VE和L-肌肽對大菱鲆幼魚生長、抗氧化、非特異性免疫及血清生化指標的影響

王曉艷王際英馬晶晶劉 云李寶山孫永智王世信張利民

(1. 上海海洋大學水產與生命學院, 上海 201306; 2. 山東省海洋生態修復重點實驗室, 山東省海洋資源與環境研究院, 煙臺264006)

VE和L-肌肽對大菱鲆幼魚生長、抗氧化、非特異性免疫及血清生化指標的影響

王曉艷1,2王際英2馬晶晶2劉 云1,2李寶山2孫永智2王世信2張利民2

(1. 上海海洋大學水產與生命學院, 上海 201306; 2. 山東省海洋生態修復重點實驗室, 山東省海洋資源與環境研究院, 煙臺264006)

實驗以大菱鲆(Scophthalmus maximus)幼魚[(14.00±0.02) g]為研究對象, 采用2×4雙因素設計, 設2個VE水平(0和75 mg/kg)和4個L-肌肽水平(0、50、100和200 mg/kg), 研究VE和L-肌肽對其生長、抗氧化、非特異性免疫及血清生化指標的影響。實驗共分8組, 每組3個重復, 每個重復46尾魚, 實驗周期為8周。結果顯示: (1)在飼料中添加75 mg/kg VE顯著提高了大菱鲆幼魚增重率(WGR)和特定生長率(SGR)(P＜0.05), L-肌肽添加量≤100 mg/kg對實驗魚生長性能無顯著影響(P＞0.05), 添加量為200 mg/kg時魚體WGR、SGR和蛋白質效率(PER)顯著降低, 飼料系數(FCR)顯著升高(P＜0.05); (2)VE和L-肌肽對血清谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)、過氧化氫酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量及肝臟總抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和MDA含量均具有顯著的交互作用(P＜0.05), 在VE 75 mg/kg水平下, L-肌肽添加量為50和100 mg/kg時血清GSH-PX活性最高, L-肌肽添加量為100和200 mg/kg時血清CAT活性最高且與添加量為50 mg/kg差異不顯著(P＞0.05), 添加100 mg/kg 肝臟T-AOC和SOD活性達到最高且50 mg/kg組的SOD與100 mg/kg組差異不顯著(P＞0.05), 主效應結果顯示, VE顯著提高了血清T-AOC、SOD及肝臟CAT活性(P＜0.05), L-肌肽顯著提高了血清T-AOC(P＜0.05); (3)VE和L-肌肽對血清補體C3和LZM活性交互作用顯著, 在75 mg/kg VE水平下, L-肌肽添加量為50 mg/kg時, 補體C3水平最高(P＜0.05), 主效應顯示, VE和L-肌肽對血清總蛋白(TP)影響均不顯著(P＞0.05); (4)添加VE顯著降低了血清總膽固醇(TCHO)和甘油三酯(TG)含量(P＜0.05), 添加L-肌肽顯著降低了血清TG含量, 且在L-肌肽50 mg/kg時達到最低。綜合考慮大菱鲆幼魚[(14.00—39.43) g]的生長性能、抗氧化性能、非特異性免疫及血清生化指標得出, 在實驗配方條件下(魚油70 g/kg, 大豆卵磷脂10 g/kg), 添加VE 75 mg/ kg時, L-肌肽的適宜添加量為50 mg/kg。

大菱鲆; L-肌肽; VE; 抗氧化性能; 非特異性免疫性能

L-肌肽(L-carnosine)是一種天然二肽, 由β-丙氨酸和L-組氨酸組成, 廣泛存在于哺乳動物骨骼肌、大腦等代謝活躍的組織中, 能捕獲活性氧和自由基,通過一系列催化反應抑制脂質過氧化和蛋白質氧化修飾[1—3], 具有螯合金屬離子、緩沖生理pH和保護細胞膜的功能[4,5]。此外, L-肌肽還可調控糖酵解和氧化磷酸化, 是繼超氧化物岐化酶和VE之后發現的又一天然非酶促自由基清除劑和抗氧化劑。VE是魚類最重要的維生素之一, 與機體各項生理功能密切相關, 同時也是一種重要的免疫增強劑。研究發現, 在陸生動物中, VE能夠保持L-肌肽的生物活性, 幫助機體更好地利用L-肌肽[6], L-肌肽也能促進VE再生[7], 但目前尚未見海水魚類L-肌肽與VE聯合使用效果的研究。

