當歸不同炮制品揮發油對大鼠LPS急性炎癥的作用觀察

陳春苗，張國哲，劉平平

（1.江蘇醫藥職業學院（原鹽城衛生職業技術學院）藥學院， 江蘇 鹽城 224000）

·藥物與臨床·

當歸不同炮制品揮發油對大鼠LPS急性炎癥的作用觀察

陳春苗，張國哲1，劉平平1

（1.江蘇醫藥職業學院（原鹽城衛生職業技術學院）藥學院， 江蘇 鹽城 224000）

目的當歸不同炮制品揮發油對大鼠LPS急性炎癥的作用。方法 將100 μg/kg LPS以腹腔注射的方式注入構建大鼠急性炎癥模型，經檢測細胞因子、血清炎性介質與血常規，并和肝臟與肺臟組織病理學觀察相結合，對S-VOAS(生當歸揮發油)、C-VOAS(當歸炭揮發油)和J-VOAS(酒當歸揮發油)的抗炎活性情況進行評價。結果 模型組的PLT(血小板計數)、NE(中性粒細胞百分比)及WBC(白細胞計數)情況和對照組相比，模型組顯著高于對照組，兩組差異效果顯著具有統計學意義(P＜0.05)；對照組的LY(淋巴細胞百分比)明顯高于模型組，組間數據差異存在統計學意義(P＜0.05)；對照組的血清TNF-α、和IL-6、IL-1β和NO含量明顯低于模型組，組間數據差異存在統計學意義(P＜0.05，)，模型組的IL-10含量明顯高于對照組(P＜0.05)；上述細胞因子、血清炎性因介質和血常規指標情況在S-VOAS、C-VOAS及J-VOAS干預后均顯著回調(P＜0.05)。結論 組織病理學觀察發現，模型組大鼠肺泡擴張，大量炎性細胞在間質和肺泡中浸潤，部分肝細胞發生水腫和顆粒變性，肝小葉彌散性壞死肝索排列紊亂；經J-VOAS干預后，能顯著改善其病理變化。

急性炎癥；不同炮制品；當歸

對于炎癥和血虛頭痛、痛經和腰腹疼痛癥的治療，臨床所采用當歸。當歸常用炮制品包括:當歸炭和生當歸、土當歸和酒當歸及油炒當歸，不同疾病需予以針對性的中醫臨床治療。有研究報道顯示，不同方法炮制當歸后，在組成及含量方面，其所含的揮發油成分會發生一定的變化。本研究采用LPS(脂多糖)誘導大鼠急性炎癥模型為例，進一步探究當歸不同炮制品揮發油對大鼠LPS急性炎癥的作用，現做出研究報道如下。

1 試劑與材料

1.1 實驗藥材

本研究所使用的當歸實驗藥物來自陜西地區，科:傘形科；目:傘形目；綱:雙子葉植物綱。

1.2 實驗動物

本研究所選用的實驗動物為Wistar大鼠，其研究對象均為雄性，170至210克為大鼠體質量，所有研究動物的供給均由江蘇醫藥職業學院實驗動物中心提供。(23±1)℃為室內溫度量，50%～65%為室內濕度量，對大鼠分別進行為期一天的黑暗環境和光照環境，做到給水自由，飲食標準化。

1.3 試劑

脂多糖:大腸桿菌血清型055:提供公司為美國Sigma；分析純試劑包括:二甲苯和吐溫-80、乙醇和無水硫酸鈉、氫氧化鈉和水合氯醛、上述均由上海化學試劑公司所提供；采用南京建成生物工程研究所供應的NO(一氧化氮)測定試劑盒；采用北京奇松生物科技有限公司供應的TNF-α(大鼠腫瘤壞死因子)ELISA和IL-10(大鼠白細胞介素10)、IL-1β(大鼠白細胞介素 1β)和IL-6(大鼠白細胞介素 6)檢測試劑盒。

1.4 儀器

所選用的設備均為醫療專用儀器，其中包括:M15酶標儀和UV-5900分光光度計、大鼠代謝籠和P-500 mL揮發油提取器、恒溫振蕩器SHA-B和KDM-型調溫電熱套、循環水式多用真空泵SHB-Ⅲ和真空干燥箱YLD-2000及多管架自動平衡離心機TBZ5-WS。

