實(shí)驗(yàn)室能力驗(yàn)證技術(shù)要點(diǎn)

能力驗(yàn)證是指認(rèn)可機(jī)構(gòu)為確保實(shí)驗(yàn)室維持較高的校準(zhǔn)和檢測水平而對其能力進(jìn)行考核、監(jiān)督和確認(rèn)的一種活動(dòng)，是評價(jià)實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果真實(shí)水平的有效手段，也是實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系持續(xù)改進(jìn)和不斷提高的有效措施。要做好農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)需要把握好幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)。

一、 能力驗(yàn)證前的準(zhǔn)備工作

1、 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置

對照標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書、確認(rèn)有效期、純度、結(jié)構(gòu)和分子量、根據(jù)標(biāo)識的純度等內(nèi)容進(jìn)行換算。選擇合適的標(biāo)準(zhǔn)溶液線性范圍，線性范圍的設(shè)置會(huì)影響定量結(jié)果的準(zhǔn)確性和線性系數(shù)。通常選擇3-4個(gè)濃度點(diǎn)，標(biāo)準(zhǔn)曲線的最低點(diǎn)為檢測限濃度點(diǎn)的二分之一左右，待測樣品的濃度最好在曲線的中間位置，這樣定量會(huì)更準(zhǔn)確，具體線性范圍則根據(jù)需要檢測的樣品濃度決定。

2、 試劑、器皿的處理

為確保實(shí)驗(yàn)過程中對所用試劑的進(jìn)行控制，必須做樣品空白實(shí)驗(yàn)，確保試劑空白的峰面積在檢測限以下，否則需要更換試劑，或?qū)⒃噭┲匮艉笫褂谩Ｅ渲萌芤簯?yīng)使用檢定過的移液管或經(jīng)計(jì)量合格后準(zhǔn)確無誤的移液槍。使用前將所用的實(shí)驗(yàn)器皿按照要求進(jìn)行清洗，若按照NY/T 761-2008標(biāo)準(zhǔn)操作實(shí)驗(yàn)，玻璃器皿在清洗后，需要用乙腈溶液進(jìn)行潤洗，盡量減少引入外來的污染因素，所用到的器皿必須在檢定周期內(nèi)。

3、 儀器條件的優(yōu)化

對實(shí)驗(yàn)過程中涉及的儀器設(shè)備進(jìn)行核查，確保在檢定或校準(zhǔn)有效期內(nèi)，并且滿足實(shí)驗(yàn)要求。特別是要對檢測儀器的精準(zhǔn)度和靈敏度進(jìn)行確認(rèn)，如達(dá)不到檢測要求需對儀器進(jìn)行調(diào)整。同時(shí)將新配置的標(biāo)準(zhǔn)溶液與以前的標(biāo)準(zhǔn)溶液同時(shí)上機(jī)測定，比較響應(yīng)值，正常情況下響應(yīng)值應(yīng)一致，或有所提高，若新配標(biāo)準(zhǔn)溶液靈敏度不如以前，需要查找原因并優(yōu)化儀器。

4、 樣品前處理方法的確定

重點(diǎn)把握方法的原理和關(guān)鍵點(diǎn)，明確每個(gè)步驟的目的，應(yīng)該怎樣進(jìn)行正確的操作，同時(shí)保證操作的穩(wěn)定性和一致性。對檢測限和定量限進(jìn)行加標(biāo)測定，準(zhǔn)確度和精密度要滿足方法的要求。如未能達(dá)到，需對操作的每個(gè)步驟進(jìn)行分解查找原因，是方法問題還是操作問題，該怎樣解決，確保這一環(huán)節(jié)的準(zhǔn)確無誤。

在NY/T 761-2008蔬菜水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留的測定中要注意一下幾點(diǎn)：1、提取步驟的過濾用的濾紙應(yīng)用定性濾紙。2、提取步驟的靜止時(shí)間不能過長，不能超過40分鐘。3、凈化步驟的水浴溫度要嚴(yán)格按照方法要求的溫度。4、要控制好凈化步驟的氮吹切記不要吹的太干，吹到潮乎乎為宜。

二、 能力驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中的質(zhì)量控制

在做實(shí)際樣品時(shí)同步做質(zhì)控樣品是為了保證檢測結(jié)果的可控性，達(dá)到預(yù)定的精確程度，為達(dá)到這一預(yù)定的目的所采取的工作步驟都必須是事先規(guī)劃好了的。過程中需要注意兩點(diǎn)：

1、 同步做質(zhì)控樣品

質(zhì)控樣品和待檢樣品必須同時(shí)操作，質(zhì)控樣品的添加濃度通常選擇2-5倍定量限的添加水平，濃度水平盡量與所測樣品的濃度保持一致，不能相差過大。質(zhì)控樣品可以選擇在空白樣品的基礎(chǔ)上進(jìn)行加標(biāo)，也可以采用已知量值得陽性樣品來進(jìn)行檢驗(yàn)。同時(shí)確保質(zhì)控樣品和待檢樣品檢測時(shí)每個(gè)步驟操作的一致性，降低誤差。