大菱鲆(Scophthalmus maximus)隸屬鰈形目(Pleuronectiformes), 鲆科(Scophthalmidae), 菱鲆屬(Psetta), 具有生長迅速、經濟價值高且易于集約化養殖等優點, 是我國工廠化養殖的重要品種。隨著大菱鲆養殖業的發展, 集約化程度不斷提高, 魚體發病率逐漸上升。通過營養學調控提高大菱鲆免疫力可減少藥物使用, 對保障食品安全、保護養殖水環境具有重要意義。根據預實驗, 以生長指標、超氧化物岐化酶和丙二醛為參考指標, 得出初始體重(13.51±0.06) g的大菱鲆幼魚對VE的最適需求量是64.82—85.33 mg/kg。因此本實驗以大菱鲆幼魚為研究對象, 在添加和不添加VE條件下, 探討L-肌肽對大菱鲆幼魚生長性能、抗氧化性能、非特異性免疫性能及血清生化指標的影響, 明確二者是否具有協同效應, 并選出最優組合, 為VE和L-肌肽在大菱鲆配合飼料中的應用提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 實驗設計與飼料制作

以白魚粉為主要蛋白源, 魚油為主要脂肪源配制基礎飼料, 在基礎飼料中分別添加L-肌肽(0、50、100和200 mg/kg; 純度99%, 河南天興食品添加劑有限公司)和VE (0和75 mg/kg; DL-α-生育酚醋酸酯, 河南金潤食品添加劑有限公司), 配成8種等氮等能的實驗飼料。L-肌肽、VE與維生素預混料(單獨配制, 不含VE)及礦物質預混料初步混勻, 再與其他飼料原料逐級混勻, 加入新鮮魚油和蒸餾水, 經螺旋擠壓機加工成直徑為3 mm左右的飼料顆粒, 60℃烘干并保存于干燥處備用。飼料配方及營養組成見表 1。

表 1 飼料配方及營養組成(干物質基礎)Tab. 1 Composition and nutrient levels of the experimental diets (DM basis)

1.2 飼養管理

養殖實驗在山東省海洋資源與環境研究院循環水養殖系統(高80 cm、直徑70 cm、水深50 cm)內進行, 實驗魚購自蓬萊市宗哲養殖有限公司, 選用同一批次的大菱鲆幼魚。馴養期間投喂對照組飼料(即VE0C0組飼料), 馴養周期為2周。正式實驗開始前挑選出1104尾初始體重(14.00±0.02) g大小均勻、體質健壯的大菱鲆幼魚, 隨機分為8組, 每組3個重復, 每個重復46尾魚。養殖實驗進行56d, 每天定時定量(體重的2%左右)投喂兩次(7:30和16:30)。投喂30min后排殘餌, 數顆粒并計算殘餌量。實驗期間控制水溫16—18℃, 溶氧＞6 mg/L, pH 7.6—8.2, 氨氮＜0.05 mg/L, 亞硝酸氮＜0.05 mg/L, 光照周期為自然光周期。

1.3 樣品采集

養殖實驗結束后, 禁食24h, 每桶魚計數并稱總重, 計算存活率和增重率。每桶取17尾魚, 測量體長、體重, 計算肥滿度, 隨機取5尾用于全魚體成分分析, 剩余12尾尾靜脈取血后解剖取內臟, 所有操作均在冰盤內完成。血液于4℃靜置4h后離心(4000 r/min, 10min)取上清液。所有樣品經勻漿、混勻后保存于-80℃待測。

1.4 測定指標與方法

生長性能 增重率(Weight gain rate, WGR, %)= [末體重(g)-初體重(g)]/初體重(g)×100;

特定生長率(Specific growth rate, SGR, %/d)= [ln末體重(g)-ln初體重(g)]/時間(d)×100;

飼料系數(Feed conversion ratio, FCR)=攝食飼料總量(g)/[末體重(g)-初體重(g)];

蛋白質效率(Protein efficiency ratio, PER)=[末體重(g)-初體重(g)]/[攝食飼料總量(g)×蛋白含量(%)];

肝體比(Hepatosomatic index, HSI, %)=肝臟質量(g)/末體重(g)×100;

