趙協(xié),于忠良,楊高磊,張玉,溫書香,崔建凱,李開放,李彩霞
(1.漯河市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,河南漯河462000;2.漯河市外埠入漯畜產(chǎn)品查驗(yàn)中心)
豬偽狂犬病難以根除的原因及防控措施
趙協(xié)1,于忠良2,楊高磊1,張玉1,溫書香1,崔建凱1,李開放1,李彩霞1
(1.漯河市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心,河南漯河462000;2.漯河市外埠入漯畜產(chǎn)品查驗(yàn)中心)
偽狂犬病(PR)是由偽狂犬病毒(PRV)引起的一種急性傳染病,多種家畜和野生動(dòng)物均可發(fā)病。隨著現(xiàn)代化、規(guī)模化、集約化養(yǎng)殖生產(chǎn)的發(fā)展,該病的發(fā)生和流行以及危害日益嚴(yán)重,筆者結(jié)合實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)綜合分析該病難以根除的原因并提出有效的防控措施,以期為我國(guó)廣大養(yǎng)豬戶提供有效的參考。
1.1 檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性難以有效保障
基因缺失苗的使用使PRV的防控優(yōu)越于其他疫病的防控,與之相匹配的檢測(cè)方法的建立可以有效區(qū)分養(yǎng)豬場(chǎng)豬只的野毒感染和疫苗免疫。目前實(shí)驗(yàn)室PRV檢測(cè)方法中常用的主要有PCR、熒光定量PCR和ELISA試驗(yàn)。其中普通PCR較后兩個(gè)檢測(cè)方法能夠節(jié)約成本,可以根據(jù)PRV病毒gE基因設(shè)計(jì)特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增同樣可以有效區(qū)分野毒感染和疫苗免疫。值得注意的是PCR檢測(cè)結(jié)果與前期樣品的處理有很大的關(guān)系。如果樣品中病毒粒子含量低,提取到的核酸含量也會(huì)很低,PCR擴(kuò)增得到的產(chǎn)物經(jīng)電泳檢測(cè)時(shí),檢測(cè)孔即便是陽(yáng)性樣品也會(huì)因較低的PCR產(chǎn)物量誤判為陰性。另外,凝膠成像系統(tǒng)能夠檢測(cè)到的核酸量約為10 ng,能夠影響核酸量的因素最終都有可能造成檢測(cè)結(jié)果的不準(zhǔn)確。熒光定量PCR技術(shù)以其較高的靈敏度和高通量等優(yōu)勢(shì)成為實(shí)驗(yàn)室樣品檢測(cè)的新生代寵兒,尤其是對(duì)于豬偽狂犬病潛伏感染期或者感染早期的樣品進(jìn)行檢測(cè)時(shí)是普通PCR靈敏度的數(shù)百倍,成功彌補(bǔ)了普通PCR檢測(cè)靈敏度低的缺陷。通常情況下,熒光定量PCR使用的引物是根據(jù)gE基因合成,在養(yǎng)殖場(chǎng)不提供何種基因缺失苗信息的情況下容易造成高陽(yáng)性率的檢測(cè)結(jié)果,給養(yǎng)殖戶經(jīng)濟(jì)帶來(lái)重大損失。除了上述兩種方法外,ELISA方法是病毒抗原檢測(cè)的主要血清學(xué)方法。我國(guó)研究人員建立的ELISA檢測(cè)方法雖具有較高的特異性,但靈敏性的極限仍然很低。換句話說(shuō)就是豬偽狂犬病的潛伏期感染或早期感染的病原,因其較低的病毒粒子量而無(wú)法檢測(cè)為陽(yáng)性。因此,根據(jù)豬偽狂犬病凈化的原則“免疫-監(jiān)測(cè)-捕殺/淘汰”機(jī)制,在中間“監(jiān)測(cè)”環(huán)節(jié)往往會(huì)因?yàn)楸O(jiān)測(cè)結(jié)果的不準(zhǔn)確性使得豬場(chǎng)假陰性豬成為該豬場(chǎng)潛在的帶毒傳染源,這是豬偽狂犬病難以徹底根除的重要原因之一。
1.2 和其他疫病混合感染
