999精品在线视频,手机成人午夜在线视频,久久不卡国产精品无码,中日无码在线观看,成人av手机在线观看,日韩精品亚洲一区中文字幕,亚洲av无码人妻,四虎国产在线观看 ?

甜瓜PI390452霜霉病抗性基因的QTL定位

2017-01-09 03:11:50張學軍寧雪飛楊永李寐華王賢磊伊鴻平
新疆農業科學 2016年12期
關鍵詞:研究

張學軍,寧雪飛,楊永,李寐華,王賢磊,伊鴻平

(1.新疆農業科學院哈密瓜研究中心,烏魯木齊 830091;2.新疆大學生命科學與技術學院,烏魯木齊 830046)

甜瓜PI390452霜霉病抗性基因的QTL定位

張學軍1,寧雪飛2,楊永1,李寐華1,王賢磊2,伊鴻平1

(1.新疆農業科學院哈密瓜研究中心,烏魯木齊 830091;2.新疆大學生命科學與技術學院,烏魯木齊 830046)

【目的】研究甜瓜抗霜霉病資源PI390452,分析PI390452抗性遺傳規律,并對抗病基因進行QTL定位分析,為甜瓜抗霜霉病分子輔助育種奠定基礎?!痉椒ā坑锰鸸纤共〔≡鶾Pseudoperonosporacubensis(Berk.etCurt.)Rostov.]對PI390452×卡拉克賽(高感霜霉病)雜交后代F2分離群體及F2∶3家系人工接種鑒定,以F2分離群體為研究對象,基于ICuGI已構建對應分子標記連鎖圖譜,應用BSA法和1 090對甜瓜SSR引物進行連鎖遺傳分析,采用QTL IciMapping軟件定位霜霉病QTL位點?!窘Y果】資源PI390452霜霉病抗性符合數量性狀遺傳的特點。共檢測到3個霜霉病抗性基因的QTL位點qR1-1-1、qR1-3-1、qR2-2-1,分別位于chr-5、chr-10、chr-9上,qR2-2-1表型變異率最大為80.84%?!窘Y論】位于chr-9上的qR2-2-1是控制甜瓜霜霉病主效QTL位點,為甜瓜抗霜霉病分子標記輔助育種、抗病基因精細定位、克隆提供了技術支持。

甜瓜;霜霉??;數量性狀基因(QTL);SSR分子標記

0 引 言

【研究意義】甜瓜(CucumismeloL.)為葫蘆科(Cucurbitaceae)甜瓜屬(CucumisLinn)一年生草本植物,是國內外重要的園藝作物和經濟作物[1,2]。在世界大宗水果排名中居第9位,中國甜瓜栽培已有三千多年的歷史,是甜瓜生產及消費第一大國,年產量已超過100×104噸[3-5]。瓜類霜霉病是由鞭毛菌亞門,古巴霜霉菌[Pseudoperonosporacubensis(Berk.etCurt.)Rostov.]引起的真菌性病害,威脅著世界上80多個國家的黃瓜生產和50多個國家的甜瓜生產,并且有不斷增多的趨勢[6-8]。瓜類霜霉病主要危害葉片,發病初期在葉片上形成水浸狀小斑點,病斑擴大后,受葉脈限制呈黃褐色角斑,并伴有灰黑色霉層產生,最后葉片成片發黃甚至枯焦,俗稱“跑馬干”[9]。嚴重影響光合作用,流行年份可減產30%~50%,嚴重的70%~80% ,甚至絕產[10]。由于該病危害嚴重,流行性強,難于防治,因此,開展甜瓜霜霉病抗性遺傳研究,定位抗病基因,培育抗霜霉病甜瓜品種具有重要意義。【前人研究進展】國內外學者對甜瓜抗霜霉病遺傳規律研究較多,甜瓜霜霉病的抗性主要存在以下幾個觀點:由1個單顯性基因控制;由不完全顯性基因控制;由寡基因控制,并認為這些基因具有不完全顯性;由部分顯性基因控制;由一對隱性基因控制;而近年來的研究認為霜霉病抗性是一個數量性狀,由多基因控制。國內外對甜瓜霜霉病抗性資源分子標記研究相對較少。楊柳燕等[11]以DM3為研究材料,找到了與抗霜霉病基因連鎖的SRAP標記me8em11,遺傳距離為9.8 cM;賀玉花等[12]以PI414723為研究材料,發現DE1887、DE1320和DE085SSR標記與抗霜霉病基因存在連鎖關系,遺傳距離分別為26 cM、26 cM、13.69 cM,但是都沒有對標記進行定位。國外一直未見甜瓜抗霜霉病抗性資源分子標記報道,2005年Perchepied[13]利用抗原PI124112,以重組自交系為研究材料,將甜瓜霜霉病抗病基因定位第V連鎖群上。【本研究切入點】迄今為止,國內外對資源PI390452控制甜瓜霜霉病抗性的QTL研究至今未見報道。研究利用抗霜霉病甜瓜資源PI390452和高感霜霉病主栽農家品種卡拉克賽為親本構建遺傳群體,對甜瓜抗霜霉病基因進行遺傳規律分析?!緮M解決的關鍵問題】研究以F2群體為作圖材料,利用分離群體分組分析(BSA)法和簡單序列重復(SSR)技術,實現抗霜霉病基因的QTL定位研究,并獲得與其連鎖的分子標記,為該基因精細定位及克隆奠定基礎,為甜瓜 MAS育種提供實用技術,加速選育符合市場需求的抗病甜瓜新品種。

