衢州市主要病媒生物對常用衛生殺蟲劑的抗藥性調查

朱霖+胡曉龍++陸獻耀

[摘要] 目的 了解衢州市淡色庫蚊、家蠅、德國小蠊對常用衛生殺蟲劑的抗性現狀，為科學使用化學殺蟲劑防制病媒生物提供可靠依據。 方法 溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、殘殺威、敵敵畏、氯菊酯、仲丁威、乙酰甲胺磷7種殺蟲劑來源于中國疾病預防控制中心。現場試蟲來源于衢州市區農貿市場、餐飲場所、賓館飯店、垃圾中轉站、垃圾箱桶等，對照試蟲來源于浙江省疾病預防控制中心實驗室。浸漬法測定淡色庫蚊4齡期幼蟲的半數致死濃度，點滴法分別測定家蠅和德國小蠊的半數致死量。 結果 淡色庫蚊自然品系對敵敵畏、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、仲丁威、殘殺威抗性倍數分別為16.87、13.08、9.52、7.66、2.63倍；家蠅自然品系對高效氯氰菊酯、溴氰菊酯、敵敵畏、殘殺威、氯菊酯抗性倍數分別為13.14、6.22、5.59、5.21、4.87倍；德國小蠊自然品系對高效氯氰菊酯、乙酰甲胺磷、溴氰菊酯、氯菊酯、殘殺威抗性倍數分別為23.69、14.51、11.58、8.99、8.20倍。 結論 根據抗性判定標準，淡色庫蚊、家蠅、德國小蠊自然品系對7種常用殺蟲劑存在不同程度的抗性，其中德國小蠊對高效氯氰菊酯為高抗。

[關鍵詞] 病媒生物；衛生殺蟲劑；抗性倍數；淡色庫蚊；家蠅；德國小蠊

[中圖分類號] R184.3 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2017）01（b）-0062-04

Study on resistance of major vectors in Quzhou to common hygienic insecticide

ZHU Lin1 HU Xiaolong2 LU Xianyao1

1.Quzhou Office of Patriotic Health Campaign Committee， Zhejiang Province， Quzhou 324000， China； 2.Prevention and Control of Infectious Diseases Section， Quzhou Center for Disease Control and Prevention， Zhejiang Province， Quzhou 324000， China

[Abstract] Objective To understand the insecticide resistance status of Culex pipiens pallens， Musca domestica vicina and Blattella germanica in Quzhou， in order to provide a reliable basis for using chemical insecticides scientifically for vector prevention and control. Methods Seven kinds of insecticides which included Deltamethrin， Beta-cypermethrin， Propoxur， Dichlorvos， Permethrin， Fenobucarb and Acephate were from China CDC. Field test insects were from farm product market， dining places， hotels， waste transfer station and dustbins in Quzhou City， while contrast test insects were from Zhejiang Province CDC laboratory. The dipping method was used to determine median lethal concentration for the 4th larval instar of Culex pipiens pallens. The drop method was used to determine median lethal dose for adult Musca domestica vicina and Blattella germanica. Results The resistance ratios of natural strain of Culex pipiens pallens to Dichlorvos， Deltamethrin， Beta-cyfluthrin， Fenobucarb， Propoxur were 16.87， 13.08， 9.52， 7.66， 2.63 respectively. The resistance ratios of natural strain of Musca domestica vicina to Beta-cyfluthrin， Deltamethrin， Dichlorvos， Propoxur， Permethrin were 13.14， 6.22， 5.59， 5.21， 4.87 respectively. The resistance ratios of natural strain of Blattella germanica to Beta-cyfluthrin， Acephate， Deltamethrin， Permethrin， Propoxur were 23.69， 14.51， 11.58， 8.99， 8.20 respectively. Conclusion According to resistance criteria， natural strains of Culex pipiens pallens， Musca domestica vicina， and Blattella germanica have different degree of resistance to seven kinds of insecticide， in which Blattella germanica has high resistance to Beta-cyfluthrin.