豬偽狂犬病常與副豬嗜血桿菌病、豬瘟和豬藍(lán)耳病混合感染,在臨床上極易因相似的臨床癥狀或者是并發(fā)癥的臨床癥狀更明顯造成對(duì)豬偽狂犬病的誤診、漏診等現(xiàn)象,從而使豬偽狂犬病病原一直存在并引起不同年齡段豬只的持續(xù)感染。經(jīng)過(guò)查閱歷年來(lái)全國(guó)各地豬只的混合感染情況并結(jié)合臨床癥狀發(fā)現(xiàn),豬只的混合感染多以體溫升高為主要特征。我國(guó)一些地區(qū)以發(fā)生體溫升高為特征的豬高熱病嚴(yán)重影響了我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的健康發(fā)展。高熱病常由多種病原引起的以高熱癥狀為主的難以用特效藥物治療的豬病。以豬藍(lán)耳病與豬偽狂犬病的混合感染為例,漯河市臨潁縣某散養(yǎng)戶病豬表現(xiàn)為無(wú)食欲、發(fā)熱、四肢和腹部有紫斑,體溫高達(dá)42℃,剖檢可見肺組織變白,肝腫大,呈現(xiàn)土黃色,腎臟瘀血,表面有點(diǎn)狀出血點(diǎn)。經(jīng)過(guò)病原學(xué)和血清學(xué)方法對(duì)所采集的樣品進(jìn)行檢測(cè),發(fā)現(xiàn)該豬場(chǎng)發(fā)病豬和死亡豬屬于豬偽狂犬病和豬藍(lán)耳病混合感染。經(jīng)對(duì)該豬場(chǎng)進(jìn)行的流行病學(xué)調(diào)查顯示,該豬場(chǎng)在引進(jìn)豬時(shí)并沒有對(duì)其注射豬藍(lán)耳病疫苗,對(duì)已有豬只僅注射了豬瘟疫苗,對(duì)產(chǎn)前母豬注射了豬偽狂犬疫苗且劑量并不符合要求。該豬場(chǎng)發(fā)病豬的臨床癥狀同時(shí)呈現(xiàn)出了豬偽狂犬和豬藍(lán)耳病的典型臨床癥狀,因此在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室診斷的時(shí)候會(huì)同時(shí)考慮針對(duì)兩種病原的檢測(cè)。而在部分情況下,患病豬只表現(xiàn)出一種病原的典型臨床癥狀,給臨床診斷帶來(lái)很大的麻煩。同時(shí)豬偽狂犬病原會(huì)一直存在于豬場(chǎng),持續(xù)感染現(xiàn)存豬以及后代豬。
1.3 潛伏感染的特性造成難以診斷和根除
豬多數(shù)情況下是通過(guò)呼吸道和消化道感染PRV的,PRV進(jìn)入機(jī)體后首先在咽部黏膜和扁桃體內(nèi)大量復(fù)制和增殖,當(dāng)病毒粒子達(dá)到一定數(shù)量后開始入侵神經(jīng)系統(tǒng),此時(shí)用PCR方法和野毒感染抗體檢測(cè)試劑盒檢測(cè)結(jié)果均呈現(xiàn)陰性。當(dāng)病毒進(jìn)入血液中,就會(huì)隨著血液循環(huán)擴(kuò)散到全身各個(gè)器官組織。值得注意的是血液中PRV病毒含量仍然很低,用PCR方法檢測(cè)時(shí)很難檢測(cè)出病毒核酸。豬對(duì)PRV的抵抗力主要取決于豬的日齡和感染毒株的毒力強(qiáng)弱,豬偽狂犬病可以使各個(gè)年齡段的豬發(fā)病,不同年齡段的豬發(fā)病后其臨床癥狀也有很大的差異。仔豬出生正常,2~3 d開始發(fā)病,體溫升高,肌肉震顫,行動(dòng)不穩(wěn),側(cè)臥倒地,抽搐,之后持續(xù)死亡。斷奶仔豬和育成豬多呈現(xiàn)呼吸道綜合征,流鼻涕,打噴嚏,咳嗽,呼吸困難,死亡率比較低。從出生仔豬到育成豬感染PRV后可以通過(guò)臨床癥狀做出初步的判斷并及時(shí)采取免疫和淘汰措施減少豬場(chǎng)經(jīng)濟(jì)損失。但對(duì)于種豬來(lái)說(shuō),尤其是種母豬除了表現(xiàn)呼吸癥狀外,主要表現(xiàn)為妊娠母豬流產(chǎn),產(chǎn)死胎,木乃伊胎。母豬產(chǎn)仔后其體溫和精神狀態(tài)均正常。隨著規(guī)?;B(yǎng)豬場(chǎng)的大力發(fā)展,豬偽狂犬病的流行特點(diǎn)也發(fā)生了一些變化,感染豬常表現(xiàn)為亞臨床癥狀、隱性帶毒、持續(xù)感染和垂直傳播的特點(diǎn)。種豬可以通過(guò)精液和胎盤將PRV病毒粒子傳給下一代,對(duì)于隱性感染的豬,應(yīng)激反應(yīng)可以激活體內(nèi)的PRV病毒致使豬發(fā)病。豬偽狂犬病毒在豬體內(nèi)經(jīng)過(guò)多次傳代,毒力可能會(huì)增強(qiáng)并呈地方流行的特點(diǎn)。