1 材料與方法

1.1 材 料

研究于2015~2016年在新疆農業科學院哈密瓜研究中心海南三亞育苗溫室進行。抗源PI390452(P1),引自美國農業部國家植物種質資源體系,于新疆農業科學院哈密瓜中心保存,高抗霜霉病,綠皮,橢圓形,有深溝,軟肉,網紋全,品質差;卡拉克賽(P2)由新疆農業科學院哈密瓜研究中心提供,高感霜霉病,墨綠皮,脆肉,網紋粗而稀,風味好,口感佳,新疆主栽農家品種。P1×P2雜交獲得F1,F1自交獲得139個F2個體,F2再自交獲得F3,形成含139個株系的 F2∶3家系。接種所用的霜霉病[Pseudoperonosporacubensis(Berk.etCurt.)Rostov.]采自海南三亞早期自然發病的甜瓜葉片。SSR引物來自兩部分,國內外相關發表文獻已經發表的[14-17]和國際葫蘆科網站中甜瓜信息(http://www.icugi.org/cgi-bin/ICuGI/in-dex.cgi)。

1.2 方 法

1.2.1 甜瓜霜霉病抗性的苗期人工接種鑒定

于2015年2和11月在新疆農業科學院哈密瓜研究中心海南三亞育苗溫室內進行鑒定,鑒定試材包括親本、F1、F2和 F2∶3家系(139 份),F2群體于2015年2月鑒定,F2:3家系于2015年11月鑒定。抗病鑒定前將種子72℃高溫殺菌48 h后再播入裝有基質的營養缽中,基質是由椰糠、黃沙按體8∶1比例混合均勻而成,基質和營養缽都經20%福爾馬林滅菌殺毒。F2∶3家系鑒定采用隨機區組設計,3次重復,每個重復20株,以卡拉克賽為感病對照,苗期正常管理。

采用噴霧法[18]進行霜霉病接種,接種濃度為5×103/mL個孢子。待80%以上甜瓜幼苗第2片真葉完全展平時,噴霧接種,用小型手持噴霧器將配制好的孢子懸浮液均勻噴于植株葉片正反面上,直到流水為止,接種后架小拱覆膜保濕,PE膜上加黑色遮陰網保持黑暗和控制溫度,夜間24℃,白天30℃,相對濕度95%以上。接種后15 d調查發病情況。參照Criswell(2008)和Epinat C(1994a,1994b)[19-21]的抗性分級標準,并適當修正,將病情分為6個級別:0級:無任何癥狀;1級:病斑面積占整個葉片面積的1/4以下;2級:病斑面積占整個葉片面積的1/4~1/2;3級:病斑面積占整個葉片面積的1/2~2/3;4級:病斑面積占整個葉片面積的2/3~3/4;5級:病斑面積占整個葉片面積的3/4以上。計算病情指數(DI),DI=∑(每個病級的植株數×級別數)/(總植株數×最高級別數)×100??剐苑旨墭藴剩焊呖?HR):0<病情指數≤10; 抗病(R):10<病情指數≤20;中抗(MR):20<病情指數≤40;感病(S):40<病情指數≤60;中感(MS):60<病情指數≤80;高感(HS):病情指數>80。

1.2.2 DNA提取和SSR分析

取0.5~1.0 g甜瓜幼嫩葉片,于液氮中研磨成粉末狀,裝入2.0 mL的離心管中,用天根生化科技(北京)有限公司的植物基因組DNA提取試劑盒提取基因組DNA,用Quawell Q3000測量DNA濃度最終調整至100 mg/L備用。F2代抗感基因池的構建取抗病(0級)和感病(5級)的F2代單株各5株等量的DNA,分別混合構建抗感基因池。SSR反應體系(20 μL)中含有:模板DNA50ng,TaqDNA聚合酶1.2U,dNTPs 2.25 mmol/L,Mg2+1.75 mmol/L,正反引物各0.6 μmol/L,2 μL 10×PCR buffer,擴增反應在TC-512(TECHNC)PCR儀上進行。擴增程序為94℃預變性5 min;94℃變性1 min,52℃退火45s,72℃延伸1 min,40個循環;72 ℃延伸7 min;4℃保存。6%聚丙烯酰胺膠進行電泳,恒壓100V,電泳2~3 h。電泳結束后,采用銀染方法進行染色來檢測條帶。

