通過表2可以看出當ZT的濃度一樣時，IBA的濃度變化對外植體的增殖倍數影響較小，但是當IBA的濃度一樣時，ZT的濃度變化對外植體的增殖倍數影響較大，當ZT的濃度為1.0 mg/L時，其增殖倍數顯著高于ZT濃度為0.5mg/L時的增殖倍數，但是當ZT的濃度為1.5 mg/L時，其增殖倍數和ZT濃度為1.0mg/L時的增殖倍數沒有顯著差異。結合顏色和莖粗可確定最適宜的增殖培養基為WPM+ZT1.0mg/L+IBA0.1mg/L。

2.3 不同生根劑濃度對組培苗生根率的影響

本次使用的生根劑為ABT1號，通過表3可以看出當生根劑的濃度為1.0 g/L時組培苗的生根率最高，平均生根數量最多，所以最適宜的生根粉濃度為1.0g/L。

3 結論

（1）基本培養基為WPM，蔗糖含量為30g/L，瓊脂含量為6g/L，pH5.8。溫度25℃，光照時間16h。

（2）外植體的消毒方式：先用流動的自來水沖洗30min，然后用75%的酒精浸泡30s，最后用O.1%的氯化汞浸泡8-10min。

（3）增殖培養：ZT濃度為1.0mg/L，IBA濃度為0.1mg/L。

（4）生根培養：ABT 1號的濃度為1.0g/L。

近年來，我國關于藍莓的相關研究取得了很大的成績，但是，藍莓優質種苗的培育和大量繁殖依然是阻礙藍莓產業快速發展的一大障礙。所以，這就要求相關專家在培育優質藍莓品種的同時，繼續深入研究不同藍莓品種的最優組織培養基配方，為藍莓的快速繁殖奠定基礎。

參考文獻：

[1] 張鳳生，鹿娜，姜淼，李健虹，薛丹丹，王保菊，武斌，趙娜. 藍莓組織培養與快速繁育[J].黑龍江農業科學，2009（3）：3-5.

[2] 鄭理喬. 兔眼藍莓組織培養技術的研究[D].安徽農業大學，2012.