臟體比(Viscerosomatic index, VSI, %)=內臟質量(g)/末體重(g)×100;

肥滿度(Condition factor, CF, g/cm3)=體重(g)/體長(cm)3×100;

存活率(Ssurvival rate, SR, %)=成活尾數/總尾數×100。

血清和肝臟指標分析 血清和肝臟中總抗氧化能力(Total antioxidant capacity, T-AOC)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(Malondialdehyde, MDA)、過氧化氫酶(Catalase, CAT)、溶菌酶(Lysozyme, LZM)活性均采用南京建成生物工程研究所試劑盒測定; 谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathione peroxidase, GSH-PX)和補體C3 (Complement C3)采用上海酶聯生物技術有限公司試劑盒測定。血清總蛋白(Total protein, TP)、谷丙轉氨酶(Alanine transaminase, ALT)、谷草轉氨酶(Aspartate Aminotransferase, AST)活性及總膽固醇(Total cholesterol, T-CHO)、甘油三酯(Triacyglycerol, TG)含量均采用日立全自動生化分析儀(7020型, Hitachi)測定, 試劑購自北京利德曼生化股份有限公司。

1.5 數據統計分析

采用SPSS17.0軟件進行單因素方差分析(Oneway ANOVA), 差異顯著時(P＜0.05)采用Duncan's檢驗進行多重比較分析[8]; 采用雙因素方差分析(Two-way ANOVA), 交互作用顯著時, 進行簡單效應分析, 交互作用不顯著時, 分析VE和L-肌肽的主效應, 結果均采用平均值±標準誤(Means±SE)的形式表示。

2 結果

2.1 VE和L-肌肽對大菱鲆幼魚生長性能、飼料利用及形體指標的影響

交互作用結果顯示(表 2), VE和L-肌肽對實驗魚生長性能、飼料利用和形體指標均無交互作用(P＞0.05)。主效應分析顯示, 在飼料中添加VE顯著提高了大菱鲆幼魚WGR和SGR (P＜0.05), L-肌肽的添加量為200 mg/kg時, WGR、SGR和PER均顯著低于其他添加量, FCR顯著高于其他各組(P＜0.05); VE和L-肌肽對SR、HSI、VSI和CF均無顯著影響(P＞0.05)。

2.2 VE和L-肌肽對大菱鲆幼魚血清和肝臟抗氧化能力的影響

交互作用結果顯示(表 3), VE和L-肌肽對血清GSH-PX、CAT活性和MDA含量具有顯著的交互作用(P＜0.05), 在VE 75 mg/kg水平下, L-肌肽添加量為50和100 mg/kg時, GSH-PX活性最高, L-肌肽添加量為100和200 mg/kg時CAT活性最高, 添加量為50 mg/kg與其差異不顯著(P＞0.05), 肌肽添加量為50、100和200 mg/kg時MDA含量最低。由表3的主效應分析可知, 飼料中添加VE和L-肌肽均顯著提高了大菱鲆幼魚血清T-AOC (P＜0.05), VE顯著提高了血清SOD活性(P＜0.05), 而L-肌肽對其影響不顯著(P＞0.05)。

交互作用結果顯示(表 4), VE和L-肌肽對肝臟T-AOC、SOD活性和MDA含量交互作用顯著(P＜0.05),在75 mg/kg VE水平下, 添加100 mg/kg L-肌肽可使T-AOC活性顯著高于其他各組(P＜0.05), SOD活性達到最高但與50 mg/kg組差異不顯著(P＞0.05), L-肌肽50、100和200 mg/kg組的MDA含量顯著低于其他各組(P＜0.05)。由主效應結果可知, 添加VE顯著提高了CAT活性(P＜0.05), 而L-肌肽對其影響不顯著(P＞0.05), VE和L-肌肽對GSH-PX活性影響均不顯著(P＞0.05)。

表 2 飼料中添加VE和L-肌肽對大菱鲆幼魚生長性能、飼料利用及形體指標的影響Tab. 2 Effects of dietary vitamin E and L-carnosine on growth performance,feed utilization and morphological parameters of juvenile turbot

