微柱凝膠間接抗人球蛋白法在輸血前不規(guī)則抗體篩查中的應(yīng)用價值

高靈云

(周口市兒童醫(yī)院 輸血科 河南 周口 466000)

微柱凝膠間接抗人球蛋白法在輸血前不規(guī)則抗體篩查中的應(yīng)用價值

高靈云

(周口市兒童醫(yī)院 輸血科 河南 周口 466000)

目的探究在輸血前臨床使用微柱凝膠間接抗人球蛋白法進行不規(guī)則抗體篩查的意義。方法選取2014年7月至2016年7月在周口市兒童醫(yī)院申請輸血治療的2 900例患者為研究對象，根據(jù)臨床檢查方式的不同分為常規(guī)組和觀察組，每組2 900例。常規(guī)組接受試管間接球蛋白法，觀察組接受微柱凝膠間接球蛋白法，比較兩組檢查結(jié)果。結(jié)果常規(guī)組抗體陽性率(0.55%)與觀察組(0.66%)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；常規(guī)組漏檢(15.8%)高于觀察組(0.0%)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論輸血前為避免不規(guī)則抗體造成不良反應(yīng)，可選擇微柱凝膠間接抗球蛋白法進行抗體篩選，其準(zhǔn)確度高，漏檢率低。

輸血；不規(guī)則抗體；微柱凝膠間接抗人球蛋白法

輸血治療在臨床急診搶救、手術(shù)以及血液疾病治療中起重要作用，是臨床挽救生命的重要措施之一，但在接受輸血前，為確保輸血安全、避免血液中不規(guī)則抗體引發(fā)輸血反應(yīng)，均需要對患者進行不規(guī)則抗體篩查。不規(guī)則抗體指機體中除了抗A、抗B以外的血清抗體，研究發(fā)現(xiàn)其能導(dǎo)致患者輸血后出現(xiàn)寒戰(zhàn)、發(fā)熱等不良反應(yīng)，嚴(yán)重者可出現(xiàn)溶血，對患者生命質(zhì)量造成嚴(yán)重威脅[1]。隨著ABO血型系統(tǒng)的發(fā)現(xiàn)，臨床為確保輸血安全均常規(guī)進行抗體篩查，但早期交叉配血方法不僅耗時長、靈敏度低，而且操作繁瑣、結(jié)果準(zhǔn)確度較差，易受外界因素影響[2]。為確保輸血治療的安全，本研究探討在輸血前臨床使用微柱凝膠間接抗人球蛋白法進行不規(guī)則抗體篩查的意義。

1 資料與方法

1.1一般資料選取2014年7月至2016年7月在周口市兒童醫(yī)院申請輸血治療的2 900例患者為研究對象，根據(jù)臨床檢查方式的不同分為常規(guī)組和觀察組，每組2 900例。其中男1 386例，女1 514例；年齡8 d～72歲，平均(42.6±5.7)歲；輸血原因包括外科手術(shù)、血液病、自身免疫性疾病以及孕婦、新生兒溶血病。

1.2儀器與方法儀器：離心機、微柱凝膠檢測卡、抗人球蛋白診斷試劑卡、抗體篩選細(xì)胞、微孔板孵育器。方法：患者在進行輸血治療3 d前，抽取其肘靜脈血5 ml，放入抗凝試管中使用離心機進行離心，參數(shù)為3 000 r/min，離心時間為3 min。使用玻璃棒輕輕攪拌血漿，攪碎其中纖維蛋白凝塊。以3 000 r/min的速度離心3 min，留取樣本血漿。標(biāo)記微柱凝膠檢測卡后，觀察組在3個膠管中加入25 μl 0.8%的1、2、3型抗體篩選細(xì)胞試劑，加入待檢血漿25 μl，使用微孔板孵育器37 ℃孵育15 min，放入專用血型血清離心機中，參數(shù)為900 r/min，離心時間為2 min，以3 000 r/min速度離心3 min，離心后以肉眼觀察微柱管變化。將常規(guī)組待檢25 μl血漿與25 μl 5%篩檢紅細(xì)胞混合，使用微孔板孵育器37 ℃孵育1 h，使用鹽水對紅細(xì)胞進行洗滌，洗滌3次后倒去鹽水吸盡試管邊緣水分。同時加入抗人球蛋白試劑1滴，放入離心機中，以2 000 r/min轉(zhuǎn)速處理15 s，采用肉眼、顯微鏡觀察結(jié)果，本次檢測所有操作均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進行。

