大黃藥材的成分檢測方法研究

孫磊

哈藥集團世一堂飲片有限責任公司 150000

大黃藥材的成分檢測方法研究

孫磊

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大黃是一種多年生的植物的統稱，不僅可以當作藥材來使用，還可以當做食材來食用，為了保證大黃藥品的純度更高，藥品行業的技術人員借助現代科技技術，研究出了多種測定大黃藥材的成分的方法，本文借助相關的理論資料以及數據對幾種測定大黃成分的方法進行研究，希望可以提升大黃的藥用價值。

大黃藥材；成分檢測；研究方法

大黃是一種比較常用的中藥材，其藥用歷史已經達到 2000多年，即使是在現代社會，其使用仍舊比較普遍，大黃也被稱為“將軍”“火參”“牛舌大黃”。大黃的藥用價值雖然很高，但其分布范圍也比較廣泛，包括四川、西藏、甘肅等地。雖然大黃的種類有很多，多達 45個品種，但是能夠當成藥材使用的僅有 3種，唐古特大黃、掌葉大黃以及藥用大黃。大黃炮制品的種類也比較多，根據中國藥典的記載，可以了解到大黃炭、熟大黃、酒大黃以及大黃，不同的大黃炮制品的炮制方法也存在差異。我國當前檢測大黃成分的方法主要有以下幾種：

1.PLC檢測法

以甲醇-1.0%冰醋酸為流動相，430nm 下檢測，圖譜中共標定了 23 個共有峰，12個不同產地、不同采收時間樣品之間的相似度在 90%以上，可作為大黃藥材的具有專屬性的指紋圖譜。采用微乳電動毛細管色譜法(MEEKC)建立不同來源掌葉大黃的指紋圖譜,使用未涂層石英毛細管柱，緩沖液為 SDS、正丁醇、正辛烷及硼砂溶液，并通過添加 10%的乙腈組成的 O/W 型微乳體系,分離電壓 18 k V,檢測波長 280 nm。結果通過聚類分析和相似度分析處理, 將 14 個掌葉大黃樣品初步分為三類:道地藥材,市售一般品和次品。后確立大黃指紋圖譜共有模式的方法，篩選出建立指紋圖譜共有模式的 10 批大黃的藥材。以 HPLC 法研究掌葉大黃不同炮制品水提取物的指紋圖譜，利用灰關聯度分析方法研究其止血譜效關系。說明大黃經炮制后，其鞣質類成分與蒽醌類成分含量的相對變化情況對大黃的止血藥效有較大影響。以乙腈-水-1%冰醋酸為流動相,梯度洗脫;254 nm 下探討能全面地反映大黃中所含化學成分的指紋圖譜的最適進樣量。確定此條件下大黃指紋圖譜的最佳進樣量為61.35μg。

2 薄層掃描色譜法

采用超臨界流體萃取薄層色譜掃描法測定大黃中大黃素的含量，超臨界流體萃取提取物比較純凈，可直接進行點樣分析，展開效果好。采用薄層層析法對黃中游離型和結合型蒽醌類成分進行分離，并用薄層掃描法測定其含量。在硅膠G薄層上用正己烷-乙酸乙酷-甲酸(15:5:0.25)展開劑對生大黃、熟大黃及其配方顆粒中的大黃素，并使用雙波長薄層掃描儀測定其含量。為研究大黃中蒽醌衍生物含量變化規律，采用薄層掃描法測定其含量。

3 毛細管電泳法

這種檢測大黃成分的方法，可以對大黃中的大黃素、蘆薈大黃素等成分進行檢測，不少研究者都通過這種方法，成功地對大黃中的毒性成分進行了檢測，通過這個方法將幾種毒性成分分離出來，此方法操作過程相對簡單，具有較好的重現性以及極高的分辨率，不僅能夠由于大黃成分檢測中，還可以用于檢測中藥中的多糖組成。

