胃腺癌中磷脂酶Cε1和基質金屬蛋白酶-9表達及相關性

史 璇 張 鑫 朱金朋 邸 巍 田 蕾

(錦州醫科大學附屬第一醫院消化內科三病區，遼寧 錦州 121000)

胃腺癌中磷脂酶Cε1和基質金屬蛋白酶-9表達及相關性

史 璇 張 鑫 朱金朋 邸 巍 田 蕾

(錦州醫科大學附屬第一醫院消化內科三病區，遼寧 錦州 121000)

目的檢測胃腺癌中磷脂酶Cε(PLCE)1和基質金屬蛋白酶(MMP)-9的表達特征，分析其意義。方法經病理醫師確診為胃腺癌患者57例為觀察組，正常胃黏膜組織18例為對照組，均留取完整的臨床資料及術后蠟塊組織。采用免疫組化方法檢測兩組中PLCE1和MMP-9的表達。結果觀察組PLCE1和MMP-9陽性率明顯高于對照組，觀察組中PLCE1和MMP-9表達與腫瘤脈管累犯和淋巴結轉移密切相關，PLCE1表達與腫瘤細胞增殖有關。二者均與腫瘤性別、年齡無明顯相關性。相關分析顯示觀察組中PLCE1和MMP-9無明顯相關性。結論胃腺癌中PLCE1和MMP-9高表達對腫瘤形成和進展有一定促進作用，二者可能通過各自途徑起作用。

胃腺癌；磷脂酶Cε1；基質金屬蛋白酶-9；免疫組化

胃腺癌常見于中老年人，是消化系統常見的惡性腫瘤，腫瘤具有高增殖性、高侵襲性的特點，其遷移能力強〔1〕，病變形成過程中轉移相關蛋白出現明顯變化。磷脂酶Cε(PLCE)1是PLC基因編碼的蛋白，也是磷脂酰肌醇信號通路中有明顯作用的關鍵酶〔2，3〕。學者在不同的腫瘤中發現其異常表達，并對腫瘤的形成及進展有一定作用〔4〕。基質金屬蛋白酶(MMP)-9是MMPs的成員之一，具有降解基底膜和細胞外基質的作用，其高表達時可以明顯破壞腫瘤轉移的屏障，促進腫瘤侵襲和遷移〔5〕。本文關注PLCE1和MMP-9在胃腺癌中的表達特征，分析二者相關性。

1 資料與方法

1.1一般資料 2012年1月至2016年10月錦州醫科大學附屬第一醫院確診為胃腺癌的患者57例為觀察組，均行根治手術治療，并經病理醫師明確診斷，同時符合世界衛生組織診斷標準。年齡41～80歲，平均61.4歲；高分化10例，中分化15例，低分化32例。排除標準：①伴有其他器官惡性腫瘤；②有消化系統發育異常；③有家族遺傳病史。距腫瘤邊緣>5 cm的非腫瘤性胃黏膜組織18例為對照組，其中男9例，女9例，年齡43～76歲，平均57.7歲。兩組常規資料無明顯差異。

1.2兩組中PLCE1和MMP-9表達的檢測方法 術后組織立即應用甲醛溶液固定24～36 h，取材(切取2～3 mm厚的組織)、脫水、石蠟包埋，切片后應用免疫組化SP法檢測PLCE1和MMP-9的表達，二氨基聯苯胺(DAB)顯色，按說明書進行操作，做好質控。

1.3PLCE1和MMP-9結果的判讀 PLCE1和MMP-9的陽性表達部位在細胞質中，以呈現淡黃到棕黃色顆粒樣物為陽性反應細胞。在低倍鏡下選擇上皮細胞分布集中且染色明顯的區域進行觀察，然后在高倍鏡下選擇5個視野，計算陽性率，取平均值。陽性率<10%為陰性，≥10%為陽性。

1.4統計學方法 應用SPSS17.0統計軟件行χ2檢驗和線性相關分析。

2 結 果

2.1兩組中PLCE1和MMP-9陽性率的比較 觀察組中PLCE1和MMP-9的表達〔30例(52.6%)，35例(61.4%)〕明顯高于對照組〔1例(5.67)，0例，P<0.01〕。

2.2觀察組不同臨床病理特征中PLCE1和MMP-9陽性率的比較 觀察組中PLCE1和MMP-9表達與腫瘤脈管累犯、淋巴結轉移密切相關，PLCE1的表達與腫瘤細胞的增殖指數有關。二者均與患者的性別、年齡無明顯相關性。見表1。

2.3觀察組中PLCE1和MMP-9的相關性 PLCE1和MMP-9表達無明顯相關性(P>0.05)。

3 討 論

胃腺癌病變形成中涉及較多的遺傳易感因素、基因組學和蛋白組學的表達異常〔6〕，進一步研究其與腫瘤轉移的關系有重要性。PLCE1基因定位于常染色體10q23.32～q24.1的一個單拷貝基因，全長334.3 kb，包含34個外顯子，其編碼的蛋白是一種正向同源蛋白，既可以被上游的Ras家族GTP酶調節，又是H-ras效應的蛋白質分子〔7，8〕，其下游信號不僅可引起鈣的流動和激活蛋白激酶C，還可以作為Ras超家族GTP酶的鳥苷酸交換因子，對細胞的生長和分化起重要調控作用〔9〕。另外PLCE1還可以被各種G蛋白水解，引起細胞內儲存鈣離子的釋放，影響某些基因的表達水平，對細胞的生長、分化和遷移等進程進行有效調節〔10，11〕。MMPs是對細胞外基質進行降解的一組成員，MMP-9是家族中的經典成員，是明膠酶類的蛋白〔12〕，在腫瘤性病變形成和進展時，MMP-9的表達升高，此時MMP-9的催化效率更高、對底物的專一性更強，使腫瘤轉移的屏障降解〔13〕。近來研究認為MMP-9有3個作用特征：①轉錄水平的調節；②酶原活化；③活化后的調節〔14，15〕。這些作用均與腫瘤的生長及遷移密切相關。

本實驗研究結果提示PLCE1和MMP-9二者表達升高可以促進胃腺癌的形成過程，二者均為腫瘤生長的促進基因。PLCE1和MMP-9二者與腫瘤的轉移密切相關，尤其二者高表達可以促進腫瘤細胞對脈管的侵犯，同時促進腫瘤細胞在脈管內播散。PLCE1是促進腫瘤細胞增殖的重要蛋白，此時腫瘤細胞繁殖活躍，腫瘤細胞分化程度降低，腫瘤的體積增大。本文結果提示PLCE1和MMP-9二者無明顯協同作用，二者雖然對轉移均有一定的促進作用，但PLCE1和MMP-9可能是通過各自的調節途徑起作用的。MMP-9對腫瘤轉移的作用更為直接，其高表達時使腫瘤轉移的通道打開，腫瘤細胞易于離開原發灶，種植于其他部位形成轉移灶，此時腫瘤的分期增高，預后差。MMP-9對腫瘤性進展中的作用還表現為對腫瘤間質血管生成的作用，MMP-9可以使間質中的小血管內皮細胞繁殖，細胞的管腔形成能力增強〔16，17〕，為腫瘤通過脈管播散提供了直接的通道。

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R73

A

1005-9202(2017)23-5860-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2017.23.051

遼寧省科學技術廳項目(No.2015020329)

田 蕾(1976-)，女，博士，副主任醫師，主要從事消化系統疾病研究。

史 璇(1983-)，女，碩士，主治醫師，主要從事消化系統疾病研究。

〔2016-11-25修回〕

(編輯 苑云杰)