近紅外光譜法用于前列地爾注射液一致性檢驗模型研究

郭 雷，丁 銳，邵天舒，周長明

（北京市藥品檢驗所，北京 100035）

近紅外光譜法用于前列地爾注射液一致性檢驗模型研究

郭 雷，丁 銳，邵天舒，周長明

（北京市藥品檢驗所，北京 100035）

目的運用近紅外漫反射光譜分析技術建立前列地爾注射液的一致性檢驗模型。方法收集4個廠家共54批前列地爾注射液，掃描近紅外光譜圖行一致性檢驗后，分別建立一致性檢驗模型，比較各模型的質量及區分率。結果該模型對待測試樣品能準確分類。結論用近紅外漫反射光譜分析技術對前列地爾注射液建立的一致性檢驗模型，具有方法穩定可行、簡單易操作、準確率高等特點，適用于藥品檢測車對前列地爾注射液一致性的快速篩查。

近紅外光譜法；前列地爾注射液；一致性檢驗模型

近紅外分析技術近年發展迅速，優點較多，如樣品預處理簡單或無需預處理，分析時間短，可獲得各類化學成分的定性或定量數據，并可同時分析多種化學成分，可進行無損非破壞性分析，儀器操作簡單等[1]。在藥品鑒別、質量控制、藥品打假平臺的建立方面應用廣泛[2]。

前列地爾注射液是臨床常用的改善心腦血管微循環的藥品，主要生物活性成分為前列腺素E1，同時以卵磷脂和油酸組成的油相脂微球作為靶向藥物載體[3]。由于前列腺素E1在制劑中的質量濃度很低，僅為5 μg／mL左右，以此建立的近紅外定性模型不理想，所得的近紅外光譜圖是前列地爾主成分與油相脂微球組分的疊加。油相脂微球成分組成約占液體總量的12%，且目前不同生產企業使用的油相溶液原料成分及含量均不同[4]，具備特征性差異。針對這一情況，可使用近紅外技術建立每個生產廠家的一致性檢驗模型[5－6]。大量試驗數據證實，該模型穩定可行，簡單易操作，準確率高，適用于對前列地爾注射液進行一致性的快速篩查[7－8]，對于前列地爾注射液的質量控制和快速鑒別具有重要意義，也為脂微球類注射液的質量控制提供了新方法。

1 儀器與試藥

MPA型近紅外光譜儀（NIR，德國Bruker公司），采樣方式為光纖掃描槍，PbS檢測器，分辨率16 cm－1，測量范圍4 000～12 000 cm－1，掃描信號累加32次[9]；Bruker OPUS 5.5軟件中的鑒別分析軟件（Identification）。54批次前列地爾注射液來自北京泰德制藥股份有限公司、本溪恒康制藥有限公司、哈藥集團生物工程有限公司及西安力邦制藥有限公司。

2 方法與結果

2.1 方法

2.1.1 一致性檢驗

即通過測試NIR光譜偏差是否在限定范圍內，以此實現對特定產品的質量控制[10]。首先，計算參考光譜在各波長處吸光度的平均值和標準差（SD），以此確定該波長點的置信區間（confidence band），待測光譜在該波長處的吸光度與平均值的差值除以 SD，即得一致性指數（Conformity Index，CI）[11]，然后將待測光譜的 CI與之前設定的 CI限度（CI limit）進行比較，如該值不在設定范圍內，則表示未通過一致性檢驗，為不合格藥品[12]，反之，則為合格藥品。54批次前列地爾注射液的近紅外光譜的采集情況見表1。

表1 近紅外光譜的采集情況

2.1.2 模型建立

前列地爾注射液為乳劑脂質體劑型，其輔料主要有大豆油、卵磷脂、甘油、油酸等，各生產企業所采用的輔料卵磷脂的來源、結構均不同，如北京泰德制藥股份有限公司使用蛋黃卵磷脂，哈藥集團生物工程有限公司使用大豆磷脂，在此基礎上建立一致性模型時，可適當加以區分。原始NIR光譜圖見圖1。