[Key words] Vector； Hygienic insecticide； Resistance ratio； Culex pipiens pallens； Musca domestica vicina； Blattella germanica

蚊、蠅、蟑螂是愛國衛生工作主要關注的幾種病媒生物，可引起傳病、騷擾、損物等危害，且孳生場所廣泛、繁殖快，化學殺蟲劑是目前使用最廣泛的防制手段。抗藥性是因不合理的連續大量應用殺蟲劑產生的，對抗藥性監測是殺蟲藥劑合理使用、害蟲抗藥性治理及評價害蟲抗藥性治理措施等有效性的手段[1]。為了解衢州市蚊、蠅、蟑螂的抗藥性情況，在衢州市區采用多點取樣法現場采集測試蟲自然品系，并調查它們對7種常用殺蟲劑的抗藥性，現將結果報道如下：

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 殺蟲劑 溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、殘殺威（前3種測蚊蠅蟑）、敵敵畏（測蚊蠅）、氯菊酯（測蠅蟑）、仲丁威（測蚊）、乙酰甲胺磷（測蟑），均由中國疾病預防控制中心流研所提供。

1.1.2 現場試蟲 現場試蟲（自然品系）均采集于衢州市區農貿市場、餐飲場所、賓館飯店、垃圾中轉站、垃圾箱桶等孳生環境；其中，淡色庫蚊的卵塊或成蚊，攜回實驗室經鑒定后培育繁殖1～2代的4齡期幼蟲作測試用蟲；家蠅成蠅，攜回實驗室經鑒定后培育繁殖1～2代，羽化后3～5 d成蠅作測試用蟲；德國小蠊雄性成蟲，攜回實驗室繁殖飼養1～2代，羽化后4～5 d的雄性成蟲作測試用蟲。

1.1.3 對照試蟲 浙江省疾病預防控制中心病媒所實驗室長期飼養不接觸殺蟲劑的敏感品系（正常品系）作為對照。

1.2 實驗方法

1.2.1 環境條件 抗性測試室和飼養室：室溫（26±1）℃，相對濕度60%～70%。

1.2.2 淡色庫蚊 于2013年采用蚊幼蟲藥液浸漬法測定淡色庫蚊4齡期幼蟲半數致死濃度（LC50）。先將殺蟲劑原藥用丙酮逐步稀釋成等差或等倍5～7個濃度組，現配現用；取50 mL容器若干只，每只放入適量脫氯水和4齡期幼蟲20條；取500 mL容器若干只，每只加脫氯水150 mL，根據設定濃度用刻度吸管吸取藥液置入容器，用玻璃棒從低濃度向高濃度逐一攪拌均勻；把50 mL容器內的幼蟲倒500 mL容器內，24 h時檢查死亡數。同一個測試濃度重復5次，并設空白對照組。

1.2.3 家蠅 于2014年采用點滴法測定家蠅成蠅半數致死量（LD50）。先將殺蟲劑原藥用丙酮逐步稀釋成等差或等倍5～7個濃度組，現配現用；將家蠅用乙醚麻醉后，挑選50只雌性成蠅放置于玻璃平皿；用微量點滴器按1 μL/只的劑量點滴于中胸背板，再移入潔凈的飼養籠內正常飼養，24 h時檢查成蠅死亡數，試驗重復2次。對照組用丙酮液同劑量處理，死亡率大于20%時，試驗重做。

1.2.4 德國小蠊 于2015年采用點滴法測定德國小蠊成蟲LD50。先將殺蟲劑原藥用丙酮逐步稀釋成等差或等倍5～7個濃度組，現配現用；將德國小蠊用乙醚麻醉后，挑選30只雄性成蟲置于平皿中，用微量點滴器按1 μL/只的劑量點滴于第2、3對足基節間的腹板上，再放入清潔的養蟲籠內正常飼養，24 h后檢查死亡數。試驗重復3次。對照組用丙酮液同劑量處理，死亡率大于20%時，試驗重做。

1.3 死亡判定標準

淡色庫蚊以針刺蟲體不動者為死亡。家蠅六足緊縮，用針觸蟲體不能翻身爬行者為死亡。德國小蠊腹部上翻，六足抽搐，用針觸蟲體不能翻身爬行者為死亡；蟲體恢復正常姿勢但不能移動也視為死亡。