1.2.3 SSR標記篩選、數據統計

用1 090對SSR引物PI390452、卡拉克賽進行篩選,獲得具有多態性的引物。參照分離組群分析法(BSA法),在F2代群體的139個單株中,根據苗期霜霉病接種鑒定結果,選取高抗(0級)和高感(5級)的單株各5株,分別提取DNA,用Quawell Q3000測量濃度,然后將高抗和高感植株的DNA分別等量混合,建立抗感基因池繼續篩選多態性引物。將最終獲得的多態性引物用于F2群體分析。條帶統計方法:同抗病親本的帶型一致的標記命名為“a”,同感病親本的帶型一致的標記命名為“b”,雜合的帶型則記為“h”,缺失或者模糊不清楚的帶型記作“-”。

1.2.4 霜霉病抗性基因的 QTL 定位

結合甜瓜已發表構建的遺傳圖譜,采用QTL IciMapping軟件進行復合區間作圖法進行QTL分析,在研究中使用的閾值為LOD≥2.5。

2 結果與分析

2.1 甜瓜霜霉病的抗性鑒定及遺傳分析

2015年分別對親本、F1、F2群體和F2∶3家系進行苗期人工接種鑒定,經Excel表格統計、分析,2015年2月,抗源PI390452病情指數為6.67,高抗;卡拉克賽表現為高感,病情指數為90.00;F1病情指數為76.67,介于兩個親本之間,趨于感病。2015年11月鑒定結果與2月結果基本一致,PI390452病情指數為7.50(高抗);卡拉克賽的病情指數87.50(高感);F1的病情指數為 78.67,也介于兩個親本之間,也趨于感病。研究證明,PI390452霜霉病抗性是由隱性基因控制的。對 F2和 F2∶3株系群體病情指數繪制頻數分布,F2和 F2:3群體的病情頻數分布符合正態分布,PI390452霜霉病抗性是數量遺傳性狀,可以用于QTL分析。表1,圖1,圖2

表1 親本、F1的病情指數及F2/F2∶3群體的遺傳參數

圖1 2015年F2∶3群體霜霉病病情指數的頻數分布

圖2 2015年F2群體霜霉病病情指數的頻數分布

2.2 多態性和特異性SSR引物的篩選

根據國際葫蘆科基因組(ICuGI)網站上及相關文獻上公開發表的SSR引物,選取其中1 090對引物,分別以雙親為模版進行PCR擴增,經過6%聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測,除掉無擴增產物及擴增產物不清晰的引物以外,886對引物能夠擴增出明亮的條帶。進一步以抗感基因池為模板進行篩選,在抗、感基因池間存在多態性的SSR引物21對,多態性比率為1.93%,列出引物編號及其堿基序列。表2

表2 抗感基因池間表現多態性的SSR引物

Table 2 SSR Primers showed polymorphisms between two bulks

編號Code正向引物Forwardprimer反向引物ReverseprimerCMAGN52CCACCAACATAACACACAACCTCTCACACTGTTGGGAAGAECM109CCCCCTTTTCTCCTTCTTCTTGCTCTCATGGGAAACAGAGGECM203TGTACCACCAAAATCCTCAGCGAGGAGGAAGAAGGAAATGGACMBR123TCCGAAGTAAACATCAAAGACAGGTCAGTCAAGATAGTTACGGTTGCMN04-19TTCTTCCCACCAAACCTACGAAATGGCAGAGAGCGAGAAACMN53-72TTTTGGTTTGGAGGGAGTTGTGCCGCTGATTATATGTTGGCMBR115AGGGTGGAAAGACCCCTATGTGTGAATGTATCTTTTCTGATACTGCECM78TCCCAATTCTTTCCACCAAACGGAATTGAGATGGGGAATACMCTN71TCAATTTTTGCCAAACAAGCCAAGGACACAGATTTAATACCSWCT01BTTCTGATCAACGACGAAGGAAACAAAAGCCTCCATTGCMGA172CAATCGCAGATACTTCCACGTGCTTGTCCCAACGGTGTCATECM228TCTGATCGGAAAACCCACTTGCCAAGAATTTTCCCAACATCMCTT144CAAAAGGTTTCGATTGGTGGGAAATGGTGGGGGTTGAATAGGCMTCN8CCTCCGCCACATATTACAATTTCATCTTGACACGTAAGAGCMGA165CTTGTTTCGAGACTATGGTGTTCAACTACAGCAAGGTCAGCECM101TCTAGACCTGTCTTCCCTCAGCTGGCTATGGCTATGGCTAAACCMCT134BGCTCCTCCTTAACTCTATACGCATTATTACCCATGTACGAGCMN09-76GACAATTGATCTGGACAGTTTTTCCGTGATCAACAACTATTGAATTTCMN01-01GAAACCTCCCTTCTTCACTTGGCGTTAATCGGTGTGATTCCECM105TTCTTGCAAATTGTCCAGACCAGAGATTGGCCATCATCGACCMTCN34TCCTCTCTTTTCTTTCATCCGTTGCTGATTTTTGCATTCC