2.3 VE和L-肌肽對大菱鲆幼魚非特異性免疫性能的影響

結果顯示(表 5), VE和L-肌肽對血清補體C3和LZM活性具有顯著交互作用(P＜0.05), 在75 mg/kg VE水平下, L-肌肽添加量為50 mg/kg時, 血清補體C3水平最高。主效應結果表明, 飼料中添加VE和L-肌肽對血清TP含量影響均不顯著(P＞0.05)。

2.4 VE和L-肌肽對大菱鲆血清生化指標的影響

結果顯示(表 6), VE和L-肌肽對血清ALT和AST活性和T-CHO和TG含量均無顯著交互作用(P＞0.05)。由主效應分析可知, VE和L-肌肽對血清ALT和AST活性影響均不顯著(P＞0.05), 添加VE能顯著降低血清T-CHO和TG含量(P＜0.05), 添加L-肌肽顯著降低了血清TG含量(P＜0.05)。

3 討論

3.1 VE和L-肌肽對大菱鲆幼魚生長性能的影響

L-肌肽是一種天然二肽, 由β-丙氨酸和L-組氨酸組成, 具有較高的生物活性, 可作為緩沖劑、抗氧化劑, 能影響血液葡萄糖的代謝, 間接調節神經元的興奮性, 被認為是一種能促進生長的營養物質[9]。研究表明, 在飼料中添加適量小肽可促進魚類生長,增加消化道內有益菌群, 提高抗病力[10], 但長期過量添加, 會加重魚體消化吸收負擔, 導致其生長受阻[11], 而在本研究中, L-肌肽對大菱鲆幼魚無明顯促生長作用, 在添加量為200 mg/kg時卻能顯著抑制魚體增重。高濃度L-肌肽對生長的抑制作用, 可能是因為其添加后能激發機體功能亢進, 進而抑制增重, Tomonaga等[12]發現中樞神經供給L-肌肽可抑制雛雞的飼料攝入, 且該種抑制作用具有濃度依賴性, 抑制程度明顯高于單獨添加組氨酸。在本研究

中, 添加75 mg/kg VE后, 各L-肌肽添加組增重率差異不顯著, 主要歸因于VE對大菱鲆生長性能的顯著提高作用, 這與花鱸(Lateolabrax japonicus)[13]、青魚(Mylopharyngodon piceus)[14]、鯉(Cyprinus carpio)[15]的研究結果相一致。

表 3 VE和L-肌肽對大菱鲆幼魚血清抗氧化能力的影響Tab. 3 Effects of dietary vitamin E and L-carnosine on serum antioxidant capacity of juvenile turbot

表 4 VE和L-肌肽對大菱鲆幼魚肝臟抗氧化能力的影響Tab. 4 Effects of dietary vitamin E and L-carnosine on liver antioxidant capacity of juvenile turbot

表 5 VE和L-肌肽對大菱鲆幼魚非特異性免疫性能的影響Tab. 5 Effects of dietary vitamin E and L-carnosine on non-specific immunity of juvenile turbot

表 6 VE和L-肌肽對大菱鲆幼魚血清生化指標的影響Tab. 6 Effects of dietary vitamin E and L-carnosine on serum biochemical indices of juvenile turbot

3.2 VE和L-肌肽對大菱鲆幼魚血清和肝臟抗氧化性能的影響

VE和L-肌肽均具有較強的抗氧化能力。L-肌肽的組氨酸含有咪唑環結構, 能快速提供和接受質子[3], VE含有酚氧基結構, 能夠猝滅并能同單線態氧反應保護不飽和脂肪酸免受單線態氧損傷[16]。T-AOC、SOD、GSH-PX、CAT、MDA等可用作衡量機體抗氧化能力的重要指標[17]。本研究中VE和L-肌肽對血清GSH-PX、CAT的活性及肝臟的TAOC、SOD活性均有顯著的交互作用, Boldyrev和Sererin[7]研究表明, 在肌漿網膜上單獨添加L-肌肽對脂質過氧化的抑制效果只有10%—15%, 單獨添加α-生育酚(2.5×10-8mol/L)沒有抗氧化性, 而二者同時使用抑制率能達到50%, 當α-生育酚的濃度增加一倍后, 抑制率達到100%, 表明VE和L-肌肽具有協同抗氧化作用[18,19]。MDA是體內所有氧化反應的最終產物, 能反映機體氧化損傷的程度, 肌肽能與由MDA引起產生的羰基反應, 起到保護細胞的作用[20]。本實驗中, 添加VE和L-肌肽均顯著降低了血清和肝臟中MDA含量, 表明VE和L-肌肽均能有效抑制氧化產物的生成, 與魏玉婷[21]和牛化欣[22]等對大菱鲆的研究結果基本一致。本研究主效應結果表明, 添加VE顯著增強了血清T-AOC、SOD及肝臟CAT活性, 添加L-肌肽顯著提高了血清T-AOC, 表明VE和L-肌肽均能有效清除自由基, 從而提高大菱鲆的抗氧化能力。