1.4 生物安全意識(shí)不強(qiáng)
有些豬場(chǎng)為了節(jié)約成本,將偽狂犬發(fā)病豬、流產(chǎn)仔豬棄置野外,成為家養(yǎng)寵物和野生動(dòng)物的食物,這些動(dòng)物一旦誤食了發(fā)病豬就可攜帶豬偽狂犬病毒。在一些防控不嚴(yán)的養(yǎng)殖場(chǎng),鼠類、犬貓和鳥類可以自由出入,成為PRV威脅豬場(chǎng)的根源。此外,部分豬場(chǎng)飼養(yǎng)管理人員對(duì)豬偽狂犬病的認(rèn)識(shí)不足,注射用的器具,疫苗瓶子,尤其是弱毒疫苗不做任何處理,隨意丟棄。一旦敏感動(dòng)物接觸很容易感染該病,成為該病的攜帶者。
1.5 引種不規(guī)范
我國(guó)中小型養(yǎng)豬場(chǎng)在引種方面最容易犯的一個(gè)錯(cuò)誤就是引種不規(guī)范,這在一些新建的養(yǎng)豬場(chǎng)尤為明顯。豬場(chǎng)為了擴(kuò)大繁殖數(shù)量,降低檢驗(yàn)檢疫門檻,到處購(gòu)買種公豬、種母豬和斷奶仔豬,無(wú)論是大豬還是小豬都混合飼養(yǎng),飼養(yǎng)密度較大,豬只轉(zhuǎn)群相對(duì)頻繁,豬只的應(yīng)激反應(yīng),對(duì)疫病的交叉感染現(xiàn)象非常嚴(yán)重。生產(chǎn)實(shí)踐證明,我國(guó)中小型養(yǎng)豬場(chǎng)常發(fā)生疫病的原因與引種不規(guī)范、檢驗(yàn)不合格、引進(jìn)不隔離檢測(cè)等有很大的關(guān)系。
2.1 綜合臨床診斷和實(shí)驗(yàn)室診斷,提高檢出率
豬只感染偽狂犬病后可因年齡不同呈現(xiàn)出不同的臨床癥狀。仔豬主要表現(xiàn)為神經(jīng)癥狀、共濟(jì)失調(diào);成年豬癥狀主要表現(xiàn)為呼吸道癥狀,常呈犬臥姿勢(shì);母豬流產(chǎn)、產(chǎn)死胎、公豬睪丸炎。當(dāng)出現(xiàn)以上癥狀時(shí)可以初步判定為豬偽狂犬病,而要真正確診豬偽狂犬病感染還需要結(jié)合實(shí)驗(yàn)室診斷。實(shí)驗(yàn)室診斷常用的方法主要是PCR和ELISA方法,PCR方法雖然成本低,快捷,但靈敏度低。對(duì)于病毒粒子較少的陽(yáng)性樣本很難檢測(cè)出陽(yáng)性。因此,在有條件的實(shí)驗(yàn)室可以選擇熒光定量PCR方法,此檢測(cè)方法靈敏度和特異性均優(yōu)越于普通PCR,即便是很少的病毒粒子量也可被檢測(cè)出來(lái)。
2.2 制定科學(xué)免疫程序
為了確保免疫的有效性,在對(duì)養(yǎng)豬場(chǎng)進(jìn)行免疫之前先對(duì)其進(jìn)行PRV野毒感染的檢測(cè)。對(duì)于PRV陰性豬群,防治豬偽狂犬病的主要措施除了防止豬偽狂犬病毒的入侵外,還要實(shí)行對(duì)整個(gè)豬群全群免疫的防控措施。目前市場(chǎng)上銷售的豬偽狂犬疫苗大致分為兩類,即弱毒苗和滅活苗。弱毒苗雖然產(chǎn)生免疫力比較快且免疫時(shí)間較長(zhǎng),但是存在安全隱患。因?yàn)槿醵疽呙缰腥久缡且环N通過(guò)多次傳代致弱的疫苗,很有可能發(fā)生變異導(dǎo)致毒力返祖返強(qiáng)。基因缺失弱毒苗同樣有因重組而使毒力變強(qiáng)的可能。相比弱毒苗,滅活苗安全穩(wěn)定,在PRV陰性豬場(chǎng)免疫滅活苗尤其是基因缺失滅活苗不但安全,而且便于檢測(cè)時(shí)鑒別是PRV野毒感染還是免疫所致抗體陽(yáng)性。對(duì)于PRV陽(yáng)性豬場(chǎng),其控制策略主要是淘汰陽(yáng)性豬和全群免疫。PRV陽(yáng)性豬群是豬場(chǎng)豬只持續(xù)感染的源頭,因此必須將PRV的傳染源徹底根除才能從根本上解決問題。為了解決感染場(chǎng)種豬繁殖障礙和仔豬發(fā)病死亡率高的問題,必須對(duì)全群免疫弱毒苗。對(duì)于發(fā)病的仔豬和育肥豬注射的抗血清雖然可以降低死亡率,但是費(fèi)用較高,不實(shí)用,且發(fā)病豬只即便是治愈好了也是終身帶毒,會(huì)引起豬場(chǎng)的持續(xù)感染。