2.3 甜瓜霜霉病抗性基因的QTL定位

根據2015年2月F2群體霜霉病抗性鑒定結果,利用QTL IciMapping軟件進行連鎖分析,在 LOD≥2.5 的狀態下進行連鎖群分組,用 Linkage Map命令構建框架圖,并進行圖距的計算。最后進行優化,得到準確的圖譜框架。通過軟件分析最后將21個標記定位在構建的圖譜上。獲得了一張甜瓜SSR分子標記遺傳連鎖圖譜,總長度為424.27 cM,平均圖距為20.20 cM。遺傳連鎖圖譜包含了4個連鎖群(LG),其中最長的連鎖群長為227.5 cM,最短的為37.88 cM,每個連鎖群的標記數為2~12個標記,共定位3個QTL(qR1-1-1、qR1-3-1、qR2-2-1)。結合Aurora Diaz等[22]在2015年發表的遺傳圖譜將研究甜瓜抗霜霉病基因QTL(qR1-1-1、qR1-3-1、qR2-2-1)初步定位于5、10、9染色體上,其中qR1-1-1表型變異率為54.327 2%,LOD值2.55,位于CMBR123~CMAGN52,距離兩側標記的遺傳距離分別為36.00 cM、37.93 cM;qR1-3-1表型變異率為72.158 7%,LOD值為4.87,位于CMCTT144~CMCT134B,距離兩側標記的遺傳距離分別為39.37 cM、41.42 cM;qR2-2-1表型變異率為80.844 1%,LOD值為9.21,位于CMN04-19~CMN53-72,距離兩側標記的遺傳距離分別為28.00和19.93 cM。表3,圖3

表3 2015年2月甜瓜霜霉病抗性基因的QTL

Table 3 QTL analysis of downy mildew resistance gene in melon in 2015

QTL染色體Chromosome位置Position左側標記LeftMarker右側標記RightMarkerLOD表型變異PVE(%)加性效應Add顯性效應DomqR1-1-11,536.000CMBR123CMAGN522.553054.32721.00270.9209qR1-3-13,1091.000CMCTT144CMCT134B4.879372.1587-0.48951.9755qR2-2-12,928.000CMN04-19CMN53-729.214180.84410.60082.8111

圖3 F2群體SSR連鎖群的構建和霜霉病抗性基因的QTL定位

Fig.3 Construction of SSR linkage group and QTL mapping for downy mildew resistance gene in F2populations

3 討 論

3.1 關于甜瓜霜霉病的抗性遺傳規律與人工接種鑒定方法

目前,雖然甜瓜抗霜霉病遺傳規律研究比較早,但是相對較少,且存在分歧。Angelov等[23]以抗病自交系5-4-2-1和感病K15-6為材料,認為5-4-2-1霜霉病的抗性由顯性單基因控制,而且在K15-6中存在一個上位修飾基因,影響5-4-2-1內的抗病基因表達,當5-4-2-1和其他材料雜交時,抗病基因表現為隱形遺傳,而當5-4-2-1和K15-6的雜交時,抗病基因表現為顯性遺傳。Epinat等[24]以抗病資源PI414723、MR-1和PI124112與感病品種Vedrantais為材料,得出PI414723的霜霉病抗性是由顯性單基因控制;MR-1和PI124112的霜霉病抗性是由寡基因控制,且基因表現為不完全顯性。Thomas等[25]研究得出自交系MR-1的霜霉病抗性是由2個基因控制,基因表現為不完全顯性且具有互補性,與Epinat等[24]認為MR-1的霜霉病抗性是由寡基因控制出入。Ivanoft[26]以高抗霜霉病的Cuban Castilian、Green Fleshed Rocky Dew、 Orange Fleshed Rocky Dew和Smith' sPerfect為材料,認為這4個印度甜瓜栽培品種抗病性是由部分顯性基因控制。Cohen等[27]以PI124111為研究對象,認為PI124111的霜霉病抗性是由2個部分顯性基因控制,與Epinat等[24]認為PI124112的霜霉病抗性是由寡基因控制有一定出入。Shashikumar[28]以IIHR121和IIHR122為研究對象,認為霜霉病的抗性是一個多基因控制數量性狀。國內,楊柳燕等[29]認為高抗材料DM3霜霉病的抗性由一對隱性基因控制。賀玉花等[30]認為PI414723霜霉病的抗性由一對顯性基因控制。產生分歧的主要原因有:(1)甜瓜霜霉病病原菌的致病型和生理小種研究尚未完全明確,存在分歧,大部分國內外學者認為甜瓜霜霉病菌存在高度的變異性,不同地區的研究者鑒定時所采用的病原菌必然就會存在差異;(2)不同研究人員所用的供試甜瓜材料不同,也會導致試驗結果的不一致;(3)缺乏統一標準的甜瓜霜霉病抗病鑒定體系,不同的人采用抗病鑒定方法和標準因個人而定,必然導致研究結果缺乏可比性;(4)甜瓜霜霉病的發病受周圍環境影響很大,研究人員地域不同,試驗難以確保在一致的環境條件下進行;(5)甜瓜霜霉病本身抗性遺傳規律比較復雜,相對其他病害研究較少。因此,很有必要對甜瓜霜霉病抗性遺傳機制進行深入研究。研究用相對單一純培養的海南甜瓜霜霉病病原菌(經過多次新鮮單病斑分離),用于溫室人工噴霧接種,在模擬最接近自然情況下,同時保證植物和病原菌均勻接觸,以創造甜瓜最真實的感病狀態,因此能真實反映遺傳群體的抗病規律,實驗數據具有一定的可靠性。

