淺談高效液相色譜法在藥品檢驗中的運用

喬桂芳

（內(nèi)蒙古錫林郭勒盟食品藥品檢驗檢測中心，內(nèi)蒙古 錫林浩特 026000）

淺談高效液相色譜法在藥品檢驗中的運用

喬桂芳

（內(nèi)蒙古錫林郭勒盟食品藥品檢驗檢測中心，內(nèi)蒙古 錫林浩特 026000）

高效液相色譜法在藥品檢驗中的作用日益凸顯，已越來越得到醫(yī)學(xué)界的認(rèn)可，廣泛應(yīng)用于藥品檢驗中。本文向讀者介紹了高效液相色譜法分類和作用，已求獲得更多讀者的認(rèn)同，廣泛應(yīng)用于藥品檢驗檢測中。

高效液相色譜法；作用；藥品檢驗；運用

1 概 言

起初，高效液相色譜法只是充當(dāng)一種分離手段，把混合物中不同組分顯示出的流動相和固定相進行系數(shù)分配，值兩相呈現(xiàn)相對運動之際，兩相間的一些組分反復(fù)進行多次的分配，最后分離出來。到了上世紀(jì)50年代，業(yè)界有識之士將上述分離手段與檢測系統(tǒng)連結(jié)為一體，逐漸形成一種獨特的運用系統(tǒng)。高效液相色譜法在分離速度、分離效能、檢測靈敏度、自動化等方面發(fā)揮了獨特的作用，其正以適用范圍廣的獨創(chuàng)性受到醫(yī)學(xué)界、醫(yī)藥界人土的廣泛關(guān)注，正普遍運用于藥品檢驗中，并發(fā)揮著越來越重要的作用，成為藥品質(zhì)量控制的最有效技術(shù)手段。

2 分 類

2.1 吸附色譜法

何謂吸附色譜法？通俗的解釋是，用吸附劑當(dāng)固定相，用于藥品分離的色譜法，人們習(xí)慣性稱其為吸附色譜法。吸附色譜法在目前使用最普及。吸附色譜法用硅膠作為固定相，用一種或多種有機溶劑混合起來作為流動相。這種色譜的分離原理是：通過不同的組分經(jīng)過固定相時產(chǎn)生不同的吸附力，分離不同的色譜。強度大的組分，極性會更大，這樣一來，固定相的吸附力會更加強大，保留的時間也會變得更為持久。當(dāng)流動相的極性亢奮有力時，其洗脫力會更加強勢，但其組分的保留時間會轉(zhuǎn)瞬消逝。

2.2 液-液分配色譜法

把填料表面上覆蓋的溶劑膜這一固定相和流動相兩者分離出去，使組分快速溶入兩相中，這樣一來，不同的組分便會由于分配系數(shù)（K）的不同而一一被分離出來，這一過程就是液-液分配色譜法。因固定相和流動相極性差異很大，液-液分配色譜法又細(xì)分為兩類：正相色譜法和反相色譜法。

2.2.1 正相色譜法

固定相極性遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于流動相極性，這種液-液分配色譜法常被人們稱之為正相色譜法。人們常把硅膠與氰基鍵合硅膠、氨基鍵合硅膠等極性的化學(xué)鍵合固定相用在正相色譜法中，常把極性很低的有機溶劑用在流動相中。正相色譜中法較為固定的模式是：極性較小的組分最先流出，因為它K 值很低，最后流出極性較高的組分。正相色譜法常用于分離有機溶劑中的極性及中等極性的分子型物質(zhì)。

2.2.2 反相色譜法

流動相極性高于固定相極性一大截，這種液-液分配色譜法常被人們稱為反相色譜法。反相色譜法用非極性固定相為常規(guī)武器，其最常用的物質(zhì)為：十八烷基硅烷鍵合硅膠，辛烷基硅烷鍵合硅膠，氰基柱，氨基柱。流動相常用的物質(zhì)為：水與甲醇、乙腈或四氫呋喃的混合溶劑。在反相色譜法中，極性比較強勢的組分因K 值較大而先行流出色譜柱，極性較弱的組分緊隨其一瀉而出。