1.3觀察指標(biāo)比較兩組檢查結(jié)果，觀察組以紅細(xì)胞均勻沉淀在微柱管底部者為陰性，以紅細(xì)胞懸浮在凝膠卡表面、中間為陽性，常規(guī)組以紅細(xì)胞凝聚為陽性者。為保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確性，在陰性者血漿中滴加1滴致敏紅細(xì)胞懸液，以2 000 r/min轉(zhuǎn)速處理15 s，若出現(xiàn)凝集表示結(jié)果準(zhǔn)確。

2 結(jié)果

常規(guī)組抗體陽性率為0.55%(16/2 900)，與觀察組0.66%(19/2 900)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；常規(guī)組抗體漏檢率為15.8%(3/2 900)，高于觀察組[0.0%(0/2 900)]，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

3 討論

輸血是臨床治療和搶救生命的重要措施，近些年被廣泛用于臨床治療，醫(yī)院輸血救治分為長期、短期治療。對于需長期進行輸血治療者，不僅要保證治療及時、有效，還要避免輸血所致的潛在危害，確保受輸者輸血安全。早期ABO 血型系統(tǒng)無法滿足用血安全需要，部分ABO配型成功者，在治療時仍會發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，輕者出現(xiàn)發(fā)熱、寒戰(zhàn)等不適，嚴(yán)重者可發(fā)生溶血反應(yīng)，對患者生命安全造成嚴(yán)重影響[3]。研究發(fā)現(xiàn)新生兒、多次輸血以及妊娠者體內(nèi)易產(chǎn)生紅細(xì)胞抗體，可使機體內(nèi)免疫反應(yīng)遲發(fā)，導(dǎo)致溶血。因此在輸血前需對患者進行抗體篩查，并根據(jù)抗體結(jié)果進行治療[4]。目前臨床輸血前通常使用抗原、抗體反應(yīng)、鹽水法、凝聚胺法以及試管間接球蛋白法進行免疫學(xué)檢查、抗體篩查、血型鑒定等，其中鹽水法操作簡單，但抗體檢測不完全；凝聚胺法檢測用時短、操作簡便，但受血漿蛋白、冷凝集素等外界因素影響，漏檢率較高；試管間接球蛋白法檢測結(jié)果準(zhǔn)確度良好，但步驟繁瑣、檢測用時較長，需要對紅細(xì)胞進行3次洗滌。因此臨床需要一種快速、準(zhǔn)確度高的抗體篩選方式[5]。

近年來微柱凝膠間接抗球蛋白法逐漸被應(yīng)用于臨床，其通過微柱中大分子溶液、抗球蛋白對抗人球蛋白進行檢測，無需紅細(xì)胞洗滌，可有效避免洗滌造成的誤差，從而提高檢測靈敏度[6]。其對弱凝集標(biāo)本也有良好的檢出率，且這種檢測方式對操作者技術(shù)、經(jīng)驗要求不高，時間短、操作簡便，能減少相關(guān)客觀因素的影響，使用肉眼即可判讀結(jié)果。本研究中兩組不規(guī)則抗體陽性率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，但常規(guī)組抗體漏檢率高于觀察組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

綜上所述，輸血前為避免不規(guī)則抗體造成不良反應(yīng)，可選擇微柱凝膠間接抗球蛋白法進行抗體篩選，其準(zhǔn)確度高，漏檢率低。

[1] 杜忠斌,劉俊紅,李惠霞,等.微柱凝膠不規(guī)則抗體篩查方法的改進[J].實用醫(yī)技雜志,2014,21(1):56-57.

[2] 陳勇,王余成,陳晨,等.不規(guī)則抗體篩查在臨床輸血中的意義探討[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2013,34(19):2564-2565.

[3] 賈小村.不規(guī)則抗體篩查在溶血性輸血反應(yīng)中的預(yù)防效果[J].中國實用醫(yī)藥,2016,11(27):55-56.

[4] 曹微微,舒象武,李碧娟,等.55481例住院擬輸血患者紅細(xì)胞血型不規(guī)則抗體分析[J].臨床輸血與檢驗,2013,15(3):238-240.

[5] 嚴(yán)達剛,陳應(yīng)紅,董玉紅,等.2種方法對紅細(xì)胞同種抗體的檢測能力的比較[J].中國輸血雜志,2014,27(1):32-34.

[6] 安勤發(fā),胡志紅,崔慧芹,等.微柱凝膠卡式法檢測紅細(xì)胞不規(guī)則抗體的效果[J].中國生物制品學(xué)雜志,2013,26(6):880-882.

R 446.6

10.3969/j.issn.1004-437X.2017.22.077

2017-03-11)