PAX5表達對神經內分泌腫瘤臨床病理特征和預后的影響研究

魯永蘭 楊文秀

(貴州醫科大學病理教研室，貴州 貴陽 550004)

PAX5表達對神經內分泌腫瘤臨床病理特征和預后的影響研究

魯永蘭 楊文秀△

(貴州醫科大學病理教研室，貴州 貴陽 550004)

目的 探討PAX5表達與神經內分泌腫瘤臨床病理特征和預后的關系。方法 收集神經內分泌腫瘤病例的臨床資料和石蠟包埋的檔案腫瘤組織，用免疫組化染色檢測PAX5的表達，隨訪研究病例，分析PAX5表達與神經內分泌腫瘤臨床病理特征和預后的關系。結果 PAX5的總陽性表達率為50%；PAX5表達在不同部位的NEN中有明顯差異，以肺NEN的陽性表達率最高(68.2%)；PAX5表達在神經內分泌癌(NEC)與神經內分泌瘤(NET)病例之間、早期(Ⅰ期和Ⅱ期)與晚期(Ⅲ期和Ⅳ期)病例之間、淋巴結轉移與無轉移病例之間差異有統計學意義(P<0.05)。在晚期臨床分期、NEC病例和伴有淋巴結轉移的NEN中PAX5表達明顯增多。生存分析：NENs的獲訪率98.2%(55/56),多因素Cox-Regression分析發現腫瘤分級(P=0.003)、分期(P=0.049)、部位(P=0.000)、淋巴結轉移(P=0.014)、PAX5(P=0.015)是神經內分泌腫瘤患者預后的獨立影響因素。PAX5陽性與陰性表達的NEN病例的生存狀況差異有統計學意義(P<0.05)，陽性表達病例的生存狀況較差。結論 PAX5陽性表達對NENs的臨床病理特征有一定影響，可能是NEN不良預后的相關因子。

PAX5; 神經內分泌腫瘤； 預后

神經內分泌腫瘤(neuroendocrine neoplasm，NEN)是一類起源于肽能神經元和神經內分泌細胞的異質性腫瘤。NEN最常見的發病部位是消化系統和肺，但是近年來研究[1]表明，其可發生于全身多個器官和組織。PAX5又名B細胞特異性激活蛋白(B cell-specific activator protein, BSAP)，在正常B細胞的增殖、同型轉換、免疫球蛋白基因轉錄[2]、細胞分化過程起到重要調控活化作用，因此既往PAX5主要用于標記大多數B細胞淋巴瘤(如慢性淋巴細胞白血病,套細胞白血病、濾泡淋巴瘤和霍奇金淋巴瘤等)。而近來有研究[3]表明，PAX5可在神經內分泌腫瘤中表達，尤其用于評估上呼吸道和胰腺神經內分泌腫瘤[4]，但在身體其他部位神經內分泌腫瘤中的研究較少，對于神經內分泌腫瘤患者預后的影響更少見報道。我們收集了一組不同部位的NEN 病例，采用免疫組化檢測腫瘤細胞中PAX5的表達，收集其臨床資料并隨訪。分析PAX5表達與神經內分泌腫瘤臨床病理特征及生存狀況的關系，為發現NEN預后的相關因子提供相關依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集安順市人民醫院2009年1月至2013年7月經病理證實為神經內分泌腫瘤的標本56例,并收集相關的臨床和病理資料。NEN 分級[5]：第一級(G1)，核分裂<2/ 10 高倍視野和(或)Ki67 指數≤2%；第二級(G2)，核分裂2～20/10 高倍視野 和(或) Ki67指數3%～20%；第三級(G3)： 核分裂 >20/10高倍視野 和/(或)Ki67指數>20%。G1和G2統稱神經內分泌瘤，G3稱為神經內分泌癌。

