李瑞清
(山東省臨朐縣畜牧局城關畜牧獸醫管理站262600)
豬常見疫病實驗室檢測技術探析
李瑞清
(山東省臨朐縣畜牧局城關畜牧獸醫管理站262600)
養豬業逐漸向規模化方向發展,豬病也開始漸漸變得多元化與復雜化。尤其是隨著現在分子生物學已經得到快速發展,很多種準確快速檢測豬各種疫病的技術已經被開發,但畜牧業等部門實驗檢測技術仍然存在不足。本文筆者對實驗室的檢測技術進行介紹。
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在對豬體進行交叉免疫實驗或是自身相互交換的免疫學試驗中。病毒學的檢測方法需要較長的檢測時間。而雞新城疫病的毒性相對來說很強,病料中不會存在菌的浸出液,因此需要將其接種在豬睪丸細胞中進行再培養。在培養4d之后,再向里面加入新城疫的強病毒,繼續培養4~5d。如果培養的細胞有病變現象表示患有豬瘟疾病。此法也可以用在加入抗體的豬瘟血清中進行試驗。
目前血清學的檢測方法主要有熒光抗體試驗的檢測、間接標記以及免疫吸附試驗的檢測。
有動物的接種試驗和將2日老鼠致死試驗等。
包括補體結合反應試驗、熒光抗體試驗、放射性免疫學試驗、反向間接凝血試驗。在實際的檢測使用中較為廣泛的檢測方法主要包括血清保護性試驗、瓊脂糖擴散試驗、熒光抗體試驗以及反向間接凝血試驗。
在非洲的豬瘟疾病檢測中常用的病原檢測方法主要包括熒光學試驗、紅細胞吸附試驗以及病毒分離培養試驗。
酶聯吸附試驗過氧化物單層細胞試驗以及間接熒光抗體試驗。
選取處于高熱期的兔耳進行靜脈注射,在兔皮膚疹塊邊緣有血液或是其他病料,進行涂片染色而進行鏡檢。可以看見革蘭氏陽性的小桿菌。
熒光抗體試驗:此種檢測方法可以用來作為豬丹毒的快速準確檢疫。瓊脂糖擴散試驗對于慢性豬丹毒具有很好的治療意義,但對于急性豬丹毒沒有治療價值。與此同時,接過種的豬丹毒在接種疫苗之后會有陽性反應。這個需要在檢疫中值得注意。
使用經過滅菌的鼻試子插入到豬鼻子的二分之一處,然后接種在葡萄糖的血清瓊脂培養基上面,培養約48h。選取中等大小的菌落,形狀為圓形,顏色為半透明的灰色,產生腐敗氣味。
對于豬萎縮性鼻炎疾病,凝集試驗診斷具有很好的實用價值。選擇已經明確的標準血清以及抗K血清對未知抗原進行檢測。除此之外,可以選擇已經明確的K抗原和O抗原再對豬的血清進行檢測。
細菌學檢測:對于敗血癥可以從豬心、肝以及體腔中滲透的液體提取病料,而其他病型則是從病變的位置取材。例如通過圖片鏡檢發現兩極染色的圓形桿菌,而接種的培養基可以分離到該種菌,最終進行確診。如果有必要的話,需要對小鼠做實驗的感染。
在實際檢驗中,將鏡檢和臨床診斷兩者結合起來進行綜合性判定。
豬痢疾疾病可以通過對病原體的分離或進行直接鏡檢進行分離與鑒定。吸取急性病的豬糞進行直接鏡檢,或者是進行染色的檢測。可以觀察到革蘭氏顏色,一般有4~6個的螺彎曲,而兩端呈現尖銳的形狀。如在每個視野中可以看見3~5個菌體,就可以將其作為定性的診斷依據。而對于病原體進行分離培養鑒定方法,是目前確定豬痢疾最佳的診斷方法。
目前對于豬痢疾疾病檢測,血清學檢測方法是最普遍的,而其中最常用的兩種檢測方法即為酶聯免疫吸附技術以及凝集試驗。
使用開口器將豬口腔打開,觀察其舌頭底部,一般會有乳白色,如黃豆粒大小的囊泡,囊壁中有會有一個結節。
豬囊蟲病免疫學檢測方法常用的有間接凝血試驗以及酶聯免疫吸附技術。
李瑞清(1970.12-),女,山東省臨朐縣人,大專,獸醫師,主要從事畜牧獸醫工作。