1.4 抗性分級

抗性倍數（R/S）=自然品系LD50值（或LC50）/正常品系LD50值（或LC50）。抗性倍數>20倍為高抗，10～20倍為中抗，2～<10倍為低抗。

1.5 統計學方法

采用SPSS 17.0統計學軟件進行數據分析，求出LC50、LD50及抗性倍數，運用配對t檢驗方法分析試蟲對測試殺蟲劑的半數致死濃度（量）的差異，以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 淡色庫蚊的抗藥性測定結果

衢州市淡色庫蚊對5種常用衛生殺蟲劑的抗藥性測定，敵敵畏和溴氰菊酯處于中抗水平，抗性倍數分別為16.87倍和13.08倍；高效氯氰菊酯、仲丁威、殘殺威的抗性倍數在2.63～9.52倍之間，處于低抗水平。見表1。自然品系與正常品系對測試殺蟲劑的LC50經配對t檢驗，差異無統計學意義（t=1.942，P=0.124）。

2.2 家蠅的抗藥性測定結果

衢州市家蠅對5種常用衛生殺蟲劑的抗藥性測定，高效氯氰菊酯處于中抗水平，抗性倍數為13.14倍；溴氰菊酯、敵敵畏、殘殺威、氯菊酯的抗性倍數在4.87～6.22倍之間，處于低抗水平。見表2。自然品系與正常品系對測試殺蟲劑的半數致死量經配對t檢驗，差異無統計學意義（t=1.302，P=0.263）。

2.3 德國小蠊的抗藥性測定結果

衢州市德國小蠊對5種常用衛生殺蟲劑的抗藥性測定，高效氯氰菊酯為高抗水平，抗性倍數為23.69倍；其次乙酰甲胺磷和溴氰菊酯，抗性倍數分別為14.51倍和11.58倍，處于中抗水平；氯菊酯和殘殺威的抗性最低，抗性倍數分別為8.99倍和8.20倍。見表3。自然品系與正常品系對測試殺蟲劑的半數致死量經配對t檢驗，差異有統計學意義（t=6.375，P=0.003）。

3 討論

3.1 衢州市主要病媒生物對常用衛生殺蟲劑存在不同程度的抗藥性

本次抗藥性調查以正常品系作為基數，與采集于不同孳生環境的自然品系進行比較測定，結果顯示，3種不同自然品系對7種測定的常用衛生殺蟲劑均存在不同程度的抗性。從衢州市近3年開展的病媒生物密度監測來看，蚊蟲優勢種類均為淡色庫蚊，2013、2014、2015年占比分別為81.31%、66.17%、76.27%；蠅類優勢種類均為家蠅，2013、2014、2015年占比分別為33.46%、32.53%、28.57%；蟑螂優勢種類均為德國小蠊，2013、2014、2015年占比分別為79.71%、79.21%、77.90%，主要優勢種和浙江省病媒生物監測結果一致[2]，與此次抗藥性調查監測的測試蟲種相同。蚊蟲密度監測采用的是誘蚊燈法[3]，誘捕時間為日落前1 h至次日日出后1 h，淡色庫蚊、中華按蚊和騷擾阿蚊的吸血活動高峰在此期間，而伊蚊大多在白天吸血[4]。因此，筆者認為蚊種群密度監測方法有待進一步研究，與其他研究者考慮相同[3-5]。本次抗藥性調查使用的3種擬除蟲菊酯類藥物中，淡色庫蚊、家蠅、德國小蠊自然品系對高效氯氰菊酯的抗性分別為接近中抗水平、中抗水平、高抗水平，對溴氰菊酯的抗性分別為中抗水平、低抗水平、中抗水平；家蠅、德國小蠊自然品系對氯菊酯的抗性均為低抗水平。兩種有機磷類藥物中，淡色庫蚊、家蠅對敵敵畏的抗性分別為中抗水平、低抗水平，且淡色庫蚊對敵敵畏的抗藥性最強，與浙江省麗水、千島湖[5-6]等城市情況相似；德國小蠊對乙酰甲胺磷的抗性水平為中抗水平。兩種氨基甲酸酯藥物中，淡色庫蚊、家蠅、德國小蠊自然品系對殘殺威的抗性均為低抗水平，淡色庫蚊對仲丁威的抗性水平為低抗。

