代長林 孫紅瑜 劉朝陽 代依脈
(1.黑龍江省脈動獾子食品技術開發有限公司,哈爾濱150001;2.黑龍江省野生動物研究所,哈爾濱150081)
狗獾油安全性評價
代長林1孫紅瑜2劉朝陽1代依脈1
(1.黑龍江省脈動獾子食品技術開發有限公司,哈爾濱150001;2.黑龍江省野生動物研究所,哈爾濱150081)
對饒河脈動珍稀動物繁育有限公司提供的狗獾油進行急性毒性和長期毒理試驗驗證,狗獾油原液對小鼠和大鼠的體重、進食量、臟器系數以及血液學指標均無明顯影響,說明狗獾油安全無毒性。
狗獾油;毒理;安全性
狗獾油[1]是食肉目鼬科動物狗獾(Meles meles)的脂肪經熬制而成,也稱獾子油。獾子油含有人體必需的多種脂肪酸和不飽和脂肪酸[2],滲透性好,具有清熱解毒、消腫止痛、潤燥生肌之功效,主治[3]燒燙傷、痔瘡、禿瘡、中氣不足、胃潰瘍等癥,同時也是一種極佳的營養保健品。本研究以小鼠和大鼠為試驗對象,通過急性毒性和長期毒性[4]試驗對獾子油的安全性進行評價,以期為獾子油開發為保健食品提供科學依據。
1.1 試驗材料
昆明系健康小鼠60只,體重18~22 g,雌雄各半;健康Wistar大鼠40只,雌雄各半,5周齡,體重105~110 g,均由中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所實驗動物中心提供。機制鼠塊料購于哈爾濱漢方實驗動物養殖場。
狗獾油由黑龍江省饒河脈動珍稀動物繁育有限公司提供。
1.2 試驗方法
1.2.1 急性毒性試驗
將40只小鼠(雌雄各半)進行常規飼養觀察5天,試驗前小鼠禁食12 h,不禁水,實驗室溫度20~25℃。將小鼠隨機分為4組,每組10只。各組給藥(獾子油原液)劑量分別為:40 mL/kg體重、4 mL/kg體重、0.4 mL/kg體重、0.04 mL/kg體重,采用一次性灌胃給藥的方法進行灌胃,找出0%和100%死亡的劑量范圍,或100%死亡劑量,然后進行正式試驗。如果在最大給藥濃度及最大灌胃體積(40 mL/kg體重)下無法找出小鼠100%死亡的劑量或0%和100%死亡的劑量范圍時,則進行一日內最大耐受量測定。
一日內最大耐受量測定:取健康小鼠20只,采用與臨床一致的給藥途徑,以小鼠能耐受的最大濃度(40 mL/kg體重)連續給藥3次/日,中間間隔時間為5 h,計算一日內總給藥量與人臨床用量的倍數,連續觀察7天。
1.2.2 長期毒性試驗
將40只大鼠進行常規飼養5天后,開始正式試驗。根據急性毒性試驗結果將大鼠隨機分為4組:狗獾油高劑量組(40 mL/kg)、中劑量組(4 mL/kg)、低劑量組(0.4 mL/kg)和空白對照組,每組10只大鼠,雌雄各半,每日進行灌胃給藥;空白對照組每日按10 mL/kg體重的容積給予灌胃生理鹽水1次,連續給藥12周。每周稱量1次體重并記錄攝食量。
試驗期間觀察大鼠的一般狀態,如外觀體征、行為、活動、飲食、分泌物、糞便等。
最后一次給藥后,對試驗大鼠采血,做血常規檢查,分離血清做血液生化檢查。之后處死大鼠,取其心、肝、脾、肺、腎、胸腺等主要臟器,稱其濕重,計算臟器系數。
2.1 急性毒性試驗
急性毒性試驗中,以最大濃度及最大灌胃體積進行灌胃試驗后小鼠全部成活,未能找出100%死亡劑量,故因未能測出LD50,因此進行一日內最大耐受量測定。
24h內以小鼠能耐受的最大濃度連續3次灌胃后觀察,小鼠自發活動稍有減少,對外界反應稍見冷漠,但30 min內便陸續恢復正常,個別小鼠肛門周圍有稀便。7天內動物在自發活動、外觀、對外界反應、膚色、分泌物、眼、呼吸、食欲、肌肉運動等方面均未觀察到異常變化,且無小鼠死亡,僅有個別小鼠肛門周圍有稀便殘留。經計算,在24 h內小鼠累計給藥量為120 mL/kg(40 mL/kg×3),以人(60 kg體重)每日臨床合理服用量為40 mL推算,小鼠的服用量相當于人用量的180倍,即倍數=(120 mL/kg)/(40 mL/60 kg)=180倍
2.2 長期毒性試驗
2.2.1 一般形態
在試驗期間,各劑量組大鼠的全身狀況良好,活動正常,無口鼻出血情況和其他異常行為,生長發育良好。而且被毛平順,眼睛有神,反應正常,呼吸平穩,進食飲水正常,大、小便無異常改變。表明獾子油對各試驗組大鼠的一般形態無明顯影響。
2.2.2 對體重和進食量的影響
各劑量組和空白對照組大鼠體重均隨試驗期間周齡的增加而增加,生長發育情況良好,各劑量組進食量無明顯變化。
2.2.3 對臟器系數的影響
獾子油連續灌胃給藥12周后,各劑量組大鼠的臟器指數與空白對照組無顯著性差異(P>0.05)(表1)。

表1 給藥12周后大鼠臟器指數
2.2.4 對大鼠血液學指標的影響
用全自動血細胞分析儀進行血液學檢測,檢測項目有:白細胞(WBC)、淋巴細胞數(LYM)、單核細胞(MON)、中性粒細胞數目(GRAN)、紅細胞(RBC)、血紅蛋白(HGB)、紅細胞壓積(HCT)、紅細胞平均體積(MCV)、平均血紅蛋白量(MCH)、平均血紅蛋白濃度(MCHC)、血小板數(PLT)、血小板平均體積(MPV),檢測結果(表2)表明,連續灌胃給藥12周,各劑量組大鼠的血液學指標與對照組比較差異無顯著性變化。

表2 獾子油給藥12周對大鼠血液學指標的影響
本試驗利用狗獾油原液進行了急性毒性和長期毒性試驗,其中急性毒性試驗未能測出獾子油的半致死量LD50,當小鼠一日內灌胃量達120 mL/kg時,相當于人用量的180倍,7天內小鼠無死亡,形態未見異常變化。各劑量組給藥12周后,大鼠一般形態、體重和進食量、臟器系數以及血液學指標無明顯變化,證明其安全無毒性。
[1]高耀亭等.中國動物志獸綱[M].北京:科學出版社,1987.
[2]施銀,陳若晞.冬眠期狗獾油脂肪酸組成分析及安全性動物試驗[J].中國油脂,2015,40(5):95-40.
[3]朱琳等.獾子油的化學成分研究[J].中國實驗方劑學雜志,2013,19(22):108-110.
[4]徐叔云等.藥理實驗方法[M].北京:人民衛生出版社,2002.
第1作者簡介:代長林(1974-),男,工程師,狗獾飼養及產品開發。
(責任編輯:王岳)
R 931.3
A
1001-9499(2017)01-0045-02
2016-11-16