佩蘭的化學成分

楊錦強，楊念云，吳南

（南京中醫藥大學藥學院，江蘇南京210023）

·實驗研究·

佩蘭的化學成分

楊錦強，楊念云，吳南

（南京中醫藥大學藥學院，江蘇南京210023）

目的研究佩蘭Eupatorium fortunei Turez的化學成分。方法采用硅膠柱色譜、Sephadex LH－20凝膠柱色譜，以及重結晶等技術，對佩蘭的化學成分進行分離純化，并通過1H－NMR，13C－NMR，質譜等技術對化合物進行結構鑒定。結果從佩蘭中分離得到8個化合物，分別為1－O－ －D－吡喃葡萄糖基－（2 S，3 S，4 R，8 E）－2－[（2′－R）－2′－羥基棕櫚酰胺]－8－十八烯－1，3，4－三醇（化合物1），1－O－ －D－吡喃葡萄糖－（2 S，3 S，4 R，8 E）－2－[（2′－R）－2′－羥基二十四烷酰胺]－8－十八烯－1，3，4－三醇（化合物2），蒲公英甾醇（化合物3），蒲公英甾醇乙酸酯（化合物4），2－O－ －D－吡喃葡萄糖基反式肉桂酸（化合物5），異鼠李素－3－O－蕓香糖苷（化合物6），尿嘧啶（化合物7），3，5－二羥基苯甲酸（化合物8）。化合物1和化合物2為腦苷脂類化合物。結論所有化合物均為首次從該佩蘭中分離得到。

佩蘭；腦苷脂類；蒲公英甾醇；2－O－ －D－吡喃葡萄糖基反式肉桂酸

佩蘭為菊科澤蘭屬植物佩蘭Eupatorium fortunei Turez的地上部分，又名香草、小澤蘭、大澤蘭、雞骨香，主產于華東、華南和西南等地區，喜溫暖濕潤氣候，高溫高濕環境生長較快。其為多年生草本植物，味微苦，性寒，具有清熱解暑、芳香化濕、健胃開胃、發表去濕、和中化濁、殺蟲抑菌的功效，可治療胸悶腹滿、無汗發熱、口中甜膩、傷暑頭痛、口臭等癥狀[1]。近年來，對于佩蘭化學成分的研究主要集中在其揮發油成分，而對其他成分的研究相對較少。本研究中對佩蘭的化學成分進行系統分離鑒定，為進一步研究其藥理作用和合理利用佩蘭資源提供理論依據。現報道如下。

1 儀器與試藥

儀器：Bruker ARX－300型和DRX－500型核磁共振儀(德國Brucker公司)；Zabspec質譜儀，LCQ－Advantage質譜儀(美國Waters公司)；薄層層析硅膠板，柱層析色譜硅膠（100－200目，200－300目，300－400目)，均購自青島海洋化工廠分廠；Sephadex LH－20凝膠色譜柱（Pharmacia公司）。

試藥：佩蘭（市售品），由南京中醫藥大學吳南教授鑒定為Eupatorium fortunei Turez，標本保存于南京中醫藥大學生藥學實驗室。所有有機試劑均為分析純（南京化學試劑股份有限公司）。

2 方法與結果

2.1 化學成分的提取

稱取干燥的佩蘭地上部分10 kg（經粉碎），用水回流提取3次，每次2 h，過濾收集，合并提取液；再用無水乙醇回流提取3次，每次2 h，過濾收集，合并提取液；合并水提液和醇提液，減壓濃縮至無醇味，得含水浸膏；依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到石油醚層部位、乙酸乙酯層部位、正丁醇層部位；分別減壓回收溶劑，得到浸膏。

2.2 化合物的分離

將石油醚部位浸膏硅膠干法上柱，進行硅膠柱層析色譜分離，經石油醚－乙酸甲酯系統梯度洗脫，得到130個餾分，薄層層析分析，合并餾分。將編號P－21餾分結晶，進一步純化得化合物4（8 mg）；將編號P－37餾分結晶，進一步純化得化合物3（35 mg）。