1.2 研究方法 采用Sp法，以高壓方法進行抗原修復，切4 μm厚打膠白片，經烘烤、脫蠟、抗原修復、血清封閉后，加入一抗(PAX5稀釋度1∶25，Ki67稀釋度1∶100，均購自北京中杉金橋生物技術有限公司) 4 ℃孵育過夜，pH7.2、0.01M的PBS清洗，加入二抗37 ℃孵育30 min，PBS清洗，DAB染色，自來水沖洗、脫水透明、封片。以pH7.2、0.01M的PBS代替一抗做空白對照，以組織中的淋巴細胞做PAX5內對照。結果判讀：PAX5陽性染色為細胞內具有清晰可見和定位準確的棕黃色顆粒。主要采用電話隨訪或信訪，以病人初次入院確診為隨訪開始時間，2015年7月31日為隨訪結束時間。

1.3 統計方法 本研究中涉及的數據都采用SPSS19.0統計軟件處理，計數資料之間的比較采用卡方檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。部分項目統計采用秩和檢驗方法。生存分析比較采用了多因素Cox-Regression分析，單因素分析采用Log-rank檢驗，用Kaplan-meier方法繪制生存曲線。

2 結 果

2.1 臨床病理資料 56例NEN病例中男性37例，女性19例；年齡20～86歲，中位年齡52歲。發生部位：胃10例、腸8例、肺22例、宮頸3例、卵巢2例、食道2例、鼻咽3例、皮膚4例、膀胱1例、胰腺1例。

2.2 PAX5表達與神經內分泌腫瘤臨床病理特征的關系 56例神經內分泌細胞來源的腫瘤中28例表達PAX5，見圖1、圖2，陽性表達率為50%(28/56)。PAX5表達與NENs部分臨床病理特征的關系見表1。

表1 PAX5與NEN部分臨床病理特征的關系

比較參數nPAX5表達陽性陰性χ2P部位胃腸1899肺2215711．680．02其它16412淋巴結轉移有3223913．270．00無24519分期Ⅰ和Ⅱ期195146．450．01Ⅲ和Ⅳ期372314分級Ⅰ303Ⅱ11386．090．01Ⅲ422517

不同部位的NENs中PAX5陽性表達有明顯差異，肺NEN中PAX5陽性表達率最高，高達68.2%(15/22)；神經內分泌腫瘤細胞中PAX5的表達率在早期(Ⅰ期和Ⅱ期)與晚期(Ⅲ期和Ⅳ期)病例之間、神經內分泌癌與神經內分泌瘤病例之間、淋巴結轉移與未轉移病例之間差異有統計學意義(P<0.05)。PAX5在神經內分泌癌中的陽性表達為59.5%(25/42)高于神經內分泌瘤的21.4%(3/14)；在晚期病例中的表達為62.2%(23/37)高于早期病例的26.3%(5/19)；有淋巴結轉移的病例中PAX5的表達為71.9%(23/32)高于無轉移病例的20.8%(5/24)。

2.3 生存分析 56例NEN中，55例獲隨訪，獲訪率98.2%,隨訪時間24～78個月。患者中位生存時間18.0個月。治療上36例接受了手術治療，12例手術后進一步化療和免疫治療，3例采用非手術治療，1例治療方法不詳。55例獲訪病例采用多因素Cox-Regression分析，分析了PAX5表達、腫瘤分級、分期、淋巴結轉移、發生部位與腫瘤生存狀況的關系，腫瘤分級(P=0.003)、分期(P=0.049)、部位(P=0.000)、淋巴結轉移(P=0.014)、PAX5(P=0.015)是神經內分泌腫瘤患者預后的獨立影響因素。對數和秩檢驗結果，PAX5陽性患者生存期中位數為12.8個月，陰性患者生存期中位數為28.0個月，陽性患者生存期比陰性患者明顯縮短，差異有統計學意義(P=0.000)。根據PAX5表達情況繪制生存曲線見圖3。

