神經病理性疼痛中背根神經節交感神經芽生的機制研究

張華勝

561000安順市人民醫院

神經病理性疼痛中背根神經節交感神經芽生的機制研究

張華勝

561000安順市人民醫院

目的：研究背根神經節交感神經芽生的機制。方法：選取成年雄性大鼠，隨機分為大鼠脊神經結扎模型組、糖皮質激素大鼠脊神經結扎模型組、Normal+TA和Norml對照組4組。SNL+TA組和Normal+TA組的大鼠在建立大鼠脊神經結扎模型時需要在局部將20 μL TA懸液注射到背根神經節處，對大鼠術后1、3、5、7 d的身體狀況進行觀察、研究。結果：將糖皮質激素注射到脊神經損傷的地方能夠有效地緩解痛覺過敏，同時有效降低背根神經節交感神經籃狀結構的出現，對背根神經節的交感神經芽生的損傷也明顯降低。結論：在早期運用脊神經結扎模型時，背根神經節交感神經芽生的主要來源就是脊神經背支。提前采用灰支手術比使用外科或者化學性切斷術能夠有效減少損傷，減輕機械性疼痛。

神經病理性疼痛；糖皮質激素；背根神經節；交感神經芽生

在20世紀70年代時，Wall和Gutnick經過研究發現出現坐骨神經損害后其神經瘤病的病理機制：部分傳輸到神經元的自發性活動逐漸增多。傳輸的活動不斷對脊髓神經元產生刺激。此外受損部分的背根神經節對腎上腺素能激動劑具有極大的敏感性。研究表明，燒傷或刺痛這種持續的疼痛可能是由受損的外周神經自發的情感沖動引起的；腎上腺素能交感神經在神經痛中可能會以某種方式促使神經元之間建立聯系。自此開始，研究人員開始密切關注神經病理性疼痛的機制。國際疼痛研究協會對于神經病理性疼痛只是簡單地做出了界定，即神經系統損傷或疾病影響軀體神經系統的疼痛[1]。在神經病理性疼痛中主要的特點就是自發性疼痛、痛覺過敏和超敏3種，普遍認為該病的發病機制主要分為外周和中樞兩部分。在外周機制中，神經病理性疼痛具有重要的作用。另外神經病理性疼痛出現的交感神經出芽增生和損傷感傳入耦聯，也是DRG的主要特點之一。本文對神經病理性疼痛中交感神經芽生的機制進行了研究，現報告如下。

材料與方法

動物：本文中使用的實驗對象為清潔級的成年雄性大鼠，體重均在210～260 g。每2只養在1個籠子內，在籠子內底部鋪設一層吸水軟層，確保室溫(22±0.5)℃，濕度保持在65%左右，采用24 h晝夜不間斷照明，大鼠可以自由地進食和飲水。進行研究前，采取上述飼養環境進行1周的飼養。本研究所涉及的動物飼養、使用和試驗皆符合國際標準。

麻醉方式：使用異氟醚吸入和戊巴比妥鈉腹腔注射液方式對大鼠進行麻醉處理[2]。

方法：①實驗動物及分組：根據痛閾值將所有大鼠劃分為大鼠脊神經結扎模型組、糖皮質激素大鼠脊神經結扎模型組、Normal+TA和Normal對照組4組。②手術方法：將大鼠麻醉后，對其背部毛進行剃除，大鼠采用俯臥體的方式被放置在37℃的保溫毯上，對大鼠的四肢進行固定。使用乙醇和聚維酮碘溶液對皮膚進行清潔消毒，在距離背部中線1.5層面的地方實行右側縱向切口，切口應該經過大鼠髂嵴緣端水平位置，并在L5棘突的地方做定位處理。然后進行顯微鏡解剖，將關節突腹外側進行充分的暴露，解剖空間為L6橫突背側的位置，將解剖區的血液用棉簽吸收干凈，將L6上的橫突使用咬骨鉗進行移除，在移除過程中盡量避免對L4脊神經造成損害，將L5處的神經剪斷。然后進行止血和縫合處理。手術結束后，用保溫毯將其包裹直至蘇醒，在手術過程中均未使用抗生素。對接受手術的大鼠，在手術后的第1、3、5、7天時對背根神經節交感神經芽生采用免疫組織化學的方式進行檢測[3]。首先將大鼠麻醉、固定，使用灌注的方式將管道內氣泡和物質進行排出，在心臟位置剪開，使心臟完全暴露，插管從左心室進入主動脈，將插管固定好，使用右心耳為灌注液流出口。使用磷酸鹽緩沖液進行快速的沖洗，直至肝臟和心臟等器官變成白色，然后使用含有多聚甲醛的磷酸鹽溶液進行灌注，直到大鼠全身出現顫抖，再到肌顫消失。然后取出L5神經節，進行明膠包埋過夜處理。然后在室溫為4℃的條件下，將樣品組織片孵化于酪氨酸羥化酶抗體，時間48 h，然后與生物素發生二抗反應，最后進行試劑反應處理。使用光學顯微鏡對載玻片上的神經節樣本進行觀察，并進行拍攝記錄。