2 方法

2.1 當歸不同炮制品的制備

當歸炭:取當歸片，將其向鍋內置入，用中火燒炒當歸，讓其內部呈棕褐色，其表面有焦黑色現象，炒到質枯脆并略有焦氣味道出現，取出放涼。酒當歸:向黃酒內置入當歸片，將其均勻攪拌后悶制，待當歸將黃酒吸凈后，將當歸片取出并向鍋內置入，用溫火燒炒當歸，直至其顏色呈深黃色并有酒香氣散出，取出放涼，每10 kg黃酒可泡當歸100 kg。

2.2 當歸不同炮制品揮發油的提取

粉碎200 g當歸不同炮制品后過40目篩分粒，依照《中國藥典》中提出的相關內容，對于揮發油的提取可采用水蒸氣蒸餾法進行，待提取完畢后，能夠獲取揮發油0.6毫升，用無水硫酸鈉對揮發油進行脫水，并將其放置在4℃ 冰箱中密封保存備用。給藥前用0.5%的吐溫-80配成所需濃度的當歸揮發油溶液。

2.3 動物處理和分組

本研究共選用雄性大鼠50只，按照數字隨機的方式將其分為五組，每組10只。其五組分別為:酒當歸揮發油(JVOAS)組和模型組、正常對照組和生當歸揮發油(S-VOAS)組及當歸炭揮發油(C-VOAS)組。予以C-VOAS組、S-VOAS組和J-VOAS組采用灌胃方式對其予以0.176 mL/(kg·d)劑量的相應揮發油；模型組與正常對照組采取灌胃吐溫-80 0.5%。按照口服的方式，將0.5%吐溫-80與藥物服用，每日1次，持續治療4天。于第4天灌胃30分鐘后，以腹腔注射的方式，度 S-VOAS組和 J-VOAS組、模型組和 CVOAS大鼠進行100 μg/kg LPS溶液，導致急性炎癥，把相應體積的生理鹽水注入正常對照組中。LPS注射8小時后，用4.5 mL/kg 10%水合氯醛麻醉大鼠，收集腹主動脈血液，向真空管內倒入一部分血液樣本，另外再向EDTA-K2抗凝管內倒入另一部分血液樣本。用生理鹽水將肺臟和肝臟洗凈，把福爾馬林10%溶液放入其內進行固定。

3 結果

整個實驗過程中，正常對照組大鼠均活潑好動，背毛有光澤，體質量漸增，飲食欲好；隨著造模時間延長，在LPS急性炎癥模型組中，大鼠喜歡扎堆現象，部分出現呆臥懶動，精神萎靡，飲食量降低，被毛比較粗亂；經J-VOAS、S-VOAS與C-VOAS干預后，相比模型組，大鼠的精神狀態好轉，活動增加，飲食欲得到提高，粗糙程度降低，但背毛略亂。

4 結論

依照《北京市中藥飲片炮制規范》及中國藥典記錄，當歸炭和油當歸、酒當歸和土當歸等都屬于當歸炮制品。有研究數據資料顯示，當歸經炮制后，其主要成分變化包括:總鞣質、阿魏酸和揮發油等。其中，阿魏酸與揮發油均有明顯下降，其順序為當歸炭＜土炒當歸＜酒炙當歸＜生當歸；總鞣質的變化情況為生當歸中總鞣質含量高于酒炙當歸，而相比生當歸，其他炮制品中總鞣質含量相對較高，排序為酒炙當歸＜生當歸＜土炒當歸＜當歸炭。

總而言之，對LPS所致大鼠急性炎癥采取當歸不同炮制品揮發油具有一定的干預效果，其中，干預效果最好為酒當歸揮發油，其次為當歸炭揮發油和生當歸揮發油。

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ISSN.2095-8242.2017.43.8465.02

江蘇高校品牌專業建設工程資助項目(Top-notch Academic Programs Project of Jiangsu Higher Education Institutions)， 編 號:PPZY2015A097。

本文編輯:柯 鳳