圖3 PAX5對NEN患者生存時間的Kaplan-meier生存曲線

3 討 論

作為一種特殊的異質性腫瘤，神經內分泌腫瘤(NEN)發病率較低，但發病范圍較廣，可發生于全身多個器官和組織,且近年來其發病率呈不斷上升趨勢[6]，故越來越受到關注。NEN根據腫瘤細胞是否具有內分泌功能，可以分為功能型和非功能型NEN。兩者臨床表現不盡相同。前者表現為相應激素樣物質所產生的癥狀，后者表現為局部腫塊和相應系統的癥狀。

PAX(the pair box)是一類由9個基因組成的高度保守的、對哺乳動物細胞分化及腫瘤形成具有重要調控作用的一組基因控制家族。在某些特定組織細胞的修復和再生過程中，PAX基因表現出了很關鍵的作用，因此，PAX基因可以在多種腫瘤細胞中表達。PAX5主要對B細胞特異性結合蛋白進行編碼[7]，是一種B細胞發育和分化的重要轉移因子。R.Nguyen等[8]檢測了53例來自不同部位的小細胞癌PAX5蛋白，發現其陽性率為79.2%。本組病例檢測結果為50%，這可能是與本研究中選取部位較多，而各部位病例數偏少有關。對于PAX5表達與NENs臨床病理特征和預后的關系，本研究結果提示：在NEC中的PAX5的表達率明顯高于NET中，存在淋巴結轉移的病例PAX5陽性表達也明顯升高，這與F.Panzuto等[9]的研究結果基本一致。本研究主要關注PAX5與神經內分泌腫瘤發病部位和患者存活期的關系。從研究結果中可以看出，不同部位的NENs中PAX5的陽性表達不同。其中肺NEN中PAX5陽性表達率最高，達68.2%。這可能對判斷轉移性肺NEN有一定參考價值。生存分析發現：PAX5陽性表達病例的生存狀況明顯較陰性表達病例差，這提示NEN中PAX5表達可能是NEN不良預后的預測相關因子。故PAX5陽性表達對NENs的臨床病理特征如分級、分期、淋巴結轉移、發生部位等有一定影響，可能是NEN不良預后的相關因子。

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Impacts of PAX5 expression on the clinicopathological features and prognosis in neuroendocrine tumors

LuYonglan,YangWenxiu.

DepartmentofPathology,GuizhouMedicalUniversity,Guiyang550004,China.

Objective To investigate the correlation between the expression of PAX5 protein and clinicopathological features and prognosis in neuroendocrine tumors. Methods Clinicopathological data and archivistic tumor tissue, which were embedded in paraffin, of neuroendocrine tumors. The expression of PAX5 was detected by immunohistochemistry stain Follow-up and statistical analysis was done. Results It was 50% that positive expression rate for PAX5 in 56 of cases with NENs, and there were statistical significantly differences of PAX5 expression in variant site of the NNEs Lung was the most common site of NENs (68.2%) in all sites. There were statistical significantly differences in PAX5 expression between neuroendocrine carcinoma and neuroendocrine tumors, early-and late-stage, with and without metastasis of lymph node, all P were less than 0.05. PAX5 expression was distinctly increased in the case of neuroendocrine neoplasm with late stage, high grade neuroendocrine neoplasm (neuroendocrine carcinoma), and metastasis of lymph node. Survival analysis: NENs received follow-up rate of 98.2%. Multiple factors Cox-Regression analysis showed that the factors, such as stage (P=0.014), grade (P=0.003), Lymph node metastasis (P=0.014), sites (P=0.000) and PAX5 positive expression (P=0.015), were independent influential factors of NEN's prognosis. Survival has obvious difference between the patients with positive and negative expression of Pax5 (P<0.05), and those with positive expression of PAX5 has a poor survival. Conclusion There was influence of PAX5 positive expression in the clinicopathological features. It may be related to the poor prognosis of NENs.

PAX5； Neuroendocrine neoplasm； Prognosis

R34；R736

A

1000-744X(2016)06-0584-03

2016-03-29)

△通信作者,E-mail:ypq1964@163.com