3.2 甜瓜抗霜霉病的分子標記及QTL定位

鑒于甜瓜霜霉病病原菌只能活體培養,人工和田間鑒定易受環境條件影響,研究相對比較費時費力,所以利用分子輔助育種的手段開展抗霜霉病品種的選育研究較少。目前報道的與甜瓜霜霉病抗性基因連鎖的分子標記較少,并且連鎖距離不夠緊密,致使前人研究結果對于MAS育種應用性不強。楊柳燕等[29]以高抗材料DM3為材料,找到了與抗病基因連鎖的SRAP標記me8em11,遺傳距離為9.8 cM;賀玉花等[30]以PI414723為材料,結果有3個SSR標記DE1887、DE1320和DE0854與抗霜霉病基因存在連鎖關系,遺傳距離分別為26、26、13.69 cM。國外一直未見甜瓜抗霜霉病抗性資源分子標記報道,僅僅在2005年Perchepied[10]利用PI124112×Védrantais雜交產生的重組自交系,將白粉病與霜霉病的兩個抗病基因分別定位第II與第V連鎖群。

使用1 090對SSR引物對甜瓜霜霉病進行研究,其中851對基于甜瓜基因組測序信息設計。同時,在試驗材料上,前人對于霜霉病分子標記的研究大多利用F2群體,由于F2是臨時性群體,不能進行重復試驗,而在抗病性鑒定實踐中,鑒定結果受環境影響很大,致使結果的可信度降低。研究以F2為研究的材料,又利用 F2∶3家系驗證,研究結果更準確。研究對與霜霉病相關基因進行定位,共檢測到3個QTL:qR1-1-1、qR1-3-1、qR2-2-1,初步把qR1-1-1定位到chr-5上,qR1-3-1定位到chr-10上,qR2-2-1定位到chr-9上。雖然每個QTL距離兩翼標記比較遠,現階段還難以應用于大規模的MAS育種,但是為抗霜霉病相關基因確定了大概位置,下一步可以結合已經發表的甜瓜全基因組序列,同時開展全基因組重測序,重點關注這個區域,完成對抗霜霉病相關基因的精確定位,確定抗病基因序列,最終克隆甜瓜PI390452霜霉病抗性基因。

4 結 論

通過對F2及F2∶3群體抗病性鑒定結果分析,資源PI390452所含有的甜瓜霜霉病抗性基因符合數量性狀遺傳的特點。研究共檢測到3個霜霉病抗性基因的QTL位點qR1-1-1、qR1-3-1、qR2-2-1,分別位于chr-5、chr-10、chr-9上,qR2-2-1表型變異率最大為80.84%,qR2-2-1是控制甜瓜霜霉病主效QTL位點,為甜瓜抗霜霉病分子標記輔助育種、抗病基因精細定位、克隆提供了技術支持。

References)

[1] 張學軍,季娟,李寐華,等. 新疆地區厚皮甜瓜白粉病菌生理小種的鑒定[J].新疆農業學,2013,50(8):1 450-1 455.

ZHANG X J,JI J,LI M H,et al.(2013).Identification of Physiological Races of Powdery Mildew on Cucumis melo ssp.melo in Xinjiang[J].Xinjiang Agricultural Sciences, 50(8):1,450-1,455. (in Chinese)

[2] 張學軍,季娟,李寐華,等.新疆厚皮甜瓜抗白粉病基因SSR分子標記[J].新疆農業科學,2014,51(1):1-7.

ZHANG X J,JI J,LI M H,et al.(2014).SSR Markers Linked to Powdery Mildew Resistance Gene inCucumismelossp.meloof Xinjiang [J].XinjiangAgriculturalSciences, 51(1):1-7. (in Chinese)

[3] 欒非時. 西瓜甜瓜育種與生物技術[M].北京:科學出版社,2013:304-307.