將乙酸乙酯部位浸膏硅膠干法上柱，進行硅膠柱層析色譜分離，經二氯甲烷－甲醇系統梯度洗脫，得到102個餾分，薄層層析分析，合并餾分。將編號E－63～74的餾分合并上硅膠柱，經二氯甲烷－甲醇系統梯度洗脫（100∶0，10∶1，8∶1），編號A－21餾分結晶，進一步純化得化合物2（8 mg）；將編號E－75～83的餾分合并上Sephadex LH－20凝膠柱，經甲醇洗脫，洗脫餾分中S－7為純化合物，得化合物1（5 mg）；編號E－91餾分結晶，進一步純化得化合物5（10 mg）。

將正丁醇部位浸膏硅膠干法上柱，進行硅膠柱層析色譜分離，經二氯甲烷－甲醇系統梯度洗脫，得到104個餾分，薄層層析分析，合并餾分。將編號B－6餾分結晶，進一步純化得化合物7（10 mg）；編號B－23餾分結晶，進一步純化得化合物8（25 mg）；編號B－36餾分結晶，進一步純化得化合物6（1 mg）。

2.3 結構鑒定

2.3.1 化合物1

白色無定型粉末（甲醇）。ESI－MS(m/z):732.5[M＋H]＋，714.8[M－OH]＋，570.5[M＋H－162]＋，551.4[M－H－179]＋，298.0[M＋H－255－179]＋。1H－NMR（500 MHz，ACETONE－d6）δ：0.88（6H，t，J＝6.5Hz，2 x Me），1.29[s，（CH2）n]，4.33（1H，d，J＝7.5Hz，1″－H），3.55（1H，m，6″－Ha），3.65（1H，m，6″－Hb），3.63（1H，m，1－Ha），3.74（1H，m，1－Hb），4.03（1H，m，2－H），3.37（1H，m，3－H），3.31（1H，m，4－H），3.88（1H，m，2′－H），7.51（1H，d，J＝8.5 Hz，N－H）。以上數據與文獻[2]報道一致，故鑒定化合物1為1－O－β－D－吡喃葡萄糖基－（2 S，3 S，4 R，8 E）－2－[（2′－R）－2′－羥基棕櫚酰胺]－8－十八烯－1，3，4－三醇。

2.3.2 化合物2

白色無定型粉末（甲醇）。ESI－MS(m/z):844.2[M＋H]＋，816.5[M－OH]＋，682.5[M＋H－162]＋，664.4[M－H－179]＋，478.3[M＋H－367]＋，460.4[M＋H－367－H2O]＋，298.0[M＋H－367－179]＋，280.2[M＋H－367－179－H2O]＋。1H－NMR（500 MHz，DMSO－d6）δ：0.85（6H，t，J＝6.5 Hz，2 x Me），1.23[s，（CH2）n]，4.14（1H，d，J＝7.5 Hz，1″－H），3.43（1H，m，6″－Ha），3.65（1H，m，6″－Hb），3.63（1H，m，1－Ha），3.79（1H，m，1－Hb），4.10（1H，m，2－H），3.36（1H，m，3－H），3.34（1H，m，4－H），3.83（1H，m，2′－H），7.50（1H，d，J＝9 Hz，N－H），5.32（1H，9－H），5.39（8－H）。13C－NMR（125 MHz，DMSO－d6）δ：14.39（Me），22.54，24.90，26.08，27.12，17.42，29.14，19.43，29.51，29.64，69.34（C－1），70.49（C－4″），71.04（C－4），71.39（C－2′），73.92（C－2″），74.68（C－3），76.99（C－3″），77.36（C－5″），103.94（C－1″），129.83（C－9），130.31（C－8），174.23（C－1′）。以上數據與文獻[2－3]報道一致，故鑒定化合物2為1－O－β－D－吡喃葡萄糖－（2 S，3 S，4 R，8 E）－2－[（2′－R）－2′－羥基二十四烷酰胺]－8－十八烯－1，3，4－三醇。

