葡萄果肉提取物抗氧化能力研究

俞景圣++閆如梅++陳兆東++王少磊++儲軍

摘要 研究葡萄果肉不同提取物的抗氧化能力，測定不同果肉提取溶液對羥基自由基、超氧陰離子自由基、DPPH自由基的清除率以及抗脂質過氧化的保護作用。結果表明：葡萄果肉提取物溶液能清除羥基自由基、超氧陰離子自由基、DPPH自由基，有抗脂質過氧化活性和還原能力，說明葡萄果肉提取物具有抗氧化能力。

關鍵詞 葡萄果肉；提取物；抗氧化能力

中圖分類號 TS262.4 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2017）02-0246-02

Research on Anti-oxidative Activity from Grape Pulp Extracts

YU Jing-sheng 1 YAN Ru-mei 2 CHEN Zhao-dong 1 WANG Shao-lei 1 CHU Jun 1

（1 Anhui Yeling Beverage Food Co.，Ltd.，Huoshan Anhui 237271； 2 Huainan Minfen Fruit and Vegetable Specialized Cooperatives）

Abstract The research aimed to study anti-oxidative activity from grape pulp extracts.The scavenging abilities on hydroxyl radicals，superoxide anion radicals，DPPH radicals and anti-lipid peroxidation activity were studied.The results showed that grape pulp extracts could eliminate free radical including hydroxyl radicals，superoxide anion radicals，and DPPH，and have inhibit anti-lipid peroxidation activity and reducing activity.The results indicated grape pulp extracts possess anti-oxidative activity.

Key words grape pulp；extract；antioxidant activity

葡萄屬葡萄科植物葡萄的果實，為落葉藤本植物，是世界最古老的植物之一。葡萄原產于歐洲、西亞和北非一帶，在我國已有2 000多年栽培歷史，主要產于新疆、甘肅、山西、河北、山東等地。近年來，隨著社會的發展和人們生活水平的提高以及保健意識的增強，葡萄及葡萄酒的需求量越來越大。已有大量研究發現，葡萄皮和葡萄籽中所含的白藜蘆醇和原花青素具有明顯的抗氧化性、抑制腫瘤細胞增殖活性及抑制新生血管形成的能力。葡萄在鮮食中果皮攝入比例很小，且葡萄籽多剔除不食用，因此鮮食中葡萄果肉的攝入量最大。以去皮的巨峰葡萄作為研究材料，對其不同乙醇和水浸提物的抗氧化能力進行評價，以全面認識葡萄的功效。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

供試葡萄品種為巨峰；供試儀器有KL04A離心機、752紫外分光光度計、RE-10/20旋轉蒸發儀、LGJ-10試驗型真空冷凍干燥機。

1.2 試驗方法

葡萄果肉提取物的制備：500 g去皮葡萄→勻漿→各加入不同溶劑（蒸餾水、100%乙醇、75%乙醇與50%乙醇溶液）室溫振蕩浸提2次→合并濾液→真空濃縮→冷凍真空干燥獲得提取固形物，用水稀釋得各濃度梯度的樣品溶液。

采用鄰苯三酚自氧化法[1]清除超氧陰離子自由基；采用D-脫氧核糖-Fe體系法[2]清除羥基自由基；采用亞油酸體系法[3]測定抗脂質過氧化活性；采用普魯士蘭法[4]測定提取物還原力。清除DPPH[5]：吸取1 mL樣液，移入試管中，加1 mL 0.1 mmol/L DPPH的乙醇溶液，室溫靜置30 min，于525 nm波長測定吸光度。以空白作參比，計算公式如下：

清除率（%）=[1-（A-A1）/A0]×100

式中：A0—DPPH與無水乙醇吸光度；A1—樣品與無水乙醇吸光度；A—樣品與DPPH吸光度。

2 結果與分析

2.1 提取物對超氧陰離子自由基的清除能力

由圖1可以看出，隨著提取物濃度的增大，對超氧陰離子自由基的清除能力就越大。不同乙醇濃度的提取物隨著乙醇濃度的增加，提取物對超氧陰離子自由基的清除能力也逐步增強。其中100%乙醇濃度下的提取物較其他提取物對超氧陰離子自由基的清除能力最強。75%乙醇、50%乙醇、水3種提取物的清除能力相近。葡萄果肉提取物對超氧陰離子自由基的清除能力均小于VC。

2.2 提取物對羥基自由基的清除能力

采用Fenton提供羥基自由基，向反應體系中加入不同的樣品，以水楊酸鈉作為羥基自由基的捕獲受體測定樣品對羥基自由基的清除率。隨溶液濃度增加，不同提取物對羥基自由基的清除能力逐步增加，溶液濃度為0.02～0.05 mg/mL時，對羥基自由基的清除能力呈直線上升趨勢。100%乙醇葡萄果肉提取物對羥基自由基的清除能力最強，接近VC的清除能力；水提取物對羥基自由基的清除能力最弱（圖2）。

2.3 提取物對DPPH自由基的清除能力

由圖3可看出，不同提取物對DPPH自由基的清除率都隨濃度的增加而增加，相同濃度下，提取所用乙醇濃度越高，提取物對DPPH自由基的清除率越高；VC對DPPH自由基的清除率最高，其次是100%乙醇提取物和75%乙醇提取物，它們對DPPH自由基的清除能力相近；50%乙醇和水的提取物對DPPH自由基的清除率最低。

2.4 提取物的抗脂質過氧化能力

采用亞油酸體系法測定抗脂質過氧化活性，于234 nm下測定吸光度，計算其脂質過氧化抑制率。隨著葡萄果肉提取物濃度增高，其抗脂質過氧化的抑制率增高（圖4）。VC的抑制力最高，其次為100%乙醇、75%乙醇、50%乙醇和水提取物。

2.5 還原能力

采用普魯士蘭法測定還原力，在700 nm下測定OD值。OD值越大，還原能力越強。由圖5可以看出，在一定濃度的乙醇提取物中，隨著樣品濃度的增加，測得OD值越大，說明其還原能力越強，其中VC的還原能力最強。相同濃度下，還原能力從大到小依次為100%乙醇提取物>75%乙醇提取物>水提取物>50%乙醇提取物。

3 結論

在一定溶液濃度范圍內，葡萄提取物對羥基自由基、超氧陰離子自由基、DPPH自由基的清除率、抗脂質過氧化以及還原力是隨著溶液濃度的增加，但是其抗氧化的能力低于VC。總體試驗揭示葡萄果肉提取物具有較強的綜合抗氧化能力，但是不同溶劑獲得提取物其具有不同的抗氧化能力[6]。

4 參考文獻

[1] 陳衛軍，曹 煒.麥胚提取物的抗氧化性研究[J].食品科學，2004，25（10）：294-300.

[2] 陳彥，孫玉軍，方偉.威靈仙多糖的抗氧化活性研究[J].中華中醫藥雜志，2008，23（3）：266-270.

[3] 張赟彬，龔鋼明，戴妙妙.甘薯多酚粗提取液的抗氧化活性研究[J].中國糧油學報，2007，22（5）：76-79.

[4] 趙愛云，劉宗國，王燕娜.山楂提取物對豬油抗氧化作用研究[J].中國糧油學報，2008，23（2）：114-116.

[5] 劉富崗，弓建紅，楊云，等.白扁豆等4種中藥多糖的體外抗氧化活性研究[J].河南科學，2009（10）：7-10.

[6] 孫文凱，袁懷波，許衛，等.芡實殼提取物抗氧化能力研究[J].食品工業科技，2011（4）：100-102.q