LUAN Fei-shi. (2013).WatermelonMelonBreedingandBiotechnology[M]. Beijing: Science Press. (in Chinese)

[4] 陶興林,黃永紅,趙長增,等.厚皮甜瓜品種離體培養再生植株能力的基因型差異研究[J].果樹學報,2005,22(3):252-256.

TAO Xing-lin, HUANG Yong-hong, ZHAO Chang-zeng,et al.(2005). Study on the regeneration ability of six melon cultivars [J].JournalofFruitScience, 22(3):252-256.(in Chinese)

[5] 季娟,張學軍,伊鴻平.新疆哈密瓜 SRAP 反應體系建立和優化[J].新疆農業科學 ,2012,49(5):837-821.

JI J,ZHANG X J,YI H P,et al.(2012).Optimization of SRAP-PCR Reaction System in Hami Melon[J].XinjiangAgriculturalSciences, 49(5):837-821. (in Chinese)

[6] BERKELEY M S,CURTIS A. (1868).Peronospora cubensis. Botanical Journal of the Linnean Society,10:363.

[7] HORST R K. Downy Mildews[M]//Westcott`s Plant Disease Handbook. Springer Netherlands,2013:181-186.

[8] Colucci, S. J., Wehner, T. C., & Holmes, G. J. (2006). The downy mildew epidemic of 2004 and 2005 in the eastern united states.

[9] 聶祥祥.甜瓜抗霜霉病無選擇標記基因的轉化和功能驗證[D].烏魯木齊:新疆大學碩士論文,2014.

NIE Xiang-xiang. (2014).TransformationandVerificationforMarker-freeTransgenicforMelonwithResistancetoDownyMildew[D]. Master Dissertation. Xinjiang University, Urumqi.(in Chinese)

[10] 賀玉花,徐永陽,徐志紅,等.甜瓜霜霉病抗性研究進展[J].果樹學報,2014,31(2):324-334.

HE Yu-hua, XU Yong-yang, XU Zhi-hong, et al.(2014).Research progress of resistance to downy mildew in melon [J].JournalofFruitScience, 31(2):324-334.(in Chinese)

[11] 楊柳燕.甜瓜霜霉病(Psedoperonosporacubensis)抗性遺傳研究及SRAP分子標記[D].北京:中國農業科學院碩士論文,2012.

YANG Liu-yang. (2012).TheStudyofGeneticResistanceofMelontoDownyMildew(Psedoperonosporacubensis)andSRAPMarkeroftheResistanceGene[D]. Master Dissertation. Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing. (in Chinese)

[12] 賀玉花.甜瓜霜霉病抗性基因的SSR標記[D].北京:中國農業科學院碩士論文,2014.

HE Yu-hua.(2014).TheSSRMarkerLinkedtoDownyMildewResistantGeneinMelon(cucumismelo) [D]. Master Dissertation. Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing.(in Chinese)

[13] Perchepied, L., Bardin, M., Dogimont, C., & Pitrat, M. (2005). Relationship between loci conferring downy mildew and powdery mildew resistance in melon assessed by quantitative trait loci mapping.Phytopathology, 95(5):556-565.

[14] Daninpoleg, Y., Reis, N., Tzuri, G., & Katzir, N. (2001). Development and characterization of microsatellite markers in cucumis.Theoretical&AppliedGenetics, 102(1):61-72.

[15] Gonzalo MJ; Oliver M; Garcia-Mas J; Monfort A; Dolcet-Sanjuan R; Katzir N; Arús P; Monforte AJ. (2005). Simple-sequence repeat markers used in merging linkage maps of melon (Cucumismelo, l.).Theoretical&AppliedGenetics, 110(5):802-811.

[16] Fernandezsilva, I., Eduardo, I., Blanca, J., Esteras, C., Picó, B., & Nuez, F., et al. (2008). Bin mapping of genomic and est-derived ssrs in melon (Cucumismelol.).Tag.theoretical&AppliedGenetics.theoretischeUndAngewandteGenetik, 118(1):139-150.

[17] Fukino, N., Ohara, T., Monforte, A. J., Sugiyama, M., Sakata, Y., & Kunihisa, M., et al. (2008). Identification of qtls for resistance to powdery mildew and ssr markers diagnostic for powdery mildew resistance genes in melon (Cucumismelol.).Tag.theoretical&AppliedGenetics.theoretischeUndAngewandteGenetik, 118(1):165-175.

[18] 張學軍,郭麗霞,馬新力,等.甜瓜種質資源抗霜霉病和蔓枯病苗期篩選與評價[J].中國瓜菜,2014,27(增刊):38-40.