2.3.3 化合物3

白色片狀結晶（二氯甲烷－乙醇）。ESI－MS(m/z):426[M]＋。1H－NMR（300 MHz，CDCl3）δ：4.69（1H，brs，H－30a），4.56（1H，brs，H－30b），3.18（1H，dd，J＝11 Hz，5.4 Hz，H－3），1.68（3H，s，H－30），1.01（3H，s，H－26），0.95（3H，s，H－27），0.94（3H，s，H－23），0.83（3H，s，H－25），0.79（3H，s，H－28），0.76（3H，s，H－24）。13C－NMR（75 MHz，CDCl3）δ：38.75（C－1），28.01（C－2），77.01（C－3），38.11（C－4），55.35（C－5），18.35（C－6），35.62（C－7），40.90，（C－8），50.49（C－9），37.01（C－10），21.39（C－11），25.20（C－12），39.10（C－13），42.11（C－14），27.32（C－15），38.30（C－16），34.33（C－17），48.36（C－18），39.40（C－19），153.92（C－20），26.23（C－21），40.03（C－22），27.48（C－23），15.38（C－24），16.12（C－25），16.01（C－26），15.53（C－27），20.97（C－28），109.31（C－29），25.75（C－30）。以上數據與文獻[4－5]報道一致，故鑒定化合物3為蒲公英甾醇。

2.3.4 化合物4

白色粒狀結晶（乙酸乙酯）。ESI－MS(m/z):468[M]＋。1H－NMR（300 MHz，CDCl3）δ：4.64（1H，brs，H－29a），4.59（1H，brs，H－29b），4.48（1H，dd，J＝5.5 Hz，11 Hz，H－3），2.03（3H，s，COCH3），1.02（3H，s，H－30），0.99（3H，s，H－26），0.88（3H，s，H－27），0.85（3H，s，H－23），0.84（3H，s，H－25），0.84（3H，s，H－28），0.81（3H，s，H－24）。13C－NMR（75 MHz，DMSO－d6）δ：38.95（C－1），26.14（C－2），79.89（C－3），37.71（C－4），54.59（C－5），18.16（C－6），33.39（C－7），40.06（C－8），49.56（C－9），37.31（C－10），21.41（C－11），23.31（C－12），39.22（C－13），40.34（C－14），27.61（C－15），38.21（C－16），35.10（C－17），49.56（C－18），39.50（C－19），153.88（C－20），25.61（C－21），38.67（C－22），28.86（C－23），17.65（C－24），16.35（C－25），15.95（C－26），14.44（C－27），19.23（C－28），107.23（C－29），25.09（C－30），170.63（COCH3），21.24（COCH3）。以上數據與文獻[4－6]報道一致，故鑒定化合物4為蒲公英甾醇乙酸酯。

2.3.5 化合物5

白色粉末。ESI－MS(m/z):349[M＋Na]＋。1H－NMR(500 MHz，DMSO－d6)δ:7.22（1H，d，J＝8.0 Hz，H－3），7.40（1H，t，J＝7.7，H－4），7.06（1H，t，J＝7.5 Hz，H－5），7.71（1H，d，J＝7.7 Hz，H－6），7.94（1H，d，J＝16.0 Hz，H－7），6.55（1H，d，J＝16.0 Hz，H－8），5.03（1H，d，J＝7.0 Hz，H－1′）。13C－NMR（125 MHz，DMSO－d6）δ:121.9（C－1），155.6（C－2），115.1（C－3），131.4（C－4），123.3（C－5），128.0（C－6），138.7（C－7），119.6（C－8），167.8（C－9），100.0（C－1′），73.3（C－2′），77.0（C－3′），69.6（C－4′），76.7（C－5′），60.6（C－6′）。以上數據與文獻[7]報道一致，故鑒定化合物5為2－O－β－D－吡喃葡萄糖基反式肉桂酸。

2.3.6 化合物6

淡黃色粉末。ESI－MS(m/z):623[M－H]－。1H－NMR(500 MHz，DMSO－d6)δ：12.58（1H，s，OH－5），7.99（1H，d，J＝2 Hz，H－2′），7.51（1H，dd，J＝2 Hz，8.5 Hz，H－6′），6.90（1H，d，J＝8.5 Hz，H－5′）6.43（1H，d，J＝1.5 Hz，H－8），6.20（1H，d，J＝1.5 Hz，H－6）5.44（1H，d，J＝7.5 Hz，H－1″），4.42（1H，s，H－1?），3.85（1H，s，3′－OCH3），3.06～3.64（10H of 3－O－glc，3－O－rha），1.05（1H，d，J＝3 Hz，H－6?）。以上數據與文獻[8－9]報道一致，故鑒定化合物6為異鼠李素－3－O－蕓香糖苷。

