鹽酸二甲雙胍片制備及體外一致性評價

胥楊，常興盛，李筱婷，丁蕾，田麗娟

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鹽酸二甲雙胍片制備及體外一致性評價

胥楊1，2，常興盛2，李筱婷2，丁蕾2，田麗娟1

（1. 沈陽藥科大學，遼寧 沈陽 110000； 2. 遼寧遠大諾康生物制藥有限公司，遼寧 沈陽 110000）

：以QbD理念為核心設計處方，以期制得與參比制劑溶出行為相似的樣品。：以QbD為核心，利用風險評估的方法，選取高風險因素設計正交試驗，使用軟件對結果分析，并測定自制品的溶出曲線，計算2。：當甘露醇和玉米淀粉為10 mg/片、5 mg/片，羥丙甲纖維素8 mg/片，制粒時間為45 s時，溶出度和脆碎度最優，自制品與參比制劑比較，在四種介質（水、pH 1.2、pH 4.0、pH 6.8）中溶出曲線相似因子2分別為66、69、76、72。：自制樣品與參比制劑在4種介質中溶出行為相似。

鹽酸二甲雙胍片；藥劑學；正交試驗；溶出曲線；一致性評價

目前藥品一致性評價已經在國內全面展開，各大企業競相比拼。一致性評價對企業是生死問題，是優勝劣汰的過程，這就要求企業重新設計產品質量，重新考察處方及生產工藝，需要企業加大資金、人力、物力的投入。由于通過一致性評價的企業可以享受到國家給予的一系列獎勵政策，可以重新制定價格，可以重新定義市場份額、甚至可以打開國際市場，因此企業開展一致性評價工作既是挑戰，也是機遇。鹽酸二甲雙胍片是國家公布的第一批需完成一致性評價的289個基本品種之一，這些品種在2018年底必須完成一致性評價工作，未完成不予再注冊[1]。國內現有約50多家企業在生產該品種，盡快完成一致性評價工作對未來市場布局極其關鍵[2]。

由于中國藥典2015版鹽酸二甲雙胍片（普通片）標準中規格僅有250 mg，除進口和進口本地化除外，國內各大藥廠生產規格均為250 mg，而目前公開報道的文獻均是以中美施貴寶公司的500 mg規格(格華止)為參比制劑，但不同規格不能豁免體內生物等效性試驗（BE）[3]，根據國家食品藥品監督管理總局網站最新公布的第五批參比制劑目錄，250 mg規格以日本新藥株式會社的鹽酸二甲雙胍片為參比制劑[4]。因此，本文以該鹽酸二甲雙胍片為參比制劑，圍繞QbD理念為核心[5-6]，用風險評估的方法，采用Minitab軟件設計正交試驗對處方進行優化[7-8]，并考察多條溶出曲線相似性。

1 實驗部分

1.1 儀器

G6實驗室多功能濕法混合制粒機（深圳市信宜特科技）；DHG-9246A電熱恒溫干燥箱（上海精宏實驗設備有限公司）；ZP10A旋轉壓片機（北京國藥龍立科技有限公司）；BYC-300高效智能包衣機（廣州雷邁機械設備有限公司）；708DS+850DS自動溶出儀（安捷倫科技有限公司）；紫外可見分光光度計Lambda35（美國珀金埃爾默公司）。

1.2 藥劑

二甲雙胍原料（170419，山東科源制藥有限公司）；二甲雙胍對照品（031584，國藥集團化學試劑有限公司）；甘露醇（E869G，廣州市道明化學有限公司）；玉米淀粉（20170304，山東聊城阿華制藥股份有限公司）；羥丙甲纖維素（1K040124L1，陶氏化學有限公司）；硬脂酸鎂（151203，安徽山河藥用輔料股份有限公司）；歐巴代（型號04B59001，THL45049,上海卡樂康包衣技術有限公司）；其余試劑為分析純。

2 試驗方法

2.1 處方前研究

鹽酸二甲雙胍屬于BCSⅢ類，具有高溶解低滲透特性，溶解度屬于非PH依賴型，不受酸堿影響。制劑規格250 mg，片重約278 mg，處方中原料占比達90%，流動性差，故采用濕法制粒改善流動性。

根據參比制劑說明書輔料信息，用玉米淀粉或羥丙甲纖維素為粘合劑。經試驗發現，以玉米淀粉為粘合劑時，片劑的溶出現象與參比制劑有很大差距：溶出速度遠低于參比制劑；溶出過程杯中有很多不溶性漂浮物（淀粉漿），而參比制劑沒有。因此，確定粘合劑采用羥丙甲纖維素。