3.3 VE和L-肌肽對大菱鲆幼魚非特異性免疫性能的影響

補體是一種非常重要的非特異性體液免疫因子, 研究表明, 飼料中添加VE能提高大菱鲆補體C3的基因表達水平[23]。LZM是重要的免疫防御指標, 魚類LZM水平是監測環境有害物質對魚類先天性免疫影響的有效參數[24]。LZM主要來源于吞噬細胞, 能攻擊革蘭氏陰性菌細胞壁的β-1,4糖苷鍵結構, 水解致病菌的黏多糖, 對細菌、真菌、寄生蟲均具有破壞作用[25], 研究報道, 飼料中添加VE顯著增加了云紋石斑魚(Epinehelus moara)幼魚血清LZM活性[26], 顯著提高了花鱸血清LZM和總補體活性[13]。在本研究中, VE和L-肌肽對血清補體C3和LZM活性具有顯著的交互作用, 提高了大菱鲆幼魚的機體免疫力。目前VE和L-肌肽影響非特異性免疫的機理尚不明確, 可能是因為二者能夠阻止自由基對淋巴細胞的破壞, 保證淋巴細胞結構和功能的完整性, 從而保證其免疫活性; 另一方面可能是通過阻止花生四烯酸的氧化反應, 影響氧化磷酸化關鍵酶活性和改變淋巴細胞膜受體功能來抑制前列腺素的合成, 從而增強體液免疫; 還可能是因為VE和L-肌肽能增強細胞免疫, 增加嗜中性白細胞的數量[27]。血清總蛋白是血清各種蛋白質的復合物, 具有維持血管內正常膠體滲透壓和酸堿度的功能, 并與機體的免疫功能有密切的關系, 血清總蛋白水平主要反應肝臟合成功能和腎臟病變造成蛋白質丟失的情況, 通過血清總蛋白檢測可間接了解機體的營養狀況。在本研究中, VE和L-肌肽對大菱鲆血清總蛋白影響均不顯著, 說明VE和L-肌肽均能有效保證肝臟和腎臟的生理功能。

3.4 VE和L-肌肽對大菱鲆幼魚血清生化指標的影響

ALT和AST主要存在于肝臟中, 當肝細胞受損時才被釋放入血液, 因此血液中ALT和AST活性的高低可間接反應機體的肝功能狀況。研究表明, L-肌肽能夠通過抗氧化和抑制致炎細胞因子的產生,保護肝臟不受損傷[28]。在本實驗中, 各組血清ALT和AST活性差異不顯著, 表明VE或L-肌肽的添加對大菱鲆肝臟功能無損傷作用。T-CHO和TG是反應機體脂肪沉積狀況的重要指標, 研究表明, VE能調節脂肪代謝, 預防脂肪在肝臟中的累積[29], 從而減少血清脂肪含量。在小鼠飲用水中添加L-肌肽能顯著抑制脂肪酸合成酶活性, 最終降低血漿中T-CHO和TG含量[30]。本實驗中, 添加VE能降低血清T-CHO和TG含量, 添加L-肌肽能顯著降低TG含量, 對TCHO也具有降低作用但效果不顯著, 這表明二者均具有加速脂肪代謝、降低血清脂肪含量的功能。

綜合考慮大菱鲆幼魚[(14.00—39.43) g]的生長性能、抗氧化性能、非特異性免疫及血清生化指標得出, 在本實驗配方條件下(魚油70 g/kg, 大豆卵磷脂10 g/kg), 添加VE 75 mg/kg時, L-肌肽的適宜添加量為50 mg/kg。