ZHANG Xue-jun, GUO Li-xia, MA Xin-li, et al.(2014). Evaluation of downy mildew and gummy stem blight resistance for melon germplasm collections at seedling stage [J].ChinaCucurbitsandVegetables, 27(S): 38-40.(in Chinese)

[19] Criswell, A. D., Wehner, T. C., Klosinska, U., Kozik, E., & Pitrat, M. (2008). Use of sporulation and other leaf and vine traits for evaluation of resistance to downy mildew in cucumber. Cucurbitaceae 2008.ProceedingsoftheIXthEUCARPIAmeetingongeneticsandbreedingofcucurbitaceae,Avignon,France, 21-24 May . (pp.433-440).

[20]Epinat C, Pitrat M. (1994a). Inheritance of resistance to downy mildew (Pseudoperonosporacubensis) in muskmelon (Cucumismelo). I. Analysis of a 8×8 diallel table.Agronomie, 8(8):239-248.

[21] Epinat C, Pitrat M. (1994b). Inheritance of resistance to downy mildew (Pseudoperonosporacubensis) in muskmelon (Cucumismelo). II. Generation means analysis of genitors.Agronomie,14(4):249-257.

[22] Aurora Diaz,Javier Forment,Jason M.,et al.(2015).Argyris Anchoring the consensus ICuGI genetic map to the melon (CucumismeloL.) genome.Mol Breeding,35:188.

[23] Angelov, D., Krasteva, L., Katzir, N., & Paris, H. S. (2000). Dominant inheritance of downy mildew resistance in melons.Cucurbitaceae2000.Proceedingsofthe,EucarpiaMeetingonCucurbitBreedingandGenetics,Ma'aleHaHamisha,Israel, 19-23 March.

[24] Epinat, C., & Pitrat, M. (1994). Inheritance of resistance to downy mildew (Pseudoperosporacubensis) in muskmelon (Cucumismelo). i : analysis of a 8 x 8 diallel table.

[25] Thomas, C. E., Cohen, Y., Mccreight, J. D., Jourdain, E. L., & Cohen, S. (1988). Inheritance of resistance to downy mildew in cucumis melo.PlantDisease, 72(1):33-35.

[26] Ivanoft S S. (1944).Resistance of cantaloupes to downy mildew and the melonaphid. The Journal of Heredity:(35):35-39.

[27] Cohen, Y.,Eya, L. H,Kenigsbueh, D. (1988). Genetics,nature and utilization of resistance to downy and powdery mildew in musknlelon[C]// Institut National de la Recherche Agronomique. Cucurbitaceae 88:Proceedings of the EUCARPIA meeting on cucurbit Genetics and breeding Avignon. France:INRA,

[28] Shashikumar, K. T., Pitchaimuthu, M., & Rawal, R. D. (2010). Generation mean analysis of resistance to downy mildew in adult muskmelon plants.Euphytica, 173(1):121-127.

[29] 楊柳燕,徐永陽,徐志紅,等.甜瓜霜霉病抗性遺傳及SRAP分子標記[J].江蘇農業科學,2012,28(5):1 200-1 202.

YANG Liu-yan,XU Yong-yang,XU Zhi-hong,et al. (2012).Inheritance of downy mildew resistance in melon and SRAP marker linked to resistant genes [J].JiangsuAgriculturalSciences, 28(5):1,200-1,202. (in Chinese)

[30] 賀玉花,徐永陽,徐志紅,等.甜瓜霜霉病抗性基因SSR分子標記[J].江蘇農業科學,2014,42(7):54-55.

HE Yu-hua,XU Yong-yang,XU Zhi-hong,et al.(2014).The SSR markers linked to downy mildew resistant gene in melon [J].JiangsuAgriculturalSciences, 42(7):54-55.(in Chinese)

Fund project:High Technology Research and Development Program of Xin jiang(201411109);Youth Foundation of Xinjiang Academy of Agricultural Sciences(xjnkq-2013036);China Agriculture Research System of watermelon and melon(CARS-26-04)

QTL Mapping of Resistance Genes to Downy Mildew inCucumismelossp.meloPI390452

ZHANG Xue-jun1, NING Xue-fei2, YANG Yong1, LI Mei-hua1,WANG Xian-lei2, YI Hong-ping1

(1.TheResearchCenterofHami-melon,XinjiangAcademyofAgriculturalSciences,Urumqi830091,China; 2.CollegeLifeScienceandTechnology,XinjiangUniversity,Urumqi830046,China)