一般行為學觀察：對接受手術后的大鼠身體情況進行觀察。

結 果

將糖皮質激素注射到脊神經損傷的地方能夠有效緩解機械性痛覺過敏，同時有效減少背根神經節交感神經籃狀結構的出現，背根神經節的交感神經芽生的損傷也明顯減少。

討 論

背根神經節交感神經芽生發生的機制現在還無明確結論。但是，通過研究發現背根神經節芽生可能存在的機制包括神經元自發異常放電增加、炎性因子增加和營養因子形成等。

正常情況下的DRG神經纖維很少出現自發放電現象。在神經損傷、DRG壓縮或局部出現炎癥的情況下，神經電生理學家對C纖維和β纖維自發放電顯著增加進行了記錄。交感神經芽生會圍繞自發表達有害標記物的神經元。自發放電也代表了神經元中各種離子通道的數量或功能的變化。董成海等人指出，交感神經芽生主要原因是來自于神經損傷后自發異位電活動。

在慢性疼痛的產生因素中，炎性反應也起著關鍵的作用。出現外周神經損害時常會伴有致神經病理性疼痛的炎癥出現。周圍神經損傷后，感覺神經元出現華勒氏變性，各種細胞因子的釋放，減少神經元軸突和髓鞘變性，刺激新的軸突和擴展的產生。另一方面，炎性反應圍繞著促進感覺神經元與神經膠質細胞的激活。由于多種細胞因子參與其中，導致神經元的異常自發放電。肖芳梅等使用DRG炎癥模型研究引起的疼痛[4]，發現許多細胞因子表達量在不同的時間窗有顯著的變化；炎癥組的大鼠出現過敏和疼痛，在手術后3～7 d為最高值，持續時間4個星期。

衛星膠質細胞的神經營養因子的形成也對交感神經芽生的發育具有重要作用。葉海濤研究發現[5]，DRG神經元在神經損傷時衛星膠質細胞免疫染色陽性NT3和相應的mRNA NGF含量增加，本身并不是合成NGF和DRG神經元；抗體治療的應用神經生長因子NGF和NT-3可以顯著減少交感芽生的數量。其他研究表明，BDNF和LIF也有助于DRG交感神經芽生。

神經病變在模型建立后，交感神經出芽并且包繞的神經元增生現象是客觀普遍存在的情況，其與神經性疼痛的關系也得到了證實。臨床應用有效劑量的皮質類固醇，局部麻醉藥通過神經阻滯治療，可能是治療神經性疼痛的一種良好的早期治療方法。

[1]曲玉娟.TRPV4-MAPK通路在大鼠背根神經節持續受壓致神經病理性疼痛中的作用機制研究[D].山東大學,2016.

[2]張春玲,任幼紅.彌可保對糖尿病神經病理性疼痛大鼠背根神經節Nav1.7表達的影響[J].中國實用神經疾病雜志,2016,19(11)：36-38.

[3]黃云,張廣欽.神經病理性疼痛小鼠背根神經節河豚毒素敏感型鈉電流的變化特征[J].安徽醫藥,2016,20(2)：232-235.

[4]肖芳梅,田承浩.淺議神經病理性疼痛的發病機制[J].飲食保健,2017,4(4)：13-15.

[5]葉海濤.交感神經、炎性細胞因子與神經病理性疼痛的關系[J].中國微侵襲神經外科雜志,2017,22(2)：91-93.

Study on the mechanism of sympathetic sprouting in dorsal root ganglion in neuropathic pain

Zhang Huasheng
The People's Hospital of Anshun City 561000

Objective：To study the mechanism of sympathetic sprouting in dorsal root ganglion in neuropathic pain.Methods：Adult male rats were selected.The rats were divided into 4 groups：the spinal nerve ligation model group,the glucocorticoid rats spinal nerve ligation model group,the Normal+TA group and the norml control group.Rats in the group SNL+TA and the Normal+TA group were required to inject 20 mu LTA suspension into the dorsal root ganglion at the time of establishment of the spinal nerve ligation model in rats.The body condition of rats at 1,3,5 and 7 days after operation was observed and studied.Results：Injection of corticosteroids into spinal nerve injuries can effectively relieve mechanical pain and allergy,and effectively reduce the occurrence of sympathetic basket structures in dorsal root ganglia.The sympathetic sprouting of the dorsal root ganglion was also significantly reduced.Conclusion：When the spinal nerve ligation model was used in the early stage,the dorsal root ganglion was the main source of sympathetic sprouting,the dorsal ramus of the spinal nerve,surgical or chemical amputation is more effective in reducing injury and reducing mechanical pain when compared with anterior gray surgery.

Neuropathic pain;Glucocorticoids;Dorsal root ganglia;Sympathetic sprouting

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.24.1