2.2 關鍵質量屬性（CQAs）

該制劑的質量屬性中，水分、硬度、含量、含量均勻度、有關物質較易控制和把握。脆碎度較難控制，脆碎度不好，片劑的外觀有殘損，邊緣掉渣，而溶出度又是口服固體制劑的重中之中，因此本處方的關鍵質量屬性（CQAs）主要研究脆碎度和溶出度，考察處方和工藝對兩個屬性的影響。

2.3 風險評估

對處方和工藝兩方面分別進行風險評估，見表1。風險等級設置為高中低三個等級，并且對各變量均采取相應控制措施。

表1 處方和工藝風險評估表

2.4 試驗設計

通過風險評估表可知，有5個高風險變量，排除干燥工序后（通過控制措施，風險得到降低），剩余變量采用正交試驗進一步考察，采用3因素，3水平， L9（33）試驗對關鍵輔料用量和關鍵工藝參數進行優化，考察15 min溶出度Y1（參考日本橙皮書公布的溶出曲線，參比制劑為速釋，15 min溶出度約90%）和脆碎度Y2（應小于1%，期望得到最小值）。各因素及水平設置見表2。

表2 各因素及水平設置

2.5 處方制備

先用80 ℃水溶解羥丙甲纖維素作為粘合劑。將二甲雙胍、甘露醇、玉米淀粉手動混合后置于濕法制粒鍋內，加入粘合劑，制粒，于40 ℃干燥，水分控制在1.0%~3.0%，過80目篩整粒，加入1%硬脂酸鎂，壓片，片芯包衣，包衣粉制成含固量12%的水溶液，包衣增重3%即得自制品。

2.6 溶出度測定方法

參考《中國藥典2015版》二部、《普通口服固體制劑溶出度試驗技術指導原則》和《日本橙皮書》，4種介質為：水、pH1.2、pH4.0、pH6.8，介質體積900 mL，轉速50 r/min，取樣點5、15、30、45（min），每次取樣體積10 mL（補液10 mL），溶液用0.45 μm濾頭過濾，棄去初濾液8 mL，取續濾液1 mL，用水定量稀釋至50 mL（每l mL中約含鹽酸二甲雙胍5 μg），按照紫外-可見分光光度法（通則0401)，在233 nm的波長處測定吸光度；另取鹽酸二甲雙胍對照品10 mg，精密稱定，加水溶解并定量稀釋至100 mL，再精密量取上述溶液10 mL，加水稀釋至200 mL（每l mL中約含鹽酸二甲雙胍5 μg），同法測定，計算含量。

3 結果

3.1 試驗結果

使用Minitab軟件按照表2進行試驗設計，得到9組試驗，各試驗結果見表3。對試驗結果進行分析，忽略各因素之間交互作用，得到溶出度Y1和脆碎度Y2的均值響應表（表4）和均值主效應圖(圖1)。

表3 試驗設計結果

表4 Y1和Y2均值響應表

以上結果表明，對Y1影響因素大小為B＞A＞C，對Y2影響因素大小為B＞C＞A，再對結果進行方差分析（見表5和表6），判斷各因素的影響對Y1、Y2是否具有顯著性。

表5 影響YI各因素方差分析

表6 影響Y2各因素方差分析

*值：顯著性水平，當＜0.05時，存在顯著性差異

方差分析表明，影響Y1和Y2的各因素P值均＜0.05，說明各因素對Y1、Y2具有顯著性影響。通過軟件得出回歸方程：

Y1=76.667+3.667A1-0.333A2-3.333A3-3.000B1+18.333B2- 15.333B3- 0.333C1- 3.000C2+ 3.333C3, R2= 0.998 6

Y2=0.316+0.014A1+0.064A2-0.079A3+0.198B1+0.021B2-0.219B3-0.082C1+0.098C2-0.016C3，R2=0.999 5

相關性好的模型R2應大于0.8，本試驗Y1、Y2的R2分別為0.998 6、0.999 5，說明回歸模型對試驗擬合較好。

3.2 試驗優化

將兩組方程輸入軟件優化試驗結果，得到最優搭配，見圖2。最優搭配為：A3B2C1，即甘露醇和淀粉量為10 mg/片、5 mg/片，羥丙甲纖維素8 mg/片，制粒時間為45 s時，溶出度為91.3%，脆碎度為0.18%。由此，可以確定最終處方，最終處方見表7。