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EFFECTS OF DIETARY VITAMIN E AND L-CARNOSINE ON GROWTH PERFORMANCE, ANTIOXIDANT STATUS, NON-SPECIFIC IMMUNITY AND SERUM BIOCHEMICAL INDICES IN JUVENILE TURBOT (SCOPHTHALMUS MAXIMUS)

WANG Xiao-Yan1,2, WANG Ji-Ying2, MA Jing-Jing2, LIU Yun1,2, LI Bao-Shan2, SUN Yong-Zhi2, WANG Shi-Xin2and ZHANG Li-Min2
(1. College of Fisheries and Life, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China; 2. Shandong Key Laboratory of Marine Ecological Restoration, Shandong Marine Resource and Environment Research Institute, Yantai 264006, China)

A 2×4 factorial experiment (2 vitamin E×4 L-carnosine) was conducted to investigate the effects of dietary vitamin E (0 and 75 mg/kg) and L-carnosine (0, 50 mg/kg, 100 mg/kg and 200 mg/kg) on growth performance, antioxidant status, non-specific immunity and serum biochemical indices in juvenile turbot. Eight diets were formulated and randomly allocated into triplicate groups of fish [initial body weight of (14.00±0.02) g] in 24 cylindrical tanks (H: 80 cm× Φ70 cm, water depth 50 cm) with 46 fish per tank for an 8-weeks trial. Results showed that fish weight gain rate (WGR) and specific growth rate (SGR) were significantly enhanced by dietary vitamin E (P＜0.05) but not by L-carnosine less than 100 mg/kg. However, WGR, SGR and protein efficiency ratio (PER) were depressed whereas feed conversion ratio (FCR) was elevated significantly by 200 mg/kg L-carnosine (P＜0.05). Statistical interactions between vitamin E and L-carnosine were observed in serum glutathione peroxidase (GSH-PX), catalase (CAT) activities, malondialdehyde (MDA) content, liver total antioxidant capacity (T-AOC), superoxide dismutase (SOD), and MDA (P＜0.05). The highest GSH-PX activity was in the group of 50 mg/kg and 100 mg/kg L-carnosine, and the highest CAT activity was in the group of 100 mg/kg and 200 mg/kg L-carnosine and it showed no significant difference in group of 50 mg/kg (P＞0.05). Liver T-AOC and SOD activities reached the top by 100 mg/kg L-carnosine and it showed no significant difference by 50 mg/kg L-carnosine (P＞0.05) or the 75 mg/kg vitamin E. Main effects analysis show that serum T-AOC, SOD and liver CAT activities were significantly elevated by dietary vitamin E (P＜0.05), serum T-AOC was significantly elevated by dietary L-carnosine (P＜0.05). Statistical interactions between vitamin E and L-carnosine were observed in serum complement C3 and LZM activities (P＜0.05). Complement C3 reached the highest value in the group of 50 mg/kg L-carnosine and 75 mg/kg vitamin E (P＜0.05). Serum total protein (TP) was not significantly affected by dietary vitamin E and L-carnosine (P＞0.05). Serum total cholesterol (TCHO) and triacyglycerol (TG) contents were decreased by vitamin E addition (P＜0.05). Comparatively, TG was reduced by dietary L-carnosine with the lowest level by 50 mg/kg L-carnosine (P＜0.05). These results suggest that 75 mg/kg vitamin E and 50 mg/kg L-carnosine is the best diet formulation (fish oil 70 g/kg, Soy lecithin 10 g/kg).

Scophthalmus maximus; L-carnosine; Vitamin E; Antioxidant status; Non-specific immunity

S965.3

A

1000-3207(2017)01-0086-09

10.7541/2017.11

2015-12-20;

2016-07-22

國家海洋公益性行業科研專項(201205025); 國家海洋生物產業水生動物營養與飼料研發創新示范平臺(201503002); 山東省科技發展計劃(2014GHY115006)資助 [Supproted by Public Science and Technology Research Funds Projects of Ocean (201205025); the Marine Biological Industry of China: Aquatic Animal Nutrition and Feed Research and Innovation Demonstration Platform (201503002); the Science and Technology Development Plan Project of Shandong Province (2014GHY115006)]

王曉艷(1989—), 女, 山東青島人; 碩士研究生; 主要從事水生動物營養與飼料研究。E-mail: 951647642@qq.com

王際英(1965—), 研究員, 碩士生導師；E-mail: ytwjy@126.com