4 紫外線分光光度法

用紫外譜線組法測試 4 種大黃炮制品在不同極性溶劑中的紫外譜線圖譜,根據它們的紫外譜線圖譜峰位置的差異,對其加以區分鑒別。在改進了大黃藥材中總蒽醌的含量測定方法，方法為1，8-二羥基蒽醌與堿顯色后，2h 內隔時掃描光譜圖;對照品和樣品同樣處理后繪制標準曲線。采用甲醇冷浸法提取，比色法測定大黃中蒽酮的含量。用雙波長分光光度法測定大黃中大黃酚的含量。通過測定了 Tween80(NH4):s 氏液固萃取體系萃取大黃中大黃素的含量。還有研究人員用 UV 法測定大黃提取物中總蒽醌含量。通過建立了PH 梯度法萃取大黃中游離蔥醒，并用比色法分別進行含量測定。

5 二維紅外線光譜法

用紅外光譜與高木關野模糊系統相結合鑒別 52 種大黃樣品。并對神經網絡的隱含層個數和動量因子的影響作了討論。用高木關野模糊系統得到的結果比通常用的BP網絡要好。將向基函數網絡與紅外光譜分析技術相結合，可用于正品和非正品大黃的分類判別。通過小波變換對原始數據進行壓縮，測定和鑒別了45 個樣品，正確率達97.78%。采用紅外光譜法并結合二維相關光譜分析技術，對藥用西寧大黃和偽品華北大黃進行了無損快速鑒別研究。可有效區分真偽大黃。

6 LC-MS

根據大黃中游離蒽醌的基本結構和取代基的排列組合，建立了系統的分子量篩選表，運用 LC-MS 對大黃水提組分進行研究，在 ESI(-)的質譜數據中以目標分子量提取方式快速鑒定了12 種游離蔥醒類化合物。采用 HPLC/μV/MS 對生大黃和制大黃的小分子化合物進行定性鑒定，以比色法測定生、制大黃中鞣質及多糖的含量，考察了炮制過程大黃有效組分的變化。采用液相色譜-串聯四級桿質譜聯方法，建立檢測中成藥麻仁丸中使用偽品大黃充當正品大黃的專屬方法。

7 熒光光譜法

利用三維熒光圖譜解析及活性成分測定方法研究中藥大黃。建立了測定唐古特大黃水提液中土大黃普含量的熒光分析方法，擬定了溶液熒光法測定蘆薈大黃素含量的分析方法。采用熒光光譜分析法對青海大黃不同濃度水浸液進行熒光掃描，結果發現，水浸液濃度與熒光強度呈線性關系。在大黃水浸液三維熒光等高線光譜中發現一個明顯的熒光峰(401.8nm)，可作為大黃定性鑒別的依據。

在 HPLC 指紋圖譜的基礎上，可進一步開展譜效學研究，可使中藥質量與其藥效真正結合起來，有助于大黃作用機理。薄層色譜掃描法具有學習快，易掌握、便宜、靈活等特點。可以隨時改變展開劑、展開方向，顯色、觀察、檢測都很方便，且其靈敏度及分辨率較高、樣品處理簡便、設備易操作等特點。使薄層色譜掃描法在中藥化學成分含量研究中占有很重的作用。毛細管電泳法分離效率高、分析速度快、樣品用量少，適用于藥味較多、化學成分復雜的中藥復方成分的分析。LC-MS 聯用幾乎可以檢測所有的所有的化合物，比較容易解決分析熱不穩定的化合物難題。

8 結語

大黃成分的檢測方法比較多，本文列舉的幾種只是比較常見的檢測方法，在對不同的檢測方法進行分析時，發現不同的檢測成分的方法一般既有優勢，同時也存在劣勢，HPLC法對大黃成分測定時，準確度比較高，但是檢測需要的時間比較長，雖然紫外光度法的檢測速度快，但是檢測的準確度稍差。大黃的成分中并不都是有價值的藥用成分其中的大黃素就是一種比較典型的毒性成分，可能會致癌，當患者長期食用大黃，在停藥后，一般會出現便秘的情況，這也降低了大黃的藥用價值，為了能夠準確地檢測出大黃的各成分的含量，檢測人員要對現有的檢測方法進行研究。

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1672-5018（2017）03-225-01