2、 雙人負(fù)責(zé)制

樣品檢測需要按照一人主檢，一人監(jiān)督復(fù)核的模式操作。雙人負(fù)責(zé)可以避免偶然誤差的發(fā)生。檢驗(yàn)人員必須為有經(jīng)驗(yàn)，長期從事農(nóng)產(chǎn)品檢測的技術(shù)人員擔(dān)任，熟悉檢驗(yàn)方法，能把握操作中的關(guān)鍵步驟，對于檢驗(yàn)過程中的突發(fā)事件能正確應(yīng)對處理。

3、 基質(zhì)效應(yīng)的消除

所謂基質(zhì)，是指樣本中除分析物以外的組成，基質(zhì)常常對分析物的分析過程有顯著的干擾，因?yàn)轫憫?yīng)值的專屬性不強(qiáng)，即響應(yīng)值可能是其他物質(zhì)的響應(yīng)，可能會(huì)減少響應(yīng)，也可能會(huì)增加響應(yīng)，不可預(yù)測，因此會(huì)影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性，需要采取方法消除基質(zhì)效應(yīng)。在水產(chǎn)品農(nóng)殘檢測中，通常可以采用標(biāo)準(zhǔn)添加法，也就是通過標(biāo)準(zhǔn)添加法做標(biāo)準(zhǔn)曲線，即在篩選出的空白樣品（基質(zhì)最好與能力驗(yàn)證樣品一致）中添加3-4濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，同待測樣品一樣進(jìn)行前處理，上機(jī)測定后作為定量標(biāo)準(zhǔn)曲線使用。

4、 能力驗(yàn)證樣品的處理

能力驗(yàn)證樣品到達(dá)實(shí)驗(yàn)后，充分解凍，加入內(nèi)標(biāo)（內(nèi)標(biāo)最好使用同位素內(nèi)標(biāo)）后在避光冷藏處放置半小時(shí)后再按照規(guī)定的檢測方法操作，保證待測物和內(nèi)標(biāo)物的一致性。

5、 規(guī)范樣品測定順序

為防止待測液衰減，在前處理結(jié)束后樣品需及時(shí)上機(jī)操作并處理數(shù)據(jù)。樣品的測定順序按照先測試劑空白和樣品空白，再測低濃度樣品。最后測高濃度樣品的順序，防止高濃度樣品污染儀器，對后續(xù)樣品造成影響。在樣品測定序列穿插標(biāo)準(zhǔn)溶液的測定，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液的響應(yīng)值，可以掌握儀器的工作狀態(tài)。每個(gè)樣品需要上機(jī)平行測定兩次，可以降低因儀器不穩(wěn)定造成數(shù)據(jù)存在誤差。如果發(fā)現(xiàn)數(shù)據(jù)不正常，需要進(jìn)幾針試劑或更換離子傳輸管，先進(jìn)行這些簡單步驟的操作來清潔儀器，若無法恢復(fù)正常，再進(jìn)一步排查。

三、 數(shù)據(jù)上報(bào)前的結(jié)果分析

1、 結(jié)果須取平均值

取平均值的目的是避免偶然誤差，降低操作誤差，提高可信度。在檢測過程中有時(shí)會(huì)發(fā)現(xiàn)三個(gè)能力驗(yàn)證樣品中有兩個(gè)的結(jié)果平行性較好，有一個(gè)數(shù)值偏離一些，在我們無法確認(rèn)哪一個(gè)數(shù)值更接近真值時(shí)，就必須取數(shù)據(jù)的平均值，減少誤差。忌諱人為剔除平行性差的樣品結(jié)果，將自認(rèn)為平行性號的樣品重復(fù)測定多次后取平均值上報(bào)，這樣操作的后果有時(shí)反而將真實(shí)結(jié)果排除在外了。

2、 分析質(zhì)控樣品數(shù)據(jù)

根據(jù)質(zhì)控樣品的回收率和精密度數(shù)據(jù)，分析此次檢驗(yàn)過程的質(zhì)量。必要時(shí)對比質(zhì)量控制圖進(jìn)行分析，明確此次能力驗(yàn)證檢測結(jié)果的整體水平是偏低還是偏高，對數(shù)據(jù)的把控做到心中有數(shù)。

3、對能力驗(yàn)證樣品結(jié)果的判別

仔細(xì)分析樣品檢測過程，譜圖、計(jì)算及結(jié)果數(shù)據(jù)，特別是對于能力驗(yàn)證樣品中添加濃度含量低的化合物，著重比較試劑空白和樣品空白的譜圖，盡量防止出現(xiàn)漏判、誤判的可能性。