圖2 YI、Y2優化圖

表7 最終處方

3.3 溶出度測定

按照3.5的制備方法和最終得到的處方和工藝制備一批樣品，測定其在四種介質中的累積溶出度并與參比制劑進行比較（見圖3），計算2值。結果顯示，在水、pH1.2、pH4.0、pH6.8 4種介質中2分別為66、69、76、72，判定與參比制劑相似。

4 討論

本試驗進行溶出曲線比對的目的是通過觀察溶出現象發掘其與參比制劑之間的內在差異。但根據《普通口服固體制劑溶出度試驗技術指導原則》，在考察溶出度時，如果在15 min時溶出度大于85%，無需進行2計算。因此，在今后的考察中，只需測定15 min時的溶出度即可。

圖3 溶出曲線對比圖

本文以Qbd理念為核心，經過前期試驗先確定產品的關鍵質量屬性（CQAs），再通過風險評估找出影響CQAs的關鍵物料屬性（CMAs）和關鍵工藝參數（CPPs），并設計試驗對各個因素進行優化。通過篩選最優處方和工藝條件，最大限度地達到與參比制劑一致，同時降低了風險。在以后的放大環節中，由于制約因素增多，更要細致、全面的進行風險評估。

由于溶出度是采用體外的方法模擬人體對藥物吸收過程，做好溶出曲線一致性能夠提高人體生物等效性試驗（BE）的成功率，但最終自制品與參比制劑在療效上是否一致還需要通過BE試驗進行驗證。

［1］國家食品藥品監督管理總局. 關于落實《國務院辦公廳關于開展仿制藥質量和療效一致性評價的意見》有關事項的公告[EB/OL]. 2016-5-25.http://www.sda.gov.cn/WS01/CL1757/154042.html

［2］胡林峰，虞忠. 仿制藥一致性評價的產業影響研究[J]. 中國醫藥工業雜志，2016, 47（8）：1097-1100.

［3］國家食品藥品監督管理總局. 人體生物等效性試驗豁免指導原則[S]. 2016．

［4］國家食品藥品監督管理總局. 關于發布仿制藥參比制劑目錄（第五批）的通告[s]. 2017.

［5］王明娟，胡曉茹，戴忠，等. 新型的藥品質量管理理念“質量源于設計”[J]. 中國新藥雜志，2014, 23（8）：948-954．

［6］FDA仿制藥辦公室.“質量源于設計”理念應用于仿制藥申報[M].北京:北京大學藥物信息與工程研究中心，2016．

［7］彭愛紅. Minitab 軟件在有重復試驗的正交試驗設計中的應用[J].集美大學學報，2013, 14（1）: 111-114．

［8］張愛麗，章晨峰，邵杰. 基于Minitab 軟件優化天舒膠囊一步制粒工藝[J]. 中草藥，2013, 44（22）: 3131-3135．

Preparation and External Consistency Evaluation of Metformin Hydrochloride Tablets

1.2,2,2,2,1

（1. Shenyang Pharmaceutical University, Liaoning Shenyang 110000，China；2. Liaoning Yuanda Nuokang Biopharma Pharmaceutical Co., Ltd., Liaoning Shenyang 110000，China）

Objective：To design the formulation based on the concept of QbD, in order to prepare the sample that has similar dissolution behavior with reference listed drug.Methods：With the methods of QbD and risk evaluation,high risk factors were used for designing orthogonal test, and the software was used to analyze the results. And then samples dissolution curve were determined and similarity factor f2 was calculated. Results：when the amount of mannitol,starch and HPMC was 10mg/tablet,5mg/tablet,8mg/tablet，the granulation time was 45 s，the best solubility and crispness can be achieved. Compared reference listed drug,the f2 of self-prepared samples was respectively 66,69,76 and 72 in four kinds of dissolution media（water,pH1.2,pH4.0,pH6.8）. Conclusion：the dissolution behaviors of self-prepared samples and the reference listed drug are similar in four kinds of dissolution media.

metformin hydrochloride tablets; pharmacy; orthogonal test; dissolution curve; consistency evaluation

2017-08-28

胥楊（1986-），男，碩士研究生在讀，遼寧省沈陽市人，研究方向：主要從事藥物制劑研究工作。

田麗娟（1973-），女，副教授，博士，研究方向：主要從事新藥研發與注冊管理的研究。

TQ 460

A

1004-0935（2017）11-1048-05