【Objective】 TheCucumismelossp.meloPI390452 with high resistance to downy mildew was used as materials for the study of the genetic law of resistance to pi390452 resistance. And the resistance gene went through QTL mapping to lay the foundation and provide a theoretical basis for the resistance mechanism and molecular assistant selection (MAS) breeding.【Method】An artificial inoculation method was adopted to test the degree of resistance toPseudoperonosporacubensis(Berk.etCurt.) for the F2∶3family lines derived from the cross of PI390452×"kalakesai "(susceptible Farmholding variety). SSR analysis, combined with bulked segregation analysis (BSA), was done on the DNA of F2population using 1,090 pairs of SSR primers. QTL IciMapping software were used to construct SSR linkages and to make sure the corresponding relations between these SSR linkages and ICuGI was constructed corresponding molecular marker linkage map. QTL analysis on downy mildew resistance genes was conducted by QTL IciMapping software.【Result】The inheritance of the resistance gene to downy mildew in PI390452 fit to the inheritance law of quantitative trait. Three QTLs named qR1-1-1,qR1-3-1 and qR2-2-1 for the resistance gene to downy mildew were detected in this study. qR1-1-1,qR1-3-1 and qR2-2-1 were located on Chr.5,Chr.9and Chr.10. The QTL of qR2-2-1 accounted for the highest phenotypic variation of 80.84%.【Conclusion】The QTL of qR2-2-1 located on Chr.9 was the major QTL. The results in this study will be of great benefit to fine mapping and gene cloning for the major QTL of downy mildew resistance gene, also the results will lay a good foundation for melon MAS resistance breeding.

Cucumismelossp.melo;downy mildew;mapping QTL;SSR marker

2016-08-24

自治區高技術研究與發展項目(201411109);新疆農業科學院青年基金項目(xjnkq-2013036);國家西甜瓜產業技術體系項目(CARS-26-04)

張學軍(1980-),男,吉林四平人,副研究員,碩士,研究方向為西瓜甜瓜抗病育種,(E-mail)zxj333@126.com

伊鴻平(1962-),男,研究員,研究方向為西甜瓜遺傳育種,(E-mail)xjyhp2010@sina.com

10.6048/j.issn.1001-4330.2016.12.001

S652;S188

:A

:1001-4330(2016)12-2157-09

猜你喜歡
研究
FMS與YBT相關性的實證研究
2020年國內翻譯研究述評
遼代千人邑研究述論
視錯覺在平面設計中的應用與研究
科技傳播(2019年22期)2020-01-14 03:06:54
關于遼朝“一國兩制”研究的回顧與思考
EMA伺服控制系統研究
基于聲、光、磁、觸摸多功能控制的研究
電子制作(2018年11期)2018-08-04 03:26:04
新版C-NCAP側面碰撞假人損傷研究
關于反傾銷會計研究的思考
焊接膜層脫落的攻關研究
電子制作(2017年23期)2017-02-02 07:17:19
主站蜘蛛池模板: 国产电话自拍伊人| 色妞www精品视频一级下载| 香蕉综合在线视频91| 美女视频黄频a免费高清不卡| 日韩不卡高清视频| 亚洲天堂网在线观看视频| 久久久久久久蜜桃| 亚洲精品第1页| 国产成熟女人性满足视频| 国产乱子精品一区二区在线观看| 欧美成人午夜视频| 这里只有精品在线播放| 国产欧美另类| 中文字幕免费播放| 欧美成人午夜影院| 国产精品精品视频| 国产sm重味一区二区三区| 98超碰在线观看| 国产精品久久久久久久久| 色综合a怡红院怡红院首页| 色网站免费在线观看| 日韩欧美国产成人| 91精品国产丝袜| 亚洲69视频| 色偷偷一区二区三区| 色综合中文| 亚洲欧洲一区二区三区| 免费播放毛片| 精品人妻无码中字系列| 91蝌蚪视频在线观看| 91视频免费观看网站| 久久九九热视频| 亚洲另类国产欧美一区二区| 亚洲成人福利网站| 国产国产人成免费视频77777| jizz在线观看| 国产美女无遮挡免费视频网站 | 欧美另类一区| 国产精品无码影视久久久久久久| vvvv98国产成人综合青青| 精品欧美视频| 国产精品亚洲一区二区三区在线观看| 成人福利一区二区视频在线| 亚洲天堂网2014| 色婷婷电影网| 国产精品熟女亚洲AV麻豆| 国产成+人+综合+亚洲欧美| 日韩国产精品无码一区二区三区| 国产精品不卡永久免费| 成人亚洲国产| 国产丝袜第一页| 亚洲无码精品在线播放| 成人国内精品久久久久影院| 在线网站18禁| 91香蕉视频下载网站| 色综合网址| 综合社区亚洲熟妇p| 亚洲精品久综合蜜| 2019国产在线| 高清精品美女在线播放| 拍国产真实乱人偷精品| 无遮挡一级毛片呦女视频| 久久6免费视频| 国产一级毛片网站| 亚洲一区二区精品无码久久久| 日韩欧美中文字幕在线精品| 亚洲中文精品人人永久免费| 亚洲免费黄色网| 亚洲天堂精品视频| 欧美不卡在线视频| 中文字幕无码制服中字| 综合五月天网| 欧美爱爱网| 欧美a√在线| 午夜视频www| 亚洲自偷自拍另类小说| 欧美不卡视频在线| 久久人妻系列无码一区| 亚洲精品另类| 午夜老司机永久免费看片| 亚洲区一区| 在线精品亚洲国产|