3.2 抗藥性的發生與衛生殺蟲劑的應用情況有關

衢州市于2005年開始實施公共外環境病媒生物防制市場化運作，隨著社會經濟的發展和衛生創建的深入，目前各大型賓館飯店、超市、農貿市場以及部分醫院、學校等重點單位病媒生物防制工作由有害生物防制業PCO實施，實行市場化運作的情況越來越普遍，也取得明顯成效。由于擬除蟲菊酯類殺蟲劑具有高效、廣譜、低毒、低殘留等特點，衢州市多選用擬除蟲菊酯類殺蟲劑進行蚊蠅蟑的消殺，用量大、使用頻率高；其次是有機磷，像敵敵畏主要作為速殺藥劑，乙酰甲胺磷是滅蟑的主要藥劑。衛生殺蟲劑仍然是人們的一個剛性需求[7]。2015年，衢州市組織開展了本地殺蟲劑生產企業和有害生物防制服務機構等專業機構以及大中型超市和小商品市場等流通單位的抽樣調查。根據調查情況來看，全市衛生殺蟲劑品種從多到少依次為擬除蟲菊酯、有機磷、氨基甲酸酯、煙堿類、有機氟、硝基亞胺類；其中，專業機構擬除蟲菊酯占64.18%，有機磷和氨基甲酸酯分別占11.94%；流通單位擬除蟲菊酯占97.64%，有機磷和氨基甲酸酯分別占0.79%和0.40%，可知衢州市擬除蟲菊酯類殺蟲劑的市場最為廣泛。抗藥性發生程度與化學殺蟲劑的用藥量、使用頻率等密切相關，與任樟堯等[8]調查相同。

3.3 根據調查結果提出主要病媒生物的防制對策

病媒生物防制是一項民生工程，通過有效防制可以減少病媒生物對人類的騷擾和經濟損失，更可以預防控制蟲媒疾病的發生流行[9-10]。衢州市是浙江省首個全市域國家級生態示范區[11]，隨著人們健康意識及環保意識的增強，病媒生物防制工作在追求高效的同時，應多關注殺蟲劑對環境的影響[12]。殺蟲劑具有污染環境、造成非靶有益昆蟲的死亡和抗藥性產生等缺點，所以需采用綜合措施來達到有效防制的目的[13]。根據調查結果，現提出如下防制建議：①深化環境衛生整治。全市上下要以創建國家衛生城市和縣城為抓手，實施以環境治理為主的綜合措施，有效促進病媒生物預防控制工作開展[14-16]。廣泛宣傳鼠、蚊、蠅、蟑螂等“四害”與環境衛生之間的關系，改變單純靠藥物消殺的觀念，通過多采取環境治理的治本措施消滅“四害”。病媒生物防制的環境治理與廣義的環境衛生整治有區別，它應側重對孳生地的處理，包括搞好室內外環境衛生，切斷食源，堵塞鼠洞，翻箱倒柜，堵抹縫隙，疏通溝渠，清理積水，垃圾桶加蓋，垃圾不落地、日產日清。通過最大程度清除孳生場所，減少衛生殺蟲劑的使用。②強化防滅設施配置。加大投入，強化重點單位場所安裝箅子、地漏、擋鼠板、防鼠網等防鼠設施和紗門、紗窗、風幕機、門簾、紗罩等防蠅設施[17-18]；推進在公共區域和重點區域使用滅鼠毒餌站、鼠夾、鼠籠、粘鼠板和滅蠅燈、捕蠅籠、粘蠅條，滅蚊燈、毒蚊缸、防蚊閘、電蚊拍，以及蟑螂盒等物理除“四害”方法。③優化殺蟲藥物使用。采取化學防制時，要明確技術要領，規范施藥方法，合理控制藥物濃度，盡量減少施藥頻次。應減少使用已有高抗水平和中抗水平的衛生殺蟲劑，并根據不同類型殺蟲劑的抗性機制，采用復配殺蟲劑或者增效劑與殺蟲劑復配以降低或者減緩抗藥性的發生[19]。通過生物防制來克服化學防制的缺點。定期開展病媒生物抗藥性監測工作[20]，及時掌握蚊、蠅、蟑螂的抗藥性狀況，指導殺蟲劑的合理使用和病媒生物的科學防制。

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（收稿日期：2016-10-08 本文編輯：程 銘）