2.3 制定管理制度,提高管理水平
豬偽狂犬病的防控措施中除了做好疫苗的免疫接種外,還要做好生產(chǎn)管理、飼養(yǎng)管理和防疫管理的工作。帶毒母豬是PRV感染仔豬的罪魁禍?zhǔn)?,有研究表明,在仔豬出生3周齡以內(nèi),其PRV抗體水平非常高,可以使得仔豬對(duì)PRV有一定的抵抗力,但隨著仔豬日齡的增加,其母源抗體水平越來(lái)越低,極易感染PRV。因此筆者建議對(duì)于有條件的養(yǎng)殖場(chǎng)實(shí)行多點(diǎn)飼養(yǎng)全進(jìn)全出的生產(chǎn)管理和飼養(yǎng)管理模式,嚴(yán)格執(zhí)行仔豬3周齡斷奶計(jì)劃,使得仔豬和哺乳母豬分開飼養(yǎng),有效切斷豬偽狂犬病的傳播。同時(shí)對(duì)養(yǎng)豬場(chǎng)定期監(jiān)測(cè)和注射疫苗,發(fā)現(xiàn)PRV陽(yáng)性豬及時(shí)淘汰或者隔離飼養(yǎng)逐步淘汰。此外,豬場(chǎng)還要做好PRV的防疫工作,為了確保PRV的徹底根除,建立PRV全陰性豬場(chǎng),聯(lián)合豬場(chǎng)技術(shù)人員,對(duì)生產(chǎn)設(shè)施設(shè)備定期用3%的火堿消毒、工作服用熏蒸消毒、每一批豬轉(zhuǎn)出后嚴(yán)格按照清洗、消毒、沖洗、晾干、消毒、熏蒸、火堿消毒的模式對(duì)豬場(chǎng)進(jìn)行徹底消毒才能降低PRV感染的概率。嚴(yán)禁外來(lái)人員、物流、車流進(jìn)入養(yǎng)豬場(chǎng),必要時(shí)必須嚴(yán)格消毒才能進(jìn)入。與此同時(shí)做好鼠、野貓、蚊蠅的消滅工作,嚴(yán)格舍棄被鼠源污染的飼料,有效切斷PRV傳播媒介。
2.4 堅(jiān)持自繁自養(yǎng),培育PRV陰性豬群
筆者結(jié)合日常監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn),多年的養(yǎng)豬經(jīng)驗(yàn)反復(fù)驗(yàn)證了一個(gè)規(guī)律,即凡是能堅(jiān)持自繁自養(yǎng)的豬場(chǎng),防疫工作做得好的情況下很少會(huì)發(fā)生疫病的暴發(fā)流行。堅(jiān)持自繁自養(yǎng)的好處主要是防止疫病帶入豬場(chǎng)。如果非要引進(jìn)新的豬只,則要求引進(jìn)豬只的來(lái)源必須是非疫源區(qū)。對(duì)于引進(jìn)的豬只在放入豬場(chǎng)之前要對(duì)其實(shí)行嚴(yán)格的隔離政策,同時(shí)在引種前和引種后對(duì)引進(jìn)的豬采血和采樣做血清學(xué)和病原學(xué)檢測(cè),錯(cuò)檢、漏檢等工作上的失誤會(huì)使得偽狂犬病防控工作前功盡棄。綜合兩種檢測(cè)方法,確定無(wú)疫病攜帶時(shí)方可與豬場(chǎng)的豬只混合飼養(yǎng)。
目前豬偽狂犬病并沒有特效藥物可以根除,疫苗免疫是預(yù)防和控制該病最有效的措施,同時(shí)結(jié)合血清學(xué)和病原學(xué)監(jiān)測(cè)逐步淘汰陽(yáng)性豬只。做好生產(chǎn)、防疫管理工作,對(duì)生產(chǎn)設(shè)備和圈舍定期消毒,對(duì)外來(lái)人員、物流和車輛嚴(yán)格消毒,有效切斷傳播途徑,規(guī)范管理制度,在綜合各項(xiàng)防控措施的基礎(chǔ)上,豬偽狂犬病才可以根除。
S858.28
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:1004-5090(2017)07-0028-03
2017-06-20)