2.3 離子交換色譜法

將離子交換劑用作固定相，進行色譜分離，這種色譜法稱為離子交換色譜法。離子交換色譜法的分離過程，是通過組分與離子交換劑的親和力存在的差異來完成。其柱填料中加入了極性較高、已經(jīng)離子化的基團，像羧酸啦、磺酸啦，或季銨離子等等，當(dāng)pH 值與其的親和力達到一定程度后，上述基團會被強大的對手解離而出，奮不顧身地去牽電荷相反的物質(zhì)。離子型物質(zhì)可以因為可以和柱填料同頻共振，故能生發(fā)出相當(dāng)強大的吸引-解吸功效，從而使分離效果令人震驚。

2.4 分子排阻色譜法

分子排阻色譜法亦可稱為凝膠色譜法。這種色譜法的固定相孔徑大，又孔多而密，人們通常稱其為凝膠。分離組分的分離原理為：分子空間因其面積范圍不同，運轉(zhuǎn)一定時間后即被分離出來。每每遇到組分被流動相夾裹著涌入色譜柱時，固定相表面的孔穴將體積大的分子拒之于門外，情急之下，體積大的分子只好隨流動相徑直躍過色譜柱，停留片刻后隨即消失。體積小的分子能夠步入孔穴內(nèi)，在色譜柱中進行較長時間的停留。分子的體積雖然不大，但流入的孔穴比較多，經(jīng)歷的路徑比較長，故保留時間會很長。

3 作 用

3.1 鑒別藥物

高效液相色譜法可用于藥物鑒別。大家知道，藥典在用HPLC法測定含量時，通常用高效液相色譜法鑒別藥物屬性。在中藥的指紋圖譜鑒別過程中，HPLC也得到了充分的運用。同時，高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）技術(shù)的推行，把色譜技術(shù)的高分離能力和質(zhì)譜技術(shù)的解析能力完美地結(jié)合在一起，成功地運用到藥品定性研究中，引起了業(yè)界的廣泛關(guān)注。

3.2 測定含量

HPLC法優(yōu)點眾多，難以在此一一羅列，僅舉其常見的幾點，便可一葉知秋，窺一斑而知全豹，比如其分辯率高、分析速度快，同時具有良好的重復(fù)性和樣品用量低下、自動化程度高等等優(yōu)點。在定量測定藥品過程中，HPLC法具有其它方法無可比擬的獨特優(yōu)勢。

3.3 檢驗中藥成分

中藥所含成分既多又復(fù)雜，只有各成分之間組合得當(dāng)，才能取得令人滿意的療效。中藥成分的特點呈多樣化和復(fù)雜性，這給分析中藥成分帶來了重重阻力。HPLC法的出現(xiàn)，能夠?qū)⒅兴幹懈鞒煞只虼郎y成分與其他雜質(zhì)進行有效地、快速地脫軌、剝離，進而把中藥中所含成分搞得清清楚楚。近入新世紀(jì)后，HPLC法更加廣泛地運用于中藥檢驗中，其作用日漸明顯。

4 結(jié) 論

高效液相色譜法技術(shù)領(lǐng)先，可操作性強，自動化水平高，其正以獨特的優(yōu)勢，廣泛地運用于藥品檢驗檢測中，并發(fā)揮著越來越重要的作用。

[1]劉占江.高效液相色譜法的應(yīng)用前景[J].內(nèi)蒙古醫(yī)學(xué).2015,8.

[2]李曉紅.高效液相色譜法在藥品檢驗中的運用價值分析[J].中國醫(yī)藥指南.2012,9.

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A

ISSN.2095-8242.2017.063.12463.02

劉欣悅