2.3.7 化合物7

白色無定型粉末。ESI－MS(m/z):112[M]＋（100），68（60）。1H－NMR(500 MHz，ACETONE－d6)δ:10.78(1H，s，H－1)，10.96（1H，s，H－3），5.64（1H，d，J＝7.6 Hz，H－5），7.38（1H，d，J＝7.6 Hz，H－6）。以上數據與文獻[10]報道一致，故鑒定化合物7為尿嘧啶。

2.3.8 化合物8

白色結晶性粉末（二氯甲烷－乙醇）。ESI－MS(m/z):155[M]＋。1H－NMR（500 MHz，ACETONE－d6）δ：12.78（1H，s，COOH），9.67（2H，s，3，5－OH），6.99（2H，d，J＝3.0 Hz，H－2，6），6.68（1H，t，J＝3.0 Hz，H－4）。13CNMR（125 MHz，DMSO－d6）δ:169.3（COOH），158.8（C－3，5），133.4（C－1），112.6（C－2，6），108.5（C－4）。以上數據與文獻[11－12]報道一致，故鑒定化合物8為3，5－二羥基苯甲酸。

3 討論

本研究中首次從佩蘭中分離出腦苷脂類（化合物1和化合物2）、蒲公英甾醇、蒲公英甾醇乙酸酯等成分。腦苷脂是酰基鞘氨醇上以糖苷鍵結合1分子六碳糖而成的化合物，腦苷脂類成分已用于治療神經系統疾病，國外腦苷脂類成分已應用于改善老年性腦功能衰退[13]。此外，腦苷脂類成分具有抑制腫瘤和調控細胞生長、抗病毒等藥理活性，應用前景十分廣闊[14－15]。蒲公英甾醇，蒲公英甾醇乙酸酯是蒲公英烷型五環三萜類化合物，有研究發現，此類化合物具有抗菌、抗炎、抗病毒、調節血糖、免疫調節、降血壓和抗腫瘤活性[16]。本研究中系統分離了佩蘭的化學成分，豐富了佩蘭化學成分的種類，為其質量標準的制訂和質量控制，以及為進一步研究藥理活性和合理利用資源提供了理論依據和參考。

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Chemical Constituents of Eupatorium Fortunei Turez

Yang Jinqiang,Yang Nianyun,Wu Qinan
(College of Pharmacy,Nanjing University of Chinese Medicine,Nanjing,Jiangsu,China210023)

ObjectiveTo study the chemical constituents of Eupatorium fortunei Turez.M ethodsThe chemical constituents of Eupatorium fortunei Turez were isolated and purified by silica gel column,Sephadex LH－20 chromatography and recrystallization and the compounds were identified by1H－NMR,13C－NMR and Mass spectrometry.ResultsEight compounds were isolated and elucidated fromEupatoriumfortunei Turez,they were 1－O－β－D－glucopyranosyl－(2 S,3 S,4 R,8 E)－2－[(2′－R)－2′－hydroxypalmitoyl－amino]－8－octadecene－1,3,4－triol(Compound 1),1－O－β－D－glucopyranosyl－(2 S,3 S,4 R,8 E)－2－[(2′－R)－2′－hydroxydocosanosylamino]－8－octadecene－1,3,4－triol(Compound 2),taraxasterol(Compound 3)taraxasterol acetate(Compound 4),trans－melilotoside(Compound 5),isorhamnetin－3－O－rutinoside(Compound 6),uracil(Compound 7),3,5－dihydroxybenzoic acid(Compound 8),respectively.Compound 1 and Compound 2 were cerebroside compounds.Conclusion All compounds were isolated from Eupatorium fortunei Turez for the first time.

Eupatorium fortunei Turez;cerebroside;taraxasterol;trans－melilotoside

R282.71；R284.1

A

1006－4931(2017)21－0004－03

10.3969/j.issn.1006－4931.2017.21.002

2015年國家中醫藥管理局資助項目[201507002]。

楊錦強（1990－），在讀碩士研究生，研究方向為天然藥物生產加工與品質評價，（電子信箱）13770676634＠163.com。

吳南，教授，碩士研究生導師，博士研究生導師，研究方向為中藥天然藥物資源化學，（電子信箱）qnlxw＠yahoo.com.cn。

2017－08－06）