·專家問答·
裸鼠移植瘤造模注意事項
問:裸鼠移植瘤造模的注意事項
答:1. 實驗要嚴格遵照無菌操作原則,所有手術器械和物品要在使用前嚴格消毒滅菌,且實驗要在超凈工作臺內完成;
2. 皮下移植瘤、手術切除的腫瘤組織、培養的腫瘤細胞等移植物要快速進行處理及移植,盡可能在2h之內完成,為防止污染,可使用少許抗生素;
3. 腫瘤細胞株皮下接種時要取對數生長期細胞,活細胞數大于95%,用無血清的培養基、PBS或生理鹽水調整細胞濃度,制備成所需的細胞懸液,每只小鼠接種體積通常為0.1-0.2 mL;
4. 腫瘤細胞株皮下移植的部位較多,可選擇接種皮膚松弛、血供良好、腫瘤生長后圓整度好、且易于實驗操作和觀察、便于測量腫瘤體積的部位,如腋窩、大腿外側、頸背部等皮下部位;
5. 腫瘤組織接種時要注意,所取的腫瘤組織需新鮮、生長良好,盡可能剔除包膜和壞死的腫瘤組織;
6. 實驗中如需使用麻醉劑,要根據實驗時間長短選擇適當的麻醉劑,同時需要注意麻醉劑的用量,以達到對動物機體干擾最小而疼痛抑制效果最大為最佳;
7. 裸鼠需要原位移植腫瘤時,臟器手術應使用較細的可吸收縫合線以減少對臟器的損傷,術后應連續三天給予抗生素以防感染;
8. 手術后的動物要與清醒的動物分開飼養,以免擠壓、踩踏、咬傷,待小鼠度過術后恢復期后按實驗需要分組飼養;
9. 移植腫瘤后要加強對動物的護理,應注意保持動物實驗室合適的溫度、濕度,以及籠具、墊料、飼料和飲水等物品的潔凈;
10. 裸鼠皮下移植瘤模型利于觀察腫瘤的生長情況,注意腫瘤生長不宜太大(直徑應小于<1.5 cm)。
(感謝中國醫學科學院醫學實驗動物研究所黃昊的解答)