4個廠家生產的樣品的近紅外圖譜差異明顯，經反復試驗，建立了一致性模型，見圖2。

2.2 結果

波段主要選擇在吸收合頻譜段，計算方法選擇1階導數＋多元散射法或2階導數；波數選擇10 001.9～4 196.7 cm－1；建模樣品圖譜為每批9種樣品的平均光譜[13]；驗證方式為內部交叉驗證[14]，建立的一致性模型較理想。選取最優處理方法建立的4個廠家的一致性模型結果見表2。

圖1 前列地爾注射液近紅外光譜圖

可見，建立的4個一致性模型中，所有樣品均未超出設定 CI值限度，參比可靠，可作為一致性模型。以上述圖譜作為參比，按上述光譜采集方法分別采集相應的光譜圖進行專屬性驗證，用其他3個廠家中的圖譜進行內部交叉檢驗[15]，結果準確率為100.00%，表明能正確區分出這4個生產廠家生產的前列地爾注射液。

3 討論

注射液由于主要成分含量普遍較低（一般不超過1%），所得近紅外圖譜和純水較類似，不易區分。前列地爾注射液的劑型為水包油相溶液，且油相含量較高，約為12%，因此圖譜與純水圖譜差異較大。而且不同生產廠家使用的油相溶液的配方、工藝均不相同，得出的近紅外圖譜也不一樣，且區別明顯，區分效果較好。

近紅外光的譜區范圍為4 000～12 000 cm－1，該區域主要是O—H、N—H、C—H、S—H等含氫基團振動光譜的倍頻及合頻吸收。因此，藥品經近紅外光譜掃描1次，即可獲得各類化學成分的定性或定量數據，具有同時分析多種化學成分的能力。

表2 4個廠家一致性模型結果

本試驗中雖依靠4個廠家的54批樣品建立了前列地爾注射液用于一致性檢驗的模型，且該模型在內部交叉檢驗運用中效果良好，尚未發現有假陽性現象，但在實際運用中，由于各廠家的輔料和制備工藝不同，可能會出現與模型庫中不一致的圖譜，需在實際運用中不斷地補充和完善前列地爾注射液的模型。前列地爾注射液中油相溶液的含量和分子結構與近紅外圖譜之間的關系仍在進一步研究中。

圖2 前列地爾注射液一致性模型圖

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Research of Conformity Test on Alprostadil Injection by Near Infrared Spectrometry

Guo Lei，Ding Rui，Shao Tianshu，Zhou Changming
（Beijing Institute for Drug Control，Beijing，China 100035）

Objective To apply nearinfrared absorption spectrometry to establish conformity testmodelofAlprostadilInjection.M ethods 54 batches of Alprostadil Injection were collected from 4 factories.The consistency of the NIR spectra were tested.The consistency test model was established and the quality and discrimination rate of each model were compared.Results Maked up conformity test model unmistakably distinguished the clessification of samples of test collection.Conclusion The near－infrared diffuse reflectance spectroscopy（NIRS）is a reliable and reliable method for the determination of Alprostadil Injection.The method has the advantages of stability，feasibility，simple operation and high accuracy，which is suitable for drug detection and rapid screening of Alprostadil Injection.

near－infrared spectroscopy；alprostadil injection；conformity test model

R927.1；R972

A

1006－4931(2016)24－0019－03

郭雷（1983－），男，北京人，碩士研究生，主管藥師，研究方向為藥物分析，（電子信箱）leileimap＠sina.com；周長明，男，大學本科，副主任藥師，研究方向為藥品檢驗、藥物分析、藥品質量控制，本文通訊作者，(電話)010－52779652。

2016－07－13；

2016－08－19)

國家藥典委員會國家藥品標